赖玲林，肖苑，彭小芳，冷恩念，莫镇涛，李文娜，陈阳，李意奇

(1遵义医学院珠海校区，广东珠海519041；2广东省第二人民医院；3贵州省人民医院)

杜仲叶绿原酸提取物联合西红花苷对肝癌细胞胆固醇代谢的影响

赖玲林1，2，肖苑3，彭小芳1，冷恩念1，莫镇涛1，李文娜1，陈阳1，李意奇1

(1遵义医学院珠海校区，广东珠海519041；2广东省第二人民医院；3贵州省人民医院)

目的 观察杜仲叶绿原酸提取物(CAEF)联合西红花苷对人肝癌细胞HepG2胆固醇代谢的影响，并探讨其可能的作用机制。方法 将人肝癌细胞HepG2随机分为空白对照组、油酸诱导组、辛伐他汀组、CAEF组、联合用药组。油酸诱导组、辛伐他汀组、CAEF组、联合用药组分别加入油酸诱导脂肪变性模型；同时，辛伐他汀组加入10 μmol/L的辛伐他汀10 μL，CAEF组加入25 mg/L 的CAEF 10 μL，联合用药组加入含1 μmol/L西红花苷、30 μmol/L绿原酸、10 μmol/L京尼平苷、10 μmol/L槲皮素的混合液10 μL；空白对照组仅加入等体积培养基。取各组干预48 h细胞，行油红O染色，检测细胞内中性脂滴含量。取干预24、48 h细胞上清液，检测TC、TG含量。采用RT-PCR法检测胆固醇代谢相关基因(ABCA1、SREBP2、CYP7A1、LXRα、AMPK2α、HMGCR)表达，免疫细胞化学法和Western blotting法检测HMGCR蛋白表达。结果 辛伐他汀组、CAEF组、联合用药组干预48 h，细胞内中性脂滴含量明显降低，其作用强度依次为联合用药组>CAEF组>辛伐他汀组(P均<0.05)；与对照组比较，CAEF组、联合用药组干预24、48 h时细胞外液TC、TG含量明显增加，细胞外液TC、TG含量依次为联合用药组>CAEF组>辛伐他汀组(P均<0.05)。CAEF组、联合用药组ABCA1、CYP7A1、AMPK2α mRNA表达明显升高，SREBP2、HMGCR mRNA表达明显降低(P均<0.05)；此外，联合用药组LXRα mRNA表达明显降低(P<0.05)。辛伐他汀组、CAEF组、联合用药组HMGCR蛋白表达明显降低，以联合用药组降低最明显(P均<0.05)。结论 CAEF联合西红花苷可协同抑制肝癌细胞脂质积聚，其作用机制可能与调控肝癌细胞胆固醇代谢相关基因和蛋白的表达有关。

脂类代谢紊乱；肝癌细胞；杜仲叶；绿原酸提取物；西红花苷

药用杜仲是杜仲科植物杜仲的干燥树皮，具有补益肝肾、强筋壮骨、调理冲任、固经安胎等功效，是中国名贵的滋补药材，早在《神农本草经》里就有记载。杜仲皮含有绿原酸、槲皮素、京尼平苷等多种活性成分，杜仲叶中亦含有类似的活性成分，由于杜仲皮资源较匮乏，而杜仲叶资源丰富且容易取得，故杜仲叶取代杜仲皮已被认可[1]。现代药……