刘 莉 钱 程 甘志德 夏兴建

(1.江苏农牧科技职业学院，江苏泰州 225300；2.江苏省如皋市丁堰镇畜牧兽医站，江苏如皋 226500)

不同硒添加水平对仔猪生长性能和肠黏膜免疫的影响

刘 莉1钱 程1甘志德1夏兴建2

(1.江苏农牧科技职业学院，江苏泰州 225300；2.江苏省如皋市丁堰镇畜牧兽医站，江苏如皋 226500)

目的：在饲粮中添加两种不同剂量的亚硒酸钠来研究亚硒酸钠对仔猪生长性能和肠黏膜免疫功能的影响，并与基础日粮组进行比较观察，来探讨亚硒酸钠提高仔猪生长性能和肠黏膜免疫功能的作用机制。方法：选用30头体重相近的新生杜长大三元杂交仔猪进行试验，试验分3组，每组10头，第一组为对照组添加基础日粮，第二组仔猪饲喂基础日粮+0.6mg·kg-1亚硒酸钠，第三组仔猪饲喂基础日粮+0.8mg·kg-1亚硒酸钠。在仔猪14、24、32和45日龄时称重测定生长性能。并在仔猪45日龄每组各剖杀3头仔猪，剖杀取得的样品用于测定仔猪小肠上皮间淋巴细胞（IELs）和杯状细胞（GSs）数量。结果：两组亚硒酸钠都能显著提高仔猪生长性能和小肠上皮间淋巴细胞、杯状细胞数量。

仔猪 硒 生长性能 肠黏膜免疫

硒是动物机体必需的微量元素[1]，具有提高机体的抗氧化能力、免疫力和促进生长、改善肉质等功能。仔猪缺硒会引起白肌病、肝坏死、食欲下降和生长迟缓。

据报道，在我国有一条从东北向西南走向的狭长地带，属于缺硒地带。在这一地区的生产中为了满足仔猪健康生长的需要量，必须在日粮中添加一定量的外源性硒[2]。但是添加剂量如何确定，必须要经过实验研究。因为添加过少起不到补硒的目的，过多又极易引起仔猪中毒。本文以生长性能和肠黏膜免疫功能为指标阐述了不同剂量硒对仔猪免疫力的影响，为现代养猪场的硒添加水平提供了理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

供试动物为泰州市某猪场提供的“杜长大”三元杂交仔猪。将日龄一致、体重相近的3窝（共30头）新生“杜长大”仔猪随机分为三组，每组三窝（10头），进行编号。第一组为对照组添加基础日粮，第二组仔猪饲喂基础日粮+0.6mg·kg-1亚硒酸钠，第三组仔猪饲喂基础日粮+0.8mg·kg-1亚硒酸钠。实验基础日粮是参照美国NRC（1998版）仔猪营养需要配合而成，其配方及营养水平见表1。处理组日粮是在基础日粮的基础上，以逐级放大混匀方法预混后密封保存备用。仔猪从7日龄开始诱食，24日龄断奶，在14日龄时对试验组加入亚硒酸钠预混日粮。试验期为45d。试验猪采取群饲，自由采食、饮水。每次喂量以仔猪吃饱后料槽内略有余料为度。试验期间的免疫消毒按猪场常规程序进行。

表1 基础日粮配方及营养水平

*向每千克基础日粮提供：VA5250IU；VD31050IU；VE4.5IU；VK31.2mg；VB10.375mg；VB21.8mg；VB60.15mg；VB120.0075mg；烟酸（烟酰胺）6mg；泛酸钙3.75mg；叶酸0.15mg；生物素0.0075mg；赖氨酸0.75mg；抗氧化剂0.045mg；酶制剂1000mg；香味剂40mg；甜味剂 40mg；新霉素20mg；Mn（MnSO4·H2O） 10.18mg；I（KI）0.4mg；Se（Na2SeO3）0.3mg.

*Provided per kilogram of basal diet：VA5250IU；VD31050IU；VE4.5IU；VK31.2mg；VB10.375mg；VB21.8mg；VB60.15mg；VB120.0075mg；Niacin 6mg；Pantothenic calcium 3.75mg；Folic acid 0.15mg；D-biotin 0.0075mg；Lysine 0.75mg；Antioxidant 0.045mg；Enzyme preparation 1000mg；Flavour agents 40mg；Sweet agents 40mg；Neomycin 20mg；Mn（MnSO4·H2O）10.18mg；I（KI）0.4mg；Se（Na2SeO3）0.3mg。

1.2 实验药物

亚硒酸钠粉剂

1.3 实验方法

1.3.1 生长性能

在试验正式开始后的第14、24、45d，每天上午7：00～9：00对试验仔猪进行空腹称重、称量剩余的料量，记录阶段耗料量，计算日采食量、平均日增重和料重比。同时记录试验仔猪24～45日龄之间，每天每组腹泻头数，并计算腹泻率。

