胡红伟， 段明房， 闫凌鹏， 邢俊德， 麻啸涛， 李自茹， 陈茹茹， 杨京娥

（1.山西大禹生物工程股份有限公司，山西芮城 044600；2.太原理工大学化学工程学院，山西太原 030024）

一株枯草芽孢杆菌的鉴定及液体发酵工艺优化

胡红伟1*， 段明房1， 闫凌鹏1， 邢俊德2， 麻啸涛1， 李自茹1， 陈茹茹1， 杨京娥1

（1.山西大禹生物工程股份有限公司，山西芮城 044600；2.太原理工大学化学工程学院，山西太原 030024）

从鸡肠道筛选出一株菌，命名为DY032，经16S rDNA分子鉴定和系统发育分析，该菌种为枯草芽孢杆菌。在摇瓶发酵条件下，采用单因素试验，对菌株DY032的培养基配方进行优化，确定了影响发酵液菌体数和芽孢数的5个因素，分别为淀粉、鱼粉、豆饼粉、MnSO4·H2O和CaCO3，其适宜浓度分别为20、10、10、0.05、0.05 g/L，进一步通过L16（45）正交试验确定以上5因素的最佳配比。为放大培养，在最优培养基基础上，利用10 L发酵罐，采用L9（34）正交试验设计，以芽孢数为指标，对菌株DY032的培养温度、pH值、搅拌转速、通气量4个条件进行优化。结果表明：菌株DY032培养基最优配方为：淀粉16 g/L，鱼粉10 g/L，豆饼粉10 g/L，MnSO4·H2O 0.05 g/L，CaCO30.03 g/L。最优发酵罐培养条件为：培养温度37℃，pH值6.5，转速200 r/min，通气量5 L/min，最终芽孢数可达51.95×108cfu/mL。

菌株DY032；16S rDNA；优化

枯草芽孢杆菌是我国农业部允许作为饲料添加剂的益生菌之一，相对其他益生菌，是较早应用到饲料中的微生态制剂，其可有效调节动物肠道微生态平衡。枯草芽孢杆菌为需氧菌，其产酶能力较强，能产生蛋白酶、纤维素酶、脂肪酶等，同时可降解饲料中的抗营养因子，提高动物的消化吸收率，从而促进动物生长。

芽孢是一种休眠体，是其产生菌在生长过程中对不良环境的一种自我保护，并非细菌生长周期的一个必要阶段，芽孢的形成受营养与环境的双重调控 （Prabhat等，2015；……