陈 军， 徐礼生， 张兴桃， 董 增

（宿州学院 生物与食品工程学院，安徽 宿州234000）

高效液相色谱法测定酶法制备L-色氨酸

陈 军， 徐礼生， 张兴桃， 董 增

（宿州学院 生物与食品工程学院，安徽 宿州234000）

研究了高效液相色谱法测定酶法制备L-色氨酸的最佳参数。结果表明，流动相分配比V（磷酸二氢钾溶液）∶V（甲醇）=30∶70，流量1 mL/min，C18柱分离，柱温38℃，检测波长265 nm时为高效液相色谱法检测L-色氨酸的最佳参数。回收率在92.00%～110.00%，外加丝氨酸没有干扰发酵液中L-色氨酸含量测定。此方法用于样品中的L-色氨酸的测定，分离效果良好。

高效液相色谱；L-色氨酸；酶法制备

L-色氨酸在人体是一种限制性氨基酸，也是一种必需氨基酸，在人体内无法合成，需要从食物中摄取。作为食品添加剂[1]，早期L-色氨酸的生产多采用化学合成法、蛋白质水解法等，由于酶法制备色氨酸具有成本低、周期短、产率高、质量好等优点，因此该技术将会成为L-色氨酸的工业化生产的主要方法。目前，L-色氨酸测定方法有氨基酸分析仪 、分光光度法和荧光法等[2-9]，鉴于高效液相色谱技术具有分辨率高、速度快、重复性高等优点，高效液相色谱法测定微生物发酵液中的L-色氨酸已有报道[10-11]，但高效液相色谱法用于酶法制备L-色氨酸的测定尚未见报道。作者通过考察流动相及其分配比、波长、柱温等因素，确立了高效液相色谱法测定酶法制备L-色氨酸的最适色谱条件，并进行了方法评价。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

丝氨酸，甲醇，L-色氨酸，磷酸二氢钾，氢氧化钠，双蒸水：以上试剂均为分析纯。……