杨秀荣+王庆容+刘惠茹

摘要：以黄颡鱼肝脏为试验材料，用TRIzol法提取肝脏组织总RNA，将试验样品置于不同温度下保存，在1%琼脂糖凝胶中电泳检测RNA的质量。结果显示：在低温没有密封储存的情况下，RNA保存较长时间，完整性好；-70 ℃下RNA可以保存8个月，-20 ℃下RNA可以保存4个月；在其他温度条件下，若密封保存，4 ℃下可保存2周，10 ℃下可保存4 d以上，20 ℃下保存3 d时条带清晰，保存4 d时条带模糊，30 ℃下保存2.5 d时条带变得模糊，到3 d时全部降解，40 ℃下保存1 d条带清晰，保存2 d条带变得模糊，保存2.5 d时完全降解。此外应注意的是，RNA如果暴露于空气中，5 h内所有试验组的RNA大多数降解。

关键词：黄颡鱼；肝脏总RNA；保存温度；RNA完整性

中图分类号：S917 文献标志码： A

文章编号：1002-1302（2016）11-0258-03

近年来，分子生物学各项技术无论在医学方面还是生物学方面的各个领域均得到广泛应用，高质量的RNA则是其他后续试验的基础。如Northern bolt及杂交分析、寡聚（dT）纤维素选择分离mRNA、cDNA文库的构建、逆转录酶聚合酶链式反应（reversetranscriptase-polymerase chain reaction，简称RT-PCR）、RNA原位杂交、转基因材料鉴定、基因克隆及其表达等试验的成败，在很大程度上取决于RNA的质量[1]，对于RNA的质量评价，完整性和均一性是其关键因素[2]。RNA特殊的单链结构导致其自身结构极不稳定，加上周围环境中广泛分布RNA酶（RNase）并且难以灭活，导致RNA很容易降解。有些试验过程中使用RNA的时间跨越度较大，因此确定RNA在不同温度下能保存的最长时间就尤其重要。关于不同温度对RNA质量的影响及不同保存温度下RNA能够保存的最长时间方面的研究，目前相关报道较少。……