施和平，朱远锋，曾宝强，周卓辉，余震傲，黄胜琴

1 华南师范大学生命科学学院 广东省植物发育生物工程重点实验室，广东 广州 510631

2 香港教育学院 科学与环境学系，香港 新界

美洲商陆毛状根诱导及其离体培养的影响因素

施和平1，朱远锋1，曾宝强2，周卓辉2，余震傲1，黄胜琴1

1 华南师范大学生命科学学院 广东省植物发育生物工程重点实验室，广东 广州 510631

2 香港教育学院 科学与环境学系，香港 新界

施和平, 朱远锋, 曾宝强, 等. 美洲商陆毛状根诱导及其离体培养的影响因素. 生物工程学报, 2017, 33(2): 272–283.

Shi HP, Zhu YF, Tsang PKE, et al. Factors influencing induction andin vitroculture of hairy roots inPhytolacca americanaL. Chin J Biotech, 2017, 33(2): 272–283.

为了探讨利用美洲商陆毛状根生产其药用成分的可能性，研究了美洲商陆毛状根诱导及其离体培养的影响因素。结果表明，美洲商陆叶片外植体被发根农杆菌ATCC 15834感染约18 d后，从其叶片外植体形态学下端叶脉切口处产生毛状根，其中以预培养1 d，农杆菌感染20 min，共培养4 d时的毛状根诱导率最高，达到70%。PCR扩增和硅胶薄层层析结果显示，发根农杆菌Ri质粒的rolC基因以及冠瘿碱合成酶基因已在美洲商陆毛状根基因组中整合和表达。所获得的美洲商陆毛状根系都能在无外源激素的MS固体培养基上快速自主生长；其中以毛状根根系2的生长速度最快、分生侧根能力最强和根表面的根毛密度最高；毛状根根表面呈紫红色或呈白色。在供试的MS、1/2MS、B5和6,7-V液体培养基中，以无外源激素的MS培养基最适合美洲商陆毛状根根系生长。与无外源激素的MS培养基相比，6,7-V培养基更有利于毛状根中商陆皂苷甲的合成与积累。……