赵欣，王春立，李楠，马涛，尤胜义

(天津医科大学总医院，天津300052)

多烯紫杉醇联合反义miR-21对人胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

赵欣，王春立，李楠，马涛，尤胜义

(天津医科大学总医院，天津300052)

目的 探讨多烯紫杉醇(DTX)联合反义miR-21(AS-miR-21)对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响及其可能的作用机制。方法 采用7种浓度 DTX筛选对人胰腺癌MiaPaCa-2细胞增殖抑制最佳的IC50(15 μmol/L)进行后续试验。随机将MiaPaCa-2细胞分为空白对照组、无义序列组、DTX组、AS-miR-21组、DTX+AS-miR-21组。AS-miR-21组、DTX+AS-miR-21组转染AS-miR-21，无义序列组转染Lipofectamine2000，均转染24 h；DTX+AS-miR-21组转染后予15 μmol/L的DTX作用48 h；空白对照组未行任何处理，DTX组加入15 μmol/L的DTX作用48 h。收集各组细胞，RT-PCR法检测miR-21的相对表达量，克隆形成实验检测细胞增殖能力，流式细胞仪检测细胞早期凋亡率，Western blotting法检测细胞周期依赖性蛋白激酶5(CDK5)的相对表达量。结果 与无义序列组、空白对照组比较，AS-miR-21组、AS-miR-21+DTX组miR-21的相对表达量均明显降低(P均<0.05)。与空白对照组、无义序列组比较，DTX组、AS-miR-21组、DTX+AS-miR-21组克隆数目明显降低、早期凋亡率明显升高、CDK5的相对表达量明显降低，以DTX+AS-miR-21组变化最明显(P均<0.05)。结论 DTX联合AS-miR-21可明显抑制胰腺癌细胞增殖并促进其早期凋亡，其机制可能与CDK5表达下降有关。

胰腺癌；多烯紫杉醇；微小RNA-21；细胞增殖；细胞凋亡

胰腺癌是最常见的致死性肿瘤之一，恶性程度高，其病死率居所有恶性肿瘤的第4位[1，2]。化疗虽然不是胰腺癌首选的治疗方式，但在临床治疗中占重要地位。目前，胰腺癌整体的化疗效果不甚理想，探索新的治疗靶点和干预方式以提高胰腺癌的化疗效果是目前亟需解决的难点[3]。多烯紫杉醇(DTX)为一种新型的紫杉烷类抗肿瘤药物，抗肿瘤活性明显高于紫杉醇，具有细胞内滞留时间长、局部浓度高等优点[4]。有研究发现，在胰腺癌中miR-21的下游靶点可参与激活或抑制多条信号通路，特别在肿瘤细胞的增殖、凋亡等生物学行为调控方面发挥重要作用[5，6]。……