陈 玲， 谢 强

·论著·

安徽滁州市第一人民医院2015年临床分离菌的耐药性监测

陈 玲， 谢 强

目的了解2015年安徽滁州市第一人民医院常见分离菌的临床分布及耐药情况。方法各类临床分离菌采用MicroScan WalkAway 96 PLUS进行鉴定和药敏试验，采用WHONET5.6软件对数据进行统计分析。结果2015年共分离病原菌1 499株，其中革兰阳性菌370株，占24.7 %； 革兰阴性菌1 129株，占75.3 %。葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的检出率分别为37.0 %和86.3 %。葡萄球菌中未见万古霉素、达托霉素和利奈唑胺耐药株。肠球菌中粪肠球菌对达托霉素、万古霉素和利奈唑胺均敏感，屎肠球菌中检出1株耐万古霉素，检出率为2.8 %。肺炎链球菌主要来源于儿科，对青霉素均敏感。大肠埃希菌、克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）和奇异变形杆菌产ESBL的检出率分别为52.9 %、30.8 %和25.0 %，产ESBL株对测试药物的耐药率均高于非产ESBL株。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率均为29.4 %。不动杆菌属（鲍曼不动杆菌占85.5 %）对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为63.0 %和64.5 %。结论2015年该院分离的革兰阴性杆菌耐药严重，尤其是碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌检出率较高，应引起重视。

细菌耐药性； 超广谱β内酰胺酶； 碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌

随着抗菌药物在临床上的大量使用和不合理使用，导致细菌对抗菌药物的耐药性日趋严重，多重耐药和泛耐药株日益增多，尤其是碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌（CRE）检出率的增加，这些已成为全球关注的公共卫生问题。为此，对滁州市第一人民医院2015年临床分离菌的分布及耐药性进行了统计分析。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源 收集本院2015年1月1日－12月31日临床标本分离株，剔除同一患者同一部位的重复菌株，共分离出病原菌1 499株。

1.1.2 药敏纸片和培养基 补充药敏纸片购自英国OXOID公司，药敏试验用的Mueller-Hinton（MH）琼脂购自法国生物梅里埃公司。

1.1.3 质控菌株 质控菌株为大肠埃希菌ATCC 25922、肺炎克雷伯菌ATCC 700603、铜绿假单胞菌ATCC 27853、金黄色葡萄球菌（金葡菌）ATCC 25923和粪肠球菌ATCC 29212，均购自卫生部临床检验中心。

1.2 方法

1.2.1 菌株鉴定及药敏试验 菌株鉴定和药敏均使用德国西门子公司的MicroScan WalkAway 96 PLUS全自动细菌鉴定仪（MSWA）及配套的PC33和NC50检测卡进行。补充药敏试验（头孢唑林、头孢曲松和厄他培南）采用纸片扩散法。药敏试验结果根据CLSI 2014标准判断[1]。

1.2.2 耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）和产ESBL株的检测 MSWA鉴定仪根据药敏结果自动判断MRS和产ESBL菌株。

多重耐药指对3类或3类以上的抗菌药物耐药，全耐药指对所测的抗菌药物均表现为耐药[2]，CRE为对亚胺培南、美罗培南或厄他培南中任一种药物耐药者。

1.2.3 统计分析 使用全国细菌耐药监测网推荐的WHONET5.6软件对研究结果进行统计分析。

2 结果

2.1 细菌来源及分布

2015年共收集临床非重复分离菌1 499株，其中革兰阳性菌370株，占24.7 %； 革兰阴性菌1 129株，占75.3 %；住院患者分离株占96.2 %，门诊患者分离株占3.8 %；菌株主要来源于痰液等呼吸道标本、分泌物、尿液和血液，分别占51.6 %（773株）、17.1 %（256株）、16.8 %（252株）和8.4 %（126株）。痰液等呼吸道标本分离菌主要为肺炎克雷伯菌172株（22.2 %）、铜绿假单胞菌139株（18.0 %）、鲍曼不动杆菌98株（12.7 %）、大肠埃希菌84株（10.9 %）和肺炎链球菌52株（6.7 %）；分泌物标本分离菌主要为大肠埃希菌64株（25.0 %）、金葡菌36株（14.1 %）、肺炎克雷伯菌19株（7.4 %）、铜绿假单胞菌15株（5.9 %）和鲍曼不动杆菌13株（5.1 %）；尿液标本分离菌主要为大肠埃希菌130株（51.6 %）、肺炎克雷伯菌24株（9.5 %）、屎肠球菌22株（8.7 %）、粪肠球菌17株（6.7 %）和奇异变形杆菌5株（2.0 %）；血液标本分离菌主要为凝固酶阴性葡萄球菌62株（49.2 %）、大肠埃希菌19株（15.1 %）、金葡菌10株（7.9 %）、屎肠球菌7株（5.6 %）和粪肠球菌4株（3.2 %）。主要菌株分布见表1。

