柴春维

[摘要] 目的 评估利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术（Xpert MTB/RIF）在肾结核的早期诊断及利福平耐药检测中的价值。 方法 选取该院79例（2014年1月—2015年9月）确诊为肾结核患者的尿液标本，分别进行尿沉渣涂片抗酸染色、XpertMTB/RIF检测、罗氏固体培养、传统比例法药敏试验。分析XpertMTB/RIF检测尿中的Mtb及利福平耐药性的敏感度和特异度。 结果 以罗氏固体培养为金标准，XpertMTB/RIF检测Mtb的敏感度和特异度为88.7%（47/53）和88.5%（23/26），以传统比例法药敏试验为金标准，XpertMTB/RIF检测利福平耐药的敏感度和特异度为71.4%（5/7）和100.0%（40/40）。 结论 XpertMTB/RIF技术检测尿液中的Mtb和RIF耐药具有较高的敏感度和特异度，对肾结核早期诊断和利福平耐药检测有较高的应用价值。

[关键词] XpertMTB/RIF技术；肾结核；敏感度；特异度

[中图分类号] R446.5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2017）01（a）-0109-03

[Abstract] Objective To evaluate the value of XpertMTB/RIF test in early diagnosis and resistance to rifampin of renal tuberculosis. Methods The urine samples of 79 patients（from January 2014 to September 2015） with renal tuberculosis were collected to do smear， XpertMTB/RIF test ，solid culture， traditional proportion method drug susceptibility test. Analyze the sensitivity and specificity of XpertMTB/RIF test in detecting tuberculosis and resistance to rifampin. Results Take solid culture result as standard ，the sensitivity and specificity of XpertMTB/RIF test in detecting urine Mtb were 88.7%（47/53）and 88.5%（23/26）. Take the result of proportion method drug susceptibility as standard ， the sensitivity and specificity of XpertMTB/RIF test in detecting rifampin resistance were 71.4%（5/7）and 100.0%（40/40）. Conclusions The Xpert MTB/RIF test has very high sensitivity and specificity in detecting urine Mtb and rifampin resistance ，It has higher value for early diagnosis renal tuberculosis and resistance to rifampin.

[Key words] XpertMTB/RIF technology； Renal tuberculosis； Sensitivity； Specificity

据WHO估计，近年来结核病的发病率在全球范围仍保持在较高的水平，同时肺外结核的发病率也呈现明显增加的趋势[1-2]。肾结核是最常见的肺外结核之一，约占所有肺外结核的20%[3]。该病起病及进展均较为隐蔽，如发现及治疗延误，尿液中的Mtb可蔓延破坏另一侧肾，甚至引起整个泌尿生殖系统结核。不仅治疗花费加大，而且对人体的身心健康危害巨大，生活质量将会大大下降。目前肾结核诊断主要依靠影像学及病原学检查。影像学检查（ B超、IVU和CT）对早期肾结核的诊断意义不大，故而病原学检查在肾结核的早期诊断中显得至关重要[4-5]。XpertMTB/RIF检测系统是一项将样品准备、定量PCR扩增和荧光检测集于一身的快速全自动的核酸扩增技术。目前国内外多项研究表明，其在结核病检测方面具有较高的敏感度和特异度，加之耗时短的优点，已成为近年来结核病确诊及利福平耐药性检测的重要手段[6-7]。该研究方便选取79例 （2014年1月—2015年9月）确诊肾结核患者的尿液标本，以罗氏固体培养和比例法药敏试验为金标准，探讨XpertMTB/RIF技术在肾结核的早期诊断及利福平耐药性检测中的价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

方便选取该院确诊肾结核患者79例，年龄14～63岁，男性46例，女性33例。右肾结核48例，左肾结核28例，双肾结核3例。同时合并其他部位结核57例。留取24 h尿沉渣及2杯中段晨尿送检。所有患者均经临床表现、影像学、病原学、组织病理学以及经验性抗结核治疗等最终确诊为肾结核。

1.2 仪器与试剂及方法

XpertMTB/RIF检测系统（Cepheid USA），罗氏固体培养基及药敏培养基。所有尿液标本同时做24 h尿沉渣涂片抗酸染色、罗氏固体培养、比例法药敏试验和XpertMTB/RIF检测。具体操作步骤严格参照说明书进行。

