袁孔现，王继年

(1.铜陵市人民医院 药剂科，安徽 铜陵 244002；2.安徽医科大学第一附属医院 教育处，安徽 合肥 230032)

TUFT1真核表达质粒的构建及其功能研究

袁孔现1，王继年2

(1.铜陵市人民医院 药剂科，安徽 铜陵 244002；2.安徽医科大学第一附属医院 教育处，安徽 合肥 230032)

设计合成引物，扩增出TUFT1的CDS序列，双酶切后连接到pEGFP-C2载体上，将过表达质粒转染至胰腺癌细胞株中。结果显示，过表达组细胞的增殖率，显著高于空白组和对照组；过表达组细胞的凋亡率，显著低于空白组和对照组。成功构建TUFT1的真核表达载体，并初步确定TUFT1可以明显增强人胰腺癌细胞株的增殖，同时抑制其凋亡，为进一步探索TUFT1基因功能、寻求治疗胰腺癌的新途径提供了细胞学基础。

TUFT1；转染；增殖；凋亡

胰腺癌(PC)作为一种恶性程度非常高的消化系统肿瘤，具有发病隐匿、确诊困难、侵袭性强、转移性高、手术效果差且术后易复发等特点，导致患者病死率居高不下，5年生存率也不容乐观，有“癌症之王”的恶称，严重威胁着人类的生命健康[1-4]，因此，对PC发病机制和治疗策略的研究迫在眉睫。近些年来，基因工程技术快速发展，为医学研究和疾病治疗开辟了崭新的道路[5]。TUFT1基因首次发现并克隆于牛的成釉细胞中，其开放阅读框长度为1 170 bp，编码一种由390个氨基酸残基组成的、翻译修饰前分子量约为44 kDa的亲水性蛋白质[6]，国外最新研究表明，TUFT1在胰腺癌组织中存在高表达现象，并提示其在胰腺癌的转移中扮演着重要角色[7]。本文以此为线索，通过构建TUFT1的真核表达质粒，国内首次研究其对胰腺癌细胞系的增殖和凋亡的影响，为胰腺癌的治疗提供新方向。……