王白燕，韩倩倩，朱艳琴，李 光，石佳佳

河南中医药大学基础医学院实验教学中心 郑州 450046

GRP78、CHOP在α-细辛醚诱导的Eca109细胞凋亡中的作用*

王白燕，韩倩倩，朱艳琴#，李 光，石佳佳

河南中医药大学基础医学院实验教学中心 郑州 450046

#通信作者，女，1956年11月生，硕士，教授，研究方向：中药抗肿瘤，E-mail：jc.zyqin@163.com

α-细辛醚；Eca109细胞；增殖抑制；凋亡；GRP78；CHOP

目的：研究葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)在α-细辛醚诱导的人食管癌Eca109细胞凋亡中的作用。方法：采用0.25、0.50及1.00 g/L的α-细辛醚作用于体外培养的Eca109细胞，并以无干预的细胞作为对照。分别于培养后12、24、36、48 h，采用MTT法检测Eca109细胞的增殖抑制情况；采用免疫荧光染色法检测细胞凋亡情况；运用Real-time PCR和Western blot检测凋亡相关基因GRP78和CHOP的表达水平。结果：α-细辛醚对Eca109细胞的增殖具有抑制作用(P<0.05)，且具有时间、剂量效应关系。α-细辛醚作用48 h后，GRP78和CHOP mRNA和蛋白的相对表达量明显增加(P<0.05)。结论：α-细辛醚可抑制Eca109细胞增殖和诱导细胞凋亡，其机制与调节内质网应激相关蛋白GRP78、CHOP表达有关。

食管癌(esophageal carcinoma，EC)是常见的上消化道恶性肿瘤，严重影响着人们的健康和生活质量[1]。食管癌的发生、发展是一个复杂的多因素综合作用的结果。α-细辛醚是中药石菖蒲挥发油中的主要活性成分，祖国医学认为石菖蒲有化痰开窍、镇静和抗惊厥之功效，可用于治疗癫痫[2]。也有文献[3]报道中药石菖蒲挥发油中的另一主要成分β-细辛醚在诱导肠癌细胞凋亡中起到了一定的作用，其机制可能与线粒体途径有关。而对于α-细辛醚抗肿瘤的研究尚未见报道。作者所在的课题组[4]在前期的研究中初步发现，α-细辛醚可诱导人食管癌Eca109细胞发生凋亡，该研究进一步对其凋亡机制进行探讨。

1 材料与方法

1.1 主要试剂和仪器 α-细辛醚注射液(批号201308，规格2 mg)；……