平均日采食量=（配料总量-剩料量）/试验天数×每组猪数。

平均日增重=（试验末平均体重-试验初平均体重）/试验天数。

料重比=平均日采食量/平均日增重。

腹泻率（%）=∑（腹泻头数×腹泻天数）/（实验总天数×仔猪总头数）×100%。

1.3.2 小肠上皮间淋巴细胞（IELs）和杯状细胞（GSs）数量的检测：

仔猪剖杀均在剖杀日龄当日进行。剖杀前12h停食，随机从各处理组中选三头，采用颈静脉放血的办法处死，打开腹腔，立即结扎贲门瓣幽门瓣直肠远端，将消化道及消化腺取出，小心剥离开，小肠按解剖位置分成十二指肠、空肠、回肠三段。在十二指肠近端（5cm处）、空肠近端1/4处、空肠远端1/4处、回肠中段分别用利剪连续取下近1cm的肠管三段，迅速放入备用10%甲醛固定液中，摇匀，待做组织切片，24h后将10%甲醛固定液中的标本经水洗、透明、浸蜡、包埋等处理后，在室温下切成4um的切片，苏木精-伊红染色，封片。在十二指肠、空肠前段、回肠组织切片上，选5个典型视野（绒毛完整、走向平直），测量每100个肠上皮细胞中淋巴细胞数和杯状细胞数。

1.4 数据处理与分析

数据均以X±SD表示，采用SAS9.0统计软件中的ANOVA过程进行方差分析，多重比较采用Duncan’s法。

2 结果与分析

2.1 硒对仔猪生长性能的影响

由表2可知，与第一组比较：仔猪个体重在45日龄时，第二组极显著升高（P＜0.01），第三组升高显著（P＜0.05）；平均日增重在14～24日龄第二组升高显著（P＜0.05），24～45日龄第二组升高极显著（P＜0.01），第三组升高显著（P＜0.05）；平均日采食量24～45日龄极显著升高（P＜0.01）；料重比在24～45日龄第二组升高极显著（P＜0.01），第三组升高显著（P＜0.05）；腹泻指数第二组、第三组升高均极显著（P＜0.01）。

与第三组比较：第二组仔猪个体重在45日龄时，升高显著（P＜0.05）；平均日增重在14～45日龄升高显著（P＜0.05）；平均日采食量在24～45日龄升高极显著（P＜0.01）；料重比在24～45日龄升高显著（P＜0.05）。

表2 3组仔猪生产性能及腹泻率的比较

2.2 硒对仔猪肠上皮间淋巴细胞数量的影响

表3 3组仔猪小肠黏膜上皮间淋巴细胞数量的比较

由表3可见第二组的上皮内淋巴细胞数极显著高于第一组（p＜0.01）；第三组在十二指肠和空肠前端部位的IELs数极显著高于第一组（p＜0.01），而在空肠后端和回肠部位是显著高于第一组（P＜0.05）；第二组与第三组相比只有十二指肠和回肠部位升高显著（P＜0.05），其他部位不显著（P＞0.05）。

2.3 硒对仔猪肠上皮间杯状细胞数量的影响

表4 3组仔猪小肠黏膜上皮间杯状细胞数量的比较

由表4可以看出第二组小肠各个部位上皮内杯状细胞数都极显著高于第一组（p＜0.01）；而第三组只有空肠后端GSs数与对照组相比升高不显著其他三个部位上皮内杯状细胞数都显著高于第一组（p＜0.05）；第二组在十二指肠部位极显著高于第三组（p＜0.01），在回肠部位升高不显著（P＞0.05），其他两个部位GSs数都显著高于第二组（p＜0.05）。各实验组，杯状细胞的数量从十二指肠到回肠，呈从前到后逐渐增多趋势。

3 讨论

初生仔猪生长发育快，新陈代谢旺盛，但各项生理指标不健全，所以易受各种因素影响，导致机体机能下降，抵抗力降低，肠道菌群失调。特别是断奶时，肠绒毛萎缩，天然黏膜保护屏障作用降低，黏膜抵御能力下降，使得致病性大肠杆菌在断奶仔猪肠中大量繁殖，从而引起腹泻，进而导致生长迟缓甚至死亡。有试验结果显示，硒添加剂可以通过影响仔猪免疫内分泌系统而促进仔猪生长[3]。本试验中，添加了不同剂量亚硒酸钠后，仔猪的体重、日增重和日采食量均显著或极显著升高，腹泻率却极显著降低。但是可以看出添加剂量为0.6mg·kg-1的实验组效果要优于添加剂量为0.8mg·kg-1的实验组，说明硒的添加要适量。

Gaskins（1996）报道，肠上皮细胞是仔猪抵抗饲料毒素及外来致病菌的第一道防线，其表面含有毒素及细菌受体，且包含具有一定免疫功能的淋巴细胞和杯状细胞[4]。初生仔猪肠上皮这些免疫组分在结构和功能上均发育不全，使肠道对抗外来刺激的能力下降。这时饲喂固体饲料，虽然肠道受到的刺激很强，但仔猪却没有能力对这些刺激产生应答，故肠道表现为较低的免疫激活状态。从本实验结果可以看出添加一定剂量的硒可显著提高仔猪小肠黏膜上皮间淋巴细胞和杯状细胞数量。

[1] 屈健.动物营养中重要的微量元素-硒[J].饲料工业，1997，18（2）：13-16.

[2] 杨维东，刘洁生，彭喜春编著.微量元素与健康[M].湖北：华中科技大学出版社，2007：53.

[3] 杨华，傅衍，陈安国.有机硒对杜长大商品猪生产性能、胴体性状、肉质的影响[J].中国饲料，2004，（6）：21-24.

[4] Gaskins H R.The intestinal immune system：gut reaction and growth of the pig[J].Journal of Animal Science，1996，74（Supp1.1）：169．