1.3 統计方法

运用SPSS 19.0统计学软件进行统计学分析，对XpertMTB/RIF结果和金标准比较，同时进行一致性检验，Kappa值≥0.75认为两者一致性较好。

2 结果

2.1 XpertMTB/RIF与罗氏培养法检测Mtb的比较

以罗氏培养法为金标准：①尿沉渣涂片抗酸染色阳性47例中，罗氏培养阳性35例，XpertMTB/RIF阳性33例，灵敏度94.3%。罗氏培养阴性12例，XpertMTB/RIF阴性10例，特异度83.3%。②尿沉渣涂片抗酸染色阴性32例中，罗氏培养阳性18例，XpertMTB/RIF阳性14例，灵敏度77.8%。罗氏培养阴性14例，XpertMTB/RIF阴性13例，特异度为92.8%。总敏感度88.7%（47/53），特异度88.5%（23/26）。对XpertMTB/RIF和罗氏培养法进行Kappa一致性检验，K=0.75，P<0.05，可认为两者具有高度一致性，见表1。

2.2 XpertMTB/RIF與传统比例药敏法对利福平耐药检测的比较

以传统比例法为金标准：①尿沉渣涂片抗酸染色阳性病例，传统比例法检测到5例耐药中，Xpert检测到4例，灵敏度80.0%。传统比例法检测到28例敏感中，Xpert检测到28例，特异度100.0%。②尿沉渣涂片抗酸染色阴性病例，传统比例法检测到2例耐药中，Xpert检测到1例，灵敏度50.0%。传统比例法检测到12例敏感中，Xpert检测到12例，特异度100.0%。全部病例总敏感度71.4%（5/7），特异度100.0%（40/40）。对Xpert MTB/RIF和传统比例法进行Kappa一致性检验，K=0.807，P<0.05，可认为两者具有高度一致性。

3 讨论

罗氏培养法在肾结核病原学检查中具有确诊价值，但实验本身需要时间长（2个月左右），作用受到一定限制[8]。尿沉渣涂片抗酸染色快速简单，但特异性差、敏感度低，不能做为诊断依据。故耗时短，敏感度和特异度均高，误差小的检验对肾结核诊治及预后意义将十分重大。XpertMTB/RIF技术以人体体液为标本，以rpoB基因为靶基因，提取DNA后扩增rpoB基因进行检测Mtb及RIF耐药。2 h检测出是否患结核病及是否对利福平耐药。近年来成为结核病确诊及利福平耐药检测的重要手段。

该研究采用XpertMTB/RIF检测尿中Mtb，以罗氏培养法为金标准，对其敏感度和特异度进行效价检验。结果显示，尿沉渣涂阳病例中，XpertMTB/RIF具有94.3%的高阳性率，而涂阴病例中，阳性率明显下降至77.8%。总敏感度88.7%，低于报道中检测痰Mtb的敏感度96%[9]。这与尹青琴等人[10]关于XpertMTB/RIF对结核病诊断价值的meta分析一文中的结论一致，XpertMTB/RIF诊断涂阳病例的敏感度明显高于涂阴病例（99.0% vs 74.0%），诊断肺外结核的敏感度低于肺结核（76.0% vs 96.0%）。在检测RIF耐药中，以传统比例法为金标准，敏感度71.4%，特异度达100.0%。在张治国等人[11]关于XpertMTB/RIF检测RIF耐药研究中，其敏感度和特异度分别为89.1%和96.3%。与此结论相比，该研究中的特异度虽仍保持在较高水平，但100.0%又过于绝对，敏感度却出现明显下降。分析原因，可能与标本例数少引起比值差异大有关，比例法测利福平敏感的40例病例中， XpertMTB/RIF恰好完全符合，使得特异度达100.0%。而在仅有的7例耐药中，XpertMTB/RIF测到5例，5/7的比值又使敏感度明显降低，增加样本的例数将使结论更加精确。

目前XpertMTB/RIF已广泛用于肺结核及耐多药结核的诊治中，但在肺外结核中应用较少。该研究结论显示其在肾结核的早期诊断及RIF耐药筛查方面具有很高的使用价值，可在临床工作中广泛开展。另外也要将该技术广泛用于其他肺外结核的诊治中，如结核性脑膜炎、骨关节结核等，使该技术在肺外结核的疫情控制中发挥更大的作用。

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[8] 王甦民. 结核病诊断实验室检验规程[M]. 北京：中国教育文化出版社，2006：30-90.

[9] 陈海强，唐柳生.Xpert MTB/RIF法和涂片法检测痰液结核分枝杆菌的比较[J].中外医疗，2015（13）：186-187.

[10] 尹青琴，焦伟伟，孙琳，等.XpertMTB/RIF试验对结核病及耐多药结核病诊断价值的Meta分析[J].中国循证儿科杂志，2012，9（7）：341-348.

[11] 张治国，欧喜超，孙倩，等.XpertMTB/RIF检测痰标本中结核分枝杆菌及耐药性的研究[J].中国防痨杂志，2013， 35（1）：13-16.

（收稿日期：2016-10-08）