安徽 吴 浩

基因表达载体相关问题解读及应用

安徽 吴 浩

基因工程操作的核心是构建基因表达载体，围绕该表达载体的考题很突出，如2009年安徽卷T30、2014年天津卷T8、2015年江苏卷T32。下面从不同角度对该表达载体进行解读。

1.基因表达载体的一般结构及各部分功能

基因表达载体的一般结构包括复制原点+目的基因（插入基因）+启动子+终止子+标记基因（抗生素抗性基因）等组成。

启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端。启动子是复制原点附近的一段DNA，它和特定的物质（如激素）作用后，通过一系列复杂的正反馈机制，激活复制原点（复制原点通常被某些酶结合而不易解旋）。

终止子位于基因的尾端，也是一段有特殊结构的DNA短片段；终止子相当于一盏红色信号灯，使转录在所需要的地方停止下来。

复制原点处的A和T特别多，相对氢键少，不稳定，DNA容易解旋，因此易与引物结合，成为转录的起点或复制的起点。

抗生素抗性基因作为其标记基因。标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。标记基因又称报告基因，抗生素抗性基因是其中的一种。

【例1】 （2009年安徽卷T31，节选）某种野生植物有紫花和白花两种表现型，已知紫花形成的生物化学途径是：

A和a、B和b是分别位于两对染色体上的等位基因，A对a、B对b为显性。基因型不同的两白花植株杂交，F1紫花∶白花=1∶1。若将F1紫花植株自交，所得F2植株中紫花∶白花=9∶7。

请回答：（5）紫花中的紫色物质是一种天然的优质色素，但由于B基因表达的酶较少，紫色物质含量较低。……