蔡展宇　苏广华

摘要：实验目的：在小尾寒羊的畜牧业良种繁育中，探索液氮气相存储技术应用于胚胎玻璃化冷冻的可行性。实验方法：采用小尾寒羊母羊作为胚胎的供体，利用超数排卵技术和体外输精之后，并且胚胎在供体羊体内发育的7天之后，将胚胎冲出。之后，利用新的玻璃化冷冻技术对所采集的胚胎进行冷冻处理，冷冻处理24小时之后复苏，之后移植同期发情蒙古母羊受体体内，并且以鲜胚移植同批发情母羊受体作为对照组。实验结果：玻璃化胚胎移植的妊娠率与胚胎的发育的不同阶段密切相关（fisher精确检验：p=0.01 8），CH（紧缩桑葚胚）的怀孕率显著高于BL（囊胚期）。实验结论：在气相液氮存储条件下，羊胚胎玻璃化冷冻采用紧缩桑葚期胚胎，能提高妊娠率。

关键词：胚胎移植；玻璃化；液氮蒸汽相存储；低温生物学

低温保存胚胎技术是优良种畜生育和种群扩大的重要组成技术。从1985年Rail和Fahv使用玻璃化冷冻法成功地冷冻了小鼠胚胎（Rall&Fahv 1985）以来，玻璃化已成为常规的低温动物胚胎保存技术之一，广泛用于动物和人的胚胎保存中。玻璃化形成于-80℃--130℃，在这个转变温度以下，分子运动和化学转化都会停止，胚胎等生物样品可以无限期地保存，因此是种群保存、动物基因克隆建库、运输和胚胎移植等应用的有效手段（Woods，Benson，Agca&Critser，2004）。在当前的玻璃化冷冻技术中，胚胎等生物活性-样品通常被储存在液氮液体内，温度是-196℃，大大低于玻璃化形成所需要的温度，液氮液体存储具有价格低廉并普及的优点。……