表1 2015年临床分离菌株的分布Table 1 Distribution of clinical isolates in 2015

2.2 主要革兰阳性菌对抗菌药物的耐药率

2.2.1 葡萄球菌属 金葡菌中MRSA的检出率为37.0 %，凝固酶阴性葡萄球菌中MRCNS的检出率为86.3 %。葡萄球菌属中未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药株。药敏结果见表2。

表2 葡萄球菌属细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 2 Susceptibility of Staphylococcus isolates to antimicrobial agents（ %）

2.2.2 肠球菌属 75株肠球菌属细菌中屎肠球菌36株，占48.0 %；粪肠球菌33株，占44.0 %；其他肠球菌6株，占8.0 %。除四环素外，屎肠球菌对各抗菌药物的耐药率均高于粪肠球菌。粪肠球菌对万古霉素和利奈唑胺全敏感，检出1株耐万古霉素屎肠球菌，检出率为2.8 %。药敏结果见表3。

2.2.3 肺炎链球菌 共分离到56株肺炎链球菌，对青霉素、左氧氟沙星、利奈唑胺和万古霉素100 %敏感，对红霉素和克林霉素的耐药率达98.2 %。药敏结果见表4。

2.3 主要革兰阴性菌对抗菌药物的耐药率

2.3.1 肠杆菌科细菌 大肠埃希菌、克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）和奇异变性杆菌产ESBL的检出率分别为52.9 %、30.8 %和25.0 %。产ESBL株对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类、氨基糖苷类等的耐药率明显高于非产ESBL株。大肠埃希菌、克雷伯菌属、肠杆菌属和变形杆菌属细菌对碳青霉烯类和阿米卡星的耐药率最低，耐药率＜20 %。沙雷菌属对碳青霉烯类耐药率较高，达到50 %，其中黏质沙雷菌的检出率为59.4 %，对阿米卡星和甲氧苄啶-磺胺甲唑的耐药率最低，均不高于5 %。本次监测中共检出CRE 98株，检出率为12.5 %。药敏结果见表5。

表3 肠球菌属细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 3 Susceptibility of Enterococcus species to antimicrobial agents（ %）

表4 肺炎链球菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 4 Susceptibility of S. pneumoniae to antimicrobial agents（ %）

2.3.2 不发酵糖革兰阴性杆菌 160株铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南耐药率均为29.4 %；对阿米卡星、妥布霉素和哌拉西林-他唑巴坦的耐药率分别为30.0 %、33.8 %和36.3 %，对其余测试抗菌药物的耐药率也均＜50 %。138株不动杆菌属细菌对氨基糖苷类的耐药率均＜30 %，对其余监测的抗菌药物的耐药率均＞60 %。嗜麦芽窄食单胞菌对米诺环素100 %敏感。铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的多重耐药检出率分别为35.0 %和76.7 %。药敏结果见表6。

3 讨论

本次监测结果显示，2015年我院共分离出非重复菌株1 499株，与本院2014年[3]相比，临床菌株总分离率下降了14.4 %。2015年细菌分离前5位的分别是大肠埃希菌、克雷伯菌属、铜绿假单胞菌、不动杆菌属和金葡菌，与2014年CHINET细菌耐药性监测网的数据相近[4]。

2015年本院MRSA和MRCNS的检出率分别为37.0 %和86.3 %，高于邵春红等[5]的数据，MRSA的检出率低于2014年CHINET细菌耐药性监测网的数据[4]和本院2014的数据[3]，统计结果显示，MRSA对测试药物的耐药率明显高于MSSA，未发现对万古霉素和利奈唑胺的耐药株。肠球菌属中，以屎肠球菌和粪肠球菌为主，其中屎肠球菌的分离率高于粪肠球菌，与2014年相比，粪肠球菌的分离率有所增加，屎肠球菌对常用抗菌药物的耐药率明显高于粪肠球菌，检出1株耐万古霉素的屎肠球菌。本院2015年检出的肺炎链球菌对青霉素均敏感。

表5 肠杆菌科细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 5 Susceptibility of Enterobacteriaceae species to antimicrobial agents（ %）

表6 不发酵糖革兰阴性杆菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 6 Susceptibility of non-fermentative gram-negative bacilli to antimicrobial agents（ %）

