宋维春,裴志胜,孙宏元,梁志鹏,李欣怡,徐云升

(海南热带海洋学院 生命科学与生态学院,海南 三亚572022)

HPLC法测定纤维低聚糖的研究

宋维春,裴志胜,孙宏元,梁志鹏,李欣怡,徐云升

(海南热带海洋学院 生命科学与生态学院,海南 三亚572022)

本研究运用HPLC法,采用Inertsil NH2柱、示差折光检测器,以乙腈-水为流动相,探索纤维二糖、纤维三糖、纤维四糖、纤维五糖的检测条件.实验结果表明:在检测器灵敏度为+8,流速为1 ml/min,进样量为10 μL条件下,适宜检测条件是:流动相为乙腈:水(v/v)=65:35,色谱柱温度为41℃.在该检测条件下,峰高Y与浓度X的定量检测方程为:纤维二糖Y=3001X-147.6;纤维三糖Y=915.9X+411.6;纤维四糖Y=1328X+10002;纤维五糖Y=2029X-1357.

HPLC法;纤维二糖;纤维三糖;纤维四糖;纤维五糖

低聚糖能选择性地促进肠道内双歧杆菌和乳杆菌的增殖,体外实验研究发现Bacteroides等多种肠道共生细菌也能利用低聚糖[1].纤维低聚糖是一种功能性低聚糖,有广泛的开发应用前景,但因其不稳定、易分解,目前国内对其检测研究报道甚少.张南南[2]用凝胶色谱法分离纯化纤维三糖-纤维六糖、并用电喷雾电离质谱进行了分析检定.

HPLC法在低聚果糖的检测中有很多应用[3-4],与其它方法相比是一种高效简便无损害的分析方法[5],本研究采用Inertsil NH2柱、示差折光检测器,以乙腈-水为流动相,探索纤维二糖、纤维三糖、纤维四糖、纤维五糖的检测条件,为纤维低聚糖的制备提供检测依据.

1 材料与方法

1.1 仪器及条件

LC-2010AHT高效液相色谱仪(岛津公司);

RD-20型示差折光显示器(岛津公司);

色谱柱:Inertsil NH2柱、4.6×250 mm,5 μm；

检测……