翁源灿， 杨 彬， 程习文， 鄢成伟， 孙文正

（广东东阳光药业有限公司，广东 东莞 523867）

壳聚糖和pH对CHO细胞收获液澄清效率的影响

翁源灿， 杨 彬*， 程习文， 鄢成伟， 孙文正

（广东东阳光药业有限公司，广东 东莞 523867）

作者研究了壳聚糖和pH对中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary，CHO）培养液料液澄清过程的影响。初步探索了在CHO细胞收获液（pH 7.0）中添加0～0.10 g/dL壳聚糖对0.22 μm膜过滤通量的影响。结果显示，添加0.06 g/dL壳聚糖时膜过滤通量最大，达到8 266.22 L/（m2·h）。探索了pH值（5.0～7.0）对收获液澄清效率的影响，研究发现，不添加壳聚糖的情况下降低培养液pH值对膜过滤通量没有十分显著的提高。为更多地去除宿主细胞蛋白 （Host Cell Protein，HCP）和残留DNA，作者研究了pH值与壳聚糖对膜过滤通量及残留杂质的交互影响。结果表明，pH为5.0壳聚糖质量浓度为0.06 g/dL时滤出液中残留DNA几乎完全去除，HCP含量降低50%以上，而抗体的回收率不受影响。

壳聚糖；pH；CHO；絮凝；料液澄清

中国仓鼠卵巢（CHO）细胞是外源真核基因的最佳表达系统之一，也是生物制药中最常用的哺乳动物细胞[1-3]，外源蛋白质容易在CHO细胞中合成并分泌到培养基中[4]。在发酵法生产中，发酵液中存在大量细胞、细胞代谢物、剩余培养基以及表达产物组分以外的其他复杂组分。所以在提取精制之前必须进行预处理和过滤以除去这些干扰物质[5-6]。目前比较常用的预处理方法是离心过滤，然而发酵液中有大量的细胞碎片，HCP、DNA密度与水相近，离心并不能去除，所以需要往发酵液中加入絮凝剂[7]，通过吸附架桥作用将小颗粒群或已经凝结的小絮团结合成大絮团，增加颗粒密实度，以利于离心去除，从而改善发酵液过滤性能[8]。……