唐 伟，张 美，王小兰

（1.广州大学生命科学学院，广东 广州 510006；2.中国科学院华南植物园，广东 广州 510650）

OsMT-1-4c基因原核表达载体的构建、表达及重金属抗性研究

唐 伟1，张 美2，王小兰1

（1.广州大学生命科学学院，广东 广州 510006；2.中国科学院华南植物园，广东 广州 510650）

为研究水稻抗重金属的特性，构建了水稻金属硫蛋白（metallothionein，MT）原核表达载体PGEX4T-3-OsMT-1-4c，并转化到Rossetta菌株中诱导表达，得到大小为33.643 kDa的GST-OsMT-1-4c重组蛋白。将得到的沉淀用1×PBS溶解并在低温下超声破碎，离心并电泳检测，然后纯化得到融合蛋白。并在重金属Cd2+胁迫下诱导表达重组载体和空载体菌株，发现能表达GST-OsMT-1-4c蛋白菌株比表达GST蛋白菌株抗重金属的能力强。

水稻；金属硫蛋白；原核表达；纯化；抗重金属特性

重金属在环境中是普遍存在的，对植物而言，重金属分为必需元素和非必需元素，但是非必需重金属元素和过量的必需重金属元素对植物的生长和发育都是有害的，对植物毒害作用主要表现在损伤细胞膜［1］、破坏线粒体和叶绿体的超微结构［2］、减少叶绿素和抗坏血酸含量、产生活性氧分子、降低各种的酶活性［3］，继而阻碍植物呼吸代谢、光合作用［4］和细胞分裂等生命活动的正常进行。植物生长在重金属污染的环境中［5］，受重金属的胁迫，植物与重金属接触的界面首先受到影响，并且这种影响随着胁迫时间的延长，随重金属浓度的升高，植物的受害亦加剧。植物受重金属的伤害程度、伤害症状与重金属的种类也有密切关系。重金属能够通过农作物直接参与食物链循环［6］，最终在人体内富集［7］，使人体健康受到危害。……