一例肉鸡感染腺病毒的诊治
2017-04-12娜孔令静刘波张栋宦者威陈月锋谷桂平杨俊青
刘 娜孔令静刘 波张 栋宦者威陈月锋谷桂平杨俊青
(1.山东汇众兽医技术服务有限公司，山东济南 250022；2.山东省动物疫病预防与控制中心，山东济南 250022)
一例肉鸡感染腺病毒的诊治
刘 娜1孔令静1刘 波1张 栋2宦者威1陈月锋1谷桂平1杨俊青1
(1.山东汇众兽医技术服务有限公司，山东济南 250022；2.山东省动物疫病预防与控制中心，山东济南 250022)
2016年8月，齐河某养殖场饲养的肉鸡发生了一种精神沉郁、病死率高，剖检以心包积液且肝脏呈土黄色并分布有出血点为主要病变的疾病。无菌采取病死鸡的肝脏接种科玛嘉尿路菌群显色培养基和沙门氏菌显色培养基培养均未见细菌生长。取病死鸡脏器组织进行RT-PCR检测，结果显示该样品A型流感病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒均为阴性，禽腺病毒为阳性。结合临床症状、剖检病变和实验室检测结果，表明该肉鸡场发病的原因是由禽腺病毒感染引起。
肉鸡 心包积液 腺病毒
禽腺病毒是一群高度多样性的病原体，根据其抗原性不同可分为3个群（I、II、III群），其中I群是从鸡、火鸡、鹅和鹌鹑的呼吸道感染分离出的，具有相同的群特异性抗原，临床上可引起鸡包涵体肝炎、心包积水综合征。I群腺病毒在家禽体内普遍存在，多数在禽体内复制却不致病，导致鸡群呈隐性感染或只是引起轻微的病症，使得养殖户忽视此类疾病的发生，给养殖业造成较大经济损失。
1 发病情况和临床症状
2016年8月份，齐河某肉鸡养殖场养殖28日龄817肉鸡2900只，肉鸡发生不明原因的死亡。发病初期个别鸡只突然死亡，鸡群无其他明显症状，3～4d后死亡逐渐增加，死亡20～30只/d，发病已一周。鸡群临床症状主要为精神不振，羽毛蓬乱，采食下降，拉黄绿色稀粪，有明显呼吸道症状。
2 剖检变化
对病死鸡和发病的活鸡进行剖检，病变主要为心包积液，呈黄色水样，心肌松软；肝脏呈土黄色并出血、质脆，脾脏出血；气管内含黏液，肺脏水肿、出血；盲肠扁桃体出血，泄殖腔出血。
3 实验室检测
3.1 材料与方法
3.1.1 试剂与仪器
禽腺病毒核酸检测试剂盒购自武汉科前生物股份有限公司，A型流感病毒（通用型）和新城疫病毒荧光RT-PCR检测试剂盒购自凯杰生物工程有限公司，传染性支气管炎病毒荧光RT-PCR检测试剂盒购自生科尚仪有限公司。科玛嘉尿路菌群显色培养基和沙门氏菌显色培养基购自上海欣中生物工程有限公司。高速冷冻离心机、全自动核酸提取仪、Roche荧光PCR仪、PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统，恒温培养箱。
3.1.2 细菌培养
无菌采集肝脏，在科玛嘉尿路菌群显色培养基和沙门氏菌显色培养基上划线培养，放置于恒温培养箱37℃培养24h，观察结果。
3.1.3 病原检测
无菌采集病死鸡的泄殖腔、肝脏、肺脏和气管等器官。将脏器剪碎、研磨并匀浆，反复冻融4次，4℃，8000r/min离心5min，取上清液0.3 ml提取核酸，做模板备用。A型流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒在荧光PCR仪中进行反转录和扩增，腺病毒按说明书进行反转录、扩增，PCR产物进行电泳和凝胶成像。
3.2 结果与分析
3.2.1 细菌培养
病料在科玛嘉尿路菌群显色培养基和沙门氏菌显色培养基上培养24h后，经观察培养基上均无细菌生长，表明该鸡群未被细菌感染。
3.2.2 A型流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管病毒RT-PC检测结果分析
A型流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管病毒阳性对照Ct值分别为15.48、18.44、14.93，均呈S型特异性曲线，阴性对照Ct值均为0，样品Ct值均为0，如图1所示，表明样品A型流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管病毒检测均呈阴性，未感染上述3种病毒。
图1 A型流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒荧光RT-PCR结果
3.2.3 腺病毒RT-PCR检测结果分析
如图2所示，样品扩增后在498bp处出现一条与阳性对照大小一致的电泳条带，这表明该样品感染了禽腺病毒。
图2 腺病毒RT-PCR结果
3.2.4 结果
结合临床症状、剖检变化以及实验室RT-PCR检测结果，可以明确该鸡场的发病原因是由禽腺病毒感染所引起的。
4 讨论
4.1 在病原方面
腺病毒I群有12个血清型，其中血清-4型腺病毒是引起鸡心包积水-肝炎综合征的特异性病原。该病发病率较低，但死亡率较高，可达20%-80%，多发生在养殖密度大、饲养时间长的养殖场。通过临床调查发现，养殖场消毒不完善，环境污染严重，缺乏有效的生物安全措施，也是鸡群发病的一个潜在因素。
4.2 在管理方面
改善饲养环境，保证舍内温度、湿度和合理通风，为其健康创造有利条件。加强生物安全措施，定期消毒，尤其是各种生产用具和运输车辆及种蛋的消毒。做好鸡场的卫生管理，垫料的消毒及处理、病死鸡的无害化处理等工作。
4.3 在治疗方面
临床上以抗病毒、保肝护肾、利水消肿、防止继发感染为原则，具体如下：（1）注射禽腺病毒高免抗体，1ml/kg；（2）采用保肝护肾、增强免疫力、抗病毒等作用的中草药进行防治，并控制细菌感染；（3）在饲料中添加微量元素和复合维生素以增强鸡群抵抗力，减少各种应激反应。
[1] 国纪垒，刁有祥，薛耳兑，等.I群腺病毒山东株的分离鉴定 及hexon基因的克隆与分析[J].中国兽医学报，2012，32（12）：1773-1774.
[2] 李晓凤，宋辉.一例鸡心包积液-肝炎综合征的实验室诊断[J].养殖与饲料，2016，（2）：53-55.
[3] 袁万哲，李玉保，王建昌，等.鸡心包积液-肝炎综合征的初步研究[J].中国兽医科学，2016，46（2）：157-160.
刘娜（1983-），山东济南人，女，硕士，执业兽医师，主要从事动物疫病诊断、实验室检测等方面的工作。
