秦安丽++乐渊++黎书怀++吴南村

摘要：建立了气相色谱法测定蔬菜、水果中的除草醚。样品用乙腈提取，经GC-e/NH2小柱净化，以乙腈+甲苯（体积比3∶1）溶液洗脱，采用气相色谱ECD检测器检测，外标法定量。结果表明，回收率为85%～110%，相对标准偏差为5.7%～16.7%，定量限为0.001 mg/kg。该法准确可靠、前处理简便，适用于批量样品的检测。

关键词：蔬菜；水果；除草醚；残留量；气相色谱

中图分类号：TQ457.2+5 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）03-0551-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.03.041

Method for Determination of Nitrofen in Fruits and Vegetables by Gas Chromatography

QIN An-li， LE Yuan， LI Shu-huai， WU Nan-cun

（Analysis and Testing Center，Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences/Hainan Provincial Key Laboratory of Quality and Safety for Fruits and Vegetables，Haikou 571101，China）

Abstract： The method for determination of nitrofen in fruits and vegetables was established by gas chromatography. Samples were extracted with acetonitrile， purified by GC-e/NH2 small column， and eluted with acetonitrile and toluene（volume ratio 3∶1），then the extracted solution was analyzed by gas chromatography ECD detector and quantified by external standard method. The results showed that the recovery was between 85%～110%，the relative standard deviation was 5.7%～16.7%，the limit of quantitation was 0.001 mg/kg. The method was proved to be accurate， reliable and convenient in pretreatment，suitable for the determination of batch sample.

Key words： fruits； vegetables； nitrofen； residual； gas chromatography

除草醚[2，4-dichloro-1-（4-nitrophenoxy）benzene]，主要防治某些一年生阔叶及禾本科杂草，可用于白菜、甘蓝、萝卜、油菜、芥菜、水萝卜、茎兰、菜花、芹菜、胡萝卜、香菜、茵香、葛笋、阁篙、菠菜等以及某些豆科蔬菜等菜田。除草醚作为醚类选择性触杀型除草剂，多数国家已禁止生产和使用。欧盟规定除草醚在柑橘中的最大残留量为0.01 mg/kg[1]，中国已经禁止使用，不得检出。目前，国外检测除草醚有气相色谱法、高效液相色谱法和气相色谱质谱法等分析方法[2-14]，检测的基体主要是稻米、水、原药。目前国内对其在蔬菜、水果的检测很少报道。

GC-ECD检测方法预处理简单，回收率高，出結果快，效率高。本研究拟利用GC-ECD检测蔬菜、水果中除草醚的残留。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器设备 气相色谱仪：Agilent 7890A GC-ECD；色谱柱：DM-1（30 m×0.32 mm×0.25 μm）；匀浆机、旋转蒸发仪。

1.1.2 试剂 乙腈、甲苯、正己烷、除草醚标准溶液。准确吸取除草醚标准品（纯度≥95%）于10 mL容量瓶中，用正己烷溶解并定容至刻度，存放于冰箱 （-18 ℃），依所需浓度准确吸取适量体积注入容量瓶中，以正己烷定容，配制工作液。

1.2 方法

1.2.1 样品的制备 芒果、西瓜、草莓、结球甘蓝、豇豆和萝卜等样品取可食部分，经缩分后，将其切碎，充分混匀，制成待测样。

1.2.2 样品的提取 准确称取25.00 g试样放入烧杯中，加入50 mL乙腈，高速匀浆（18 000 r/min） 2 min后用滤纸过滤，滤液收集到装有5～7 g氯化钠的100 mL具塞量筒中，收集滤液40～50 mL，盖上塞子，剧烈振荡2 min，室温下静置30 min。

1.2.3 样品的净化 从具塞量筒中吸取10.00 mL乙腈溶液，放到50 mL圆底烧瓶中旋转蒸干。然后过Wondasep GC-e/NH2小柱。柱子使用前用5 mL乙腈+甲苯（体积比3∶1）混合液活化，然后用6 mL乙腈+甲苯（体积比3∶1）混合液分3次溶解圆底烧瓶中的残渣，倒到预淋洗好的柱子，待柱子的样品快滴完时加入19 mL乙腈+甲苯混合液洗脱，收集洗脱液旋转蒸干，定容至5 mL，装样品瓶待测。

1.2.4 样品的测定 进样口温度为250 ℃，进样量为1 μL，色谱柱型号为DM-1（30 m×0.32 mm×0.25 μm），柱温箱初始温度为120 ℃，保持时间为1 min，速率为10 ℃/min，最终温度为280 ℃，保持3 min，氮气流量为1.0 mL/min，恒流模式，检测器（u-ECD）305 ℃，尾吹流量为30 mL/min，在此条件下，以峰面积作为定量指标，除草醚保留时间为14.017 min，标准溶液色谱见图1。

1.2.5 线性范围及定量限的测定 取0.008、0.020、0.040 μg/mL的除草醚标准工作液，在“1.2.4”色谱条件下进行色谱分析，以峰面积（A）为纵坐标、质量浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线，得到相关系数和线性范围。

