陈孟毅++林帅++杜朋++李程程++孟爱民

[摘要] 目的 建立小鼠博来霉素气管多次给药肺纤维化模型。 方法 SPF级雄性C57BL/6J小鼠45只，按体重随机分为未处理组（5只）和处理组（40只），未处理组小鼠不经处理，处理组小鼠博来霉素气管给药（0.4 mg/mL），2周给药1次，共8次。处理组小鼠在初次给药后2周、1个月、2个月、4个月时分别取出肺组织称重计算肺系数、固定做HE染色和Masson染色，制备冰冻切片进行细胞衰老β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色。 结果 与未处理组小鼠比较，处理组小鼠在给药2周时肺系数显著升高（P < 0.05）；同时，肺组织病理观察结果显示，给药2周时，小鼠肺泡腔内渗出和血管周围炎细胞浸润较为严重，病理评分与未处理组小鼠比较显著升高（P < 0.05）。此外，处理组小鼠在给药2周、2个月与4个月时肺泡间隔增宽相对稳定，与未处理组小鼠比较，病理评分显著升高（P < 0.05），但胞浆渗出逐渐减少、炎细胞浸润减轻，评分接近未处理组小鼠水平；胶原染色结果显示处理组小鼠在给药2周时出现蓝绿色的胶原纤维，并在1、2、4个月时胶原纤维持续存在；SA-β-Gal染色结果表明，与未处理组小鼠比较，博来霉素气管给药4个月时小鼠的肺组织中衰老细胞明显增多。 结论 博来霉素气管多次给药可以建立小鼠肺纤维化模型，且模型小鼠具有肺纤维化进展不可逆、炎性反应明显减少两个重要特点，并提示肺纤维化与衰老细胞有一定关系。

[关键词] 博来霉素；纤维化；肺；模型

[中图分类号] R563.02；R363 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2017）01（b）-0008-04

特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis，IPF）是一种原因不明、以弥漫性肺泡炎和肺泡结构紊乱最终导致肺间质纤维化为特征的慢性疾病[1-2]。临床上除肺移植外无有效的治疗手段[3-4]，且预后极差，动物肺纤维化模型在肺纤维化机制及其防治研究中非常重要。二氧化硅[5]、石棉、博来霉素[6]（BLM）等都能诱导肺纤维化，常用BLM诱导肺纤维化模型[7]，BLM气管给药是最常用的方式[8]，气管给药又分为气管插管和气管滴注。有文献报道BLM单次给药模型在给药6周后，小鼠肺损伤部位有明显修复[9]，与人类肺纤维化疾病的发展过程不同；病理学表现也不相同，人肺纤维化疾病的肺损伤部位细胞外基质的沉积增多，中性粒细胞炎性反应不突出[10]，而单次给药肺纤维化模型中常有明显的嗜中性粒细胞的炎性反应[11]，并有文献显示经单次给药肺纤维化模型筛选出的药物治疗方案，在临床上多数是无效的[12]。……