梅慧珍+陈安利+夏定国

摘要：内切葡聚糖酶（Cx）是纤维素酶系中的主要成分，它包含多种同工酶，能够将可溶性纤维素水解成还原性寡糖。采用 Native-PAGE技术对黄星天牛中肠中Cx进行电泳分离，结合LC-MS/MS技术对黄星天牛中肠中Cx种类进行鉴定，并对其性质进行研究。结果显示黄星天牛中肠中含有多种Cx，通过结构域分析，确定为GHF5家族蛋白，有共同的保守区（IIYETFNEPT），Cx最适反应温度为50 ℃，最适pH值为6.0，且具有较广的pH值稳定范围，低浓度的Mg2+与Co2+对该酶有激活作用，高浓度的Mg2+与Cu2+对该酶有抑制作用。这一结果可为黄星天牛降解纤维素机制的研究提供理论基础，为进一步研究天牛中肠组织的生理功能提供基础信息。

关键词：黄星天牛；中肠；内切葡聚糖酶；鉴定；结构域；保守区；降解纤维素

中图分类号： Q556+.2；S433.5 文献标志码： A

文章编号：1002-1302（2016）11-0165-04

中肠是昆虫食物消化和营养吸收的主要场所，也是许多外来有害物质如农药、毒素、病源微生物等的作用靶标[1-6]。研究昆虫中肠蛋白质的组成和功能，不仅有助于阐明昆虫中肠对营养物质消化吸收的分子机理，也能进一步认识外源物质与中肠内蛋白质之间的相互作用。

天牛作为植食性昆虫，植物中的多糖如纤维素、半纤维素的降解是本身的能量来源之一。自1930年Ripper首次报道天牛自身能分泌纤维素酶后[7]，又有一些学者提出天牛自身具有分泌纤维素酶的生化结构基础[8]。用加入抗菌素的饲料人工饲养天牛，天牛肠道消化液中仍有很高的纤维素酶活性[9]。用等电聚焦电泳分离天牛消化道内切葡聚糖酶（Cx），发现不同发育阶段和不同虫态间的Cx同工酶差异很大，这标志着天牛体内共生微生物分泌Cx和天牛摄入真菌Cx的可能性很小[10]。……