孙斌，杨晓珍，郭向华，2，周育森，孙世惠，王延军，2

(1首都医科大学附属北京佑安医院,北京100069；2北京市肝病研究所；3中国军事医学科学院微生物流行病研究所)

CD80、CD86抗体对耗竭性T细胞效应功能的影响

孙斌1，杨晓珍1，郭向华1，2，周育森3，孙世惠3，王延军1，2

(1首都医科大学附属北京佑安医院,北京100069；2北京市肝病研究所；3中国军事医学科学院微生物流行病研究所)

目的以CD80、CD86抗体作为激动剂、脾细胞为研究对象，观察CD80、CD86抗体对耗竭性T细胞效应功能的影响。方法将42只8周龄雌性 HLA-A11DR1转基因小鼠随机分为7组各6只，分别在8、11、14周龄时，A～F组臀部皮下接种磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)多肽，G组接种等体积无热源PBS；A～E组在24周龄和F、G组在17周龄时脱颈处死，取脾脏并制成脾细胞悬液；A、B组分别滴加20、40 μg/mL 抗鼠CD80抗体和10 μg/mL GPC3多肽，C、D组分别滴加20、40 μg/mL 抗鼠CD86抗体和10 μg/mL GPC3多肽，E、F、G组仅滴加10 μg/mL GPC3多肽。孵育18 h后，采用酶联斑点分析仪检测干扰素γ(IFN-γ)，以此判断T细胞效应功能。结果A～G组脾细胞IFN-γ阳性斑点数分别为(80.61±48.91)、(207.67±60.41)、(1.67±0.97)、(1.33±0.49)、(2.33±1.53)、(38.17±5.18)、(2.33±1.53)个。其中，F组高于E、G组(P均<0.01)，E、G组间比较无统计学差异；A组>B组>C、D、E组(P均<0.01)，C、D、E组间比较差异无统计学意义；而且，IFN-γ阳性斑点数随着CD80抗体浓度升高而增加，二者呈正相关(r=0.760 5，P<0.01)。结论CD80抗体能够刺激耗竭性T细胞恢复产生细胞因子，且呈剂量依赖的动力效应;而CD86抗体未能检测到该功能。

CD80抗体；CD86抗体；磷脂酰肌醇蛋白聚糖3；多肽疫苗；T细胞耗竭；干扰素γ

脾细胞主要成分为T细胞和B细胞，T细胞受到肽刺激会产生干扰素γ(IFN-γ),而B细胞则不能。因此，动物免疫实验中常用肽刺激小鼠脾细胞并检测IFN-γ的分泌情况，以分析T细胞功能。刺激CD8+T细胞活化并分化为效应性T细胞，是免疫系统保护宿主、清除病原微生物或肿瘤抗原的关键。然而，在肿瘤微环境中，常由于T细胞疲劳耗竭，而致抗肿瘤应答能力弱、效率低下，不能有效识别和清除肿瘤细胞[1]；T……