1.2.6 准确度与精密度的测定 在芒果、西瓜、草莓、甘蓝、豇豆和萝卜空白样品中分别加入0.20、0.50、1.00 μg/kg除草醚标准溶液，每个样品做5个平行样品。加标后涡旋混匀，静置1 h，按“1.2.4”进行检测。

2 结果与分析

2.1 样品前处理

根据除草醚性质及相关文献，比较了多种有机溶剂的提取效果，包括乙腈、丙酮、二氯甲烷、正己烷，乙腈较后3种溶剂回收率高，且干扰小。故后续试验均选择乙腈。

2.2 净化条件的选择

蔬菜、水果含的色素较多。先后用弗罗里硅土柱和GC-e/NH2小柱，用丙酮+正己烷（体积比1∶9）和乙腈+甲苯（体积比3∶1）洗脱净化，并对其效果进行比较，发现GC-e/NH2小柱和乙腈+甲苯（体积比3∶1）净化效果要好。

2.3 洗脱液体积的确定

用乙腈+甲苯（3∶1）对吸附了饱和量除草醚的GC-e/NH2小柱进行洗脱，每次5 mL 并分别收集洗脱液，经气相色谱检测，第25 mL中均能检测到除草醚，第30 mL洗脱液中检测不到除草醚，因此选用25 mL乙腈+甲苯（3∶1）作为洗脱液。

2.4 测定条件的选择

2.4.1 色谱柱的选择 选择了GC-ECD应用最为广泛的DM-1型色谱柱，并得到了比较好的标准色谱图。经过优化，在DM-1色谱柱除草醚的保留时间约为14.017 min。

2.4.2 升温程序的优化 按照以下升温程序尝试了对除草醚的色谱分离效果。①柱温箱初始温度为120 ℃，保持时间为1 min，速率为20 ℃/min，最终温度为280 ℃，保持3 min，氮气流量为1.0 mL/min，恒流，检测器（u-ECD）305 ℃，尾吹流量为30 mL/min。②柱温箱初始温度为120 ℃，保持时间为1 min，速率为10 ℃/min，最终温度为280 ℃，保持3 min，氮气流量为1.0 mL/min，恒流，检测器（u-ECD）305 ℃，尾吹流量为30 mL/min。通过分析比较，确定温度程序为②，基质干扰峰与目标峰分离效果最好。

2.5 线性范围、检出限及回收率

曲线方程为y=323 750x-382.2，相关系数为0.999 9，除草醚在0.008～0.04 μg/mL的线性较好。在本方法测定条件下，方法的定量限为0.001 mg/kg。

加标回收率如表1所示，回收率在85%～110%，相对标准偏差在5.7%～16.7%。加标色谱情况见图2。

3 小结

本方法适合大批量蔬菜水果中除草醚残留量的检测，能使目标物在色谱图上有合适的保留时间、目标峰和杂质峰完全分离。其相对标准偏差不大于20%。该方法前处理操作便捷、耗时短、回收率高，符合蔬菜水果除草醚残留量的检测要求。

参考文献：

[1] 岳振峰，周乃元，叶卫翔.国内外食品安全限量标准实用手册[M].北京：中国劳动社会保障出版社，2010.

[2] 黄士忠，陈国光，李志祥.除草醚在稻米中残留量测定方法的研究[J].农村生态环境，1990（2）：54-56.

[3] 靳保輝，谢丽琪，吴卫东，等.大米与大豆中8种二苯醚除草剂残留量气相色谱测定方法研究[J].分析试验室，2008，27（6）：75-77.

[4] 陈沛金，靳保辉，谢丽琪，等.粮谷与油籽中9种二苯醚除草剂残留的气相色谱质谱法测定[J].分析测试学报，2007，26（6）：866-868.

[5] 陶大均.气相色谱法测定草胺敌草胺除草醚[J].农业环境保护，1992，11（5）：238-240.

[6] 王华勇.气相色谱法同时测定水中的滴滴涕、六六六、除草醚和氯本系化合物[J].中国供水卫生，2001，9（1）：15-18.

[7] 卢康全.气-液色谱法快速测定稻米中除草醚的残留量[J].农药，1989，28（3）：26-27.

[8] 俞琼珍.除草醚的高效液相色谱分析[J].宁波化工，2000（3）：50-51.

[9] 王逸虹，侯定远.除草醚的气相色谱测定[J].环境保护，1995（5）：32-33.

[10] 辜雪英，仇满珍.柑橘中除草醚残留量的气相色谱-质谱法测定[J].江西化工，2012（1）：59-62.

[11] 欧阳华学，黎源倩.同时测定大豆中二苯醚类除草剂的多残留[J].现代预防医学，2011，38（5）：927-930.

[12] 何成艳，黎源倩.浊点萃取-高效液相色谱法同时测定水中多种二苯醚类除草剂残留[J].四川大学学报（医学版），2010（1）：148-152.

[13] 渠 锋，莫汉宏，安凤春.反相高效液相色谱法检测水、土壤中的除草醚[J].农业环境科学学报，1999（2）：79-80.

[14] 何成艳，黎源倩，孟庆玉.中空纤维液相微萃取-HPLC法同时测定水样中多种二苯醚类除草剂残留[J].现代预防医学，2013， 40（22）：4227-4230，4236.