张兰，檀鹏辉，滕珂，闫蒙举，何春燕，甘露，尹淑霞

(北京林业大学林学院草坪研究所，北京 100083)

草地早熟禾荧光定量PCR分析中内参基因的筛选

张兰，檀鹏辉，滕珂，闫蒙举，何春燕，甘露，尹淑霞*

(北京林业大学林学院草坪研究所，北京 100083)

为筛选出草地早熟禾实时荧光定量中的最适内参基因，利用实时荧光定量PCR技术，分析检测6个传统内参基因ACT、GAPDH、UBQ、EF-1α、18srRNA和β-tublin在草地早熟禾不同组织器官、叶片不同发育期、非生物胁迫和不同激素诱导下mRNA的表达差异情况。利用geNorm、NormFinder和BestKeeper软件综合评价6个候选内参基因的表达稳定性。结果表明，在不同组织、叶片不同发育期、激素诱导和非生物胁迫下，候选内参基因的表达稳定性存在差异。GAPDH在草地早熟禾不同组织器官中表达最为稳定；EF-1α在非生物胁迫下表达最为稳定；不同激素下首选β-tublin；在叶片不同发育期ACT表达最为稳定。综上所述，通过筛选出不同条件下适宜的内参基因不仅有助于提高草地早熟禾基因表达分析的准确性，也为早熟禾属植物其他内参基因的开发提供了理论参考。

草地早熟禾；实时荧光定量PCR；内参基因；稳定性评价

实时荧光定量PCR是一种高效的生物技术之一，是在mRNA水平上对基因表达进行的定量分析，为避免样品之间和样品内部的差异，必须引入拷贝数高、稳定表达的内参基因对目标基因的表达量进行校正[1]。但越来越多的研究表明，没有绝对稳定表达的基因存在，任何一种内参基因的所谓稳定表达都只是在特定试验因素的作用下恒定。……