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枣实蝇气味结合蛋白基因的克隆及表达谱分析

2017-04-13李亚伟张小菊王科珂于艳雪张祥林张伟张俊华杨定陈乃中

新疆农业科学 2017年2期
关键词:研究

李亚伟,张小菊,王科珂,于艳雪,张祥林,张伟,张俊华,杨定,陈乃中

(1.中国检验检疫科学研究院植物检疫研究所,北京 100176;2.新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐 830063;3.中国农业大学,北京 100083)

枣实蝇气味结合蛋白基因的克隆及表达谱分析

李亚伟1,2,3,张小菊2,王科珂2,于艳雪1,张祥林2,张伟2,张俊华1,杨定3,陈乃中1

(1.中国检验检疫科学研究院植物检疫研究所,北京 100176;2.新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐 830063;3.中国农业大学,北京 100083)

【目的】克隆枣实蝇CarpomyavesuvianaCosta气味结合蛋白(odorant binding protein, CvcoOBP)基因,对其表达谱进行分析,为枣实蝇气味结合蛋白的深入研究奠定基础。【方法】对枣实蝇头部RNA进行转录组测序,通过蛋白序列比对以及构建系统进化树分析枣实蝇OBP序列,运用半定量反转录-聚合酶链反应(semi-quantitative reverse transcription and polymerase chain reaction, sqRT-PCR)方法对获得的CvcoOBP序列进行组织表达特异性研究。【结果】转录组测序后共获得7个OBP, 命名为 (GenBank登录号分别为:KU975053、KU975054、KU975055、KX059394、KU975056、KX059395、KX059396)。对CvcoOBP1-7进行蛋白序列比对发现,CvcoOBP1、CvcoOBP3、CvcoOBP4、CvcoOBP6、CvcoOBP7是典型的OBP家族成员,具有6个高度保守的半胱氨酸残基;CvcoOBP2和CvcoOBP5属于“Minus-C”家族成员,具有4个高度保守的半胱氨酸残基。系统进化分析结果显示,CvcoOBP1-7分别与不同的OBP有较近的进化关系。半定量PCR检测结果发现,CvcoOBP1-7在枣实蝇腹部、头部及胸部都有表达,且表达量较高;CvcoOBP1、CvcoOBP2在翅中有表达,但表达量相对较低 ;CvcoOBP1、CvcoOBP5、CvcoOBP6在足中也有表达,但表达量相对较低。【结论】获得并分析了7个CvcoOBP,不同CvcoOBP表达部位和表达量各不相同;CvcoOBP1-6分别属于OBP56g,OBP8a,OBP83a,OBP56h,OBP99c,OBP83ef类型。

枣实蝇 ;气味结合蛋白;组织表达

0 引 言

【研究意义】枣实蝇被列入我国进境植物检疫性有害生物名录。2007 年枣实蝇首次在我国新疆地区被发现,并且对枣果业造成了毁灭性的危害。……

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