肠杆菌科细菌中，大肠埃希菌和奇异变形杆菌产ESBL的检出率分别为52.9 %和25.0 %，与2014年相比有所下降[3]，克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）产ESBL的检出率为30.8 %，与2014年相比有所上升[3]。本次监测结果显示，肠杆菌科细菌对碳青霉烯类敏感性较好，但CRE的检出率为12.5 %（98 / 787），肺炎克雷伯菌中耐药株为19.4 %（44 / 227），黏质沙雷菌中耐药株为59.4 %（19 / 32），大肠埃希菌中耐药株为4.9 %（15 / 308）和肠杆菌科细菌中耐药株为11.4 %（8 / 70），此分离菌以呼吸道标本和ICU为主，提示可能存在耐药克隆株的传播，需进行严密监测。特别是沙雷菌属对碳青霉烯类耐药率较高，达到50.0 %（20/40） ，其中黏质沙雷菌耐药株的检出率为59.4 %（19 / 32），且检出菌株均来自ICU，提示可能存在耐药克隆株的传播。由于CRE菌株对抗菌药物往往呈广泛耐药和全耐药，给临床治疗带来了极大困难。本次监测结果显示，CRE对多数抗菌药物高度耐药，除对阿米卡星的耐药率＜5 %，对其余抗菌药物耐药率均＞75 %。目前认为，多黏菌素对CRE有较强的抗菌活性，但有报道，随着治疗的进展可能出现对多黏菌素的继发性耐药[6]。通过手卫生的管理、隔离预防措施的实施、环境和设备清洁消毒的落实能够有效控制多重耐药CRE在医院的传播和流行[7]。

本次监测结果显示，铜绿假单胞菌与本院2014年相比，对亚胺培南和美罗培南最敏感，敏感率均为70.6 %，其次对阿米卡星的敏感率为70 %，对妥布霉素和哌拉西林-他唑巴坦的敏感率均＞60 %，临床治疗该菌感染时要密切注意，因为随着抗菌药物的使用，该菌对抗菌药物的耐药性会很快发生变化。不动杆菌属细菌对常用抗菌药物的耐药率较高，对氨基糖苷类抗生素的耐药率＜30 %，对其余抗菌药物的耐药率均＞60 %。铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌主要来自于呼吸道标本；科室以ICU检出率最高，其多重耐药检出率较高，2015年检出率分别为35.0 %和76.7 %，但均低于2014年的数据。鲍曼不动杆菌的多重耐药检出率也低于本院2013年数据[8]，出现这种情况，可能与临床对多重耐药菌的隔离预防措施落实到位以及抗菌药物的合理使用有关。嗜麦芽窄食单胞菌对米诺环素全敏感，对甲氧苄啶-磺胺甲唑和左氧氟沙星的敏感率均＞75 %，对头孢他啶的敏感率仅为23.1 %。

本次监测结果表明，本院分离菌以革兰阴性杆菌为主，呼吸科和ICU的多重耐药和广泛耐药菌检出率较高。为有效控制多重耐药和广泛耐药菌产生和流行，临床应根据药敏结果，合理使用抗菌药物，同时应将预防隔离措施落实到位。

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Surveillance of antimicrobial resistance in the clinical isolates from Chuzhou First Hospital, Anhui Province in 2015

CHEN Ling, XIE Qiang. （Department of Laboratory Medicine, Chuzhou First Hospital, Chuzhou Anhui 239000, China）

ObjectiveTo investigate the distribution and antibiotic resistance profle of clinical isolates in 2015 for improving antimicrobial treatment in Chuzhou First Hospital.MethodsBacterial identification and antimicrobial susceptibility testing were performed with MicroScan WalkAway 96 PLUS bacterial identifcation system. All the data were analyzed by WHONET5.6 software.ResultsA total of 1 499 clinical isolates were collected during 2015, of which gram positive organisms and gram negative organisms accounted for 24.7 % and 75.3 %, respectively. Prevalence of MRSA among S. aureus was 37.0 % and MRCNS among CNS 86.3 %. All (100 %) Staphylococcus and E. faecalis isolates were susceptible to vancomycin, daptomycin and linezolid. About 2.8 % of the E. faecium isolates were resistant to vancomycin. All the Streptococcus pneumoniae isolates were penicillin-susceptible, mainly isolated from children. The prevalence of extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) positive strains was 52.9 % in E. coli, 30.8 % in Klebsiella spp. (K. pneumoniae and K. oxytoca) and 25.0 % in P. mirabilis. The ESBLs-positive strains showed higher resistance rate than ESBLs-negative strains to most antibiotics. The percentage of the P. aeruginosa isolates resistant to meropenem and imipenem was all 29.4 %. The percentage of the Acinetobacter spp. (A. baumannii accounted for 85.5 %) strains resistant to imipenem and meropenem was 63.0 % and 64.5 %, respectively.ConclusionsAntibiotic resistance is still serious in Chuzhou First Hospital in 2015, especially the emerging carbapenemresistant Enterobacteriaceae, which is of great concern.

antimicrobial resistance; extended-spectrum beta-lactamase; carbapenem-resistant Enterobacteriaceae

R378

A

1009-7708 ( 2017 ) 02-0153-06

10.16718 / j.1009-7708.2017.02.007

2016-04-12

2016-07-27

安徽省滁州市第一人民医院检验科，安徽滁州 239000。

陈玲（1967—），女，本科，副主任检验师，主要从事临床检验诊断方面的研究。

陈玲，E-mail：342263920@qq.com。