程成，汪俊卿，王腾飞，杨晓慧，王瑞明

齐鲁工业大学 生物工程学院，山东 济南 250353

热带假丝酵母ctpxa1基因缺失菌的构建及对长链二元酸积累的影响

程成，汪俊卿，王腾飞，杨晓慧，王瑞明

齐鲁工业大学 生物工程学院，山东 济南 250353

程成, 汪俊卿, 王腾飞, 等. 热带假丝酵母ctpxa1基因缺失菌的构建及对长链二元酸积累的影响. 生物工程学报, 2017, 33(2): 237–246.

Cheng C, Wang JQ, Wang TF, et al. Effect ofctpxa1gene deletion inCandida tropicalison long chain dicarboxylic acid accumulation. Chin J Biotech, 2017, 33(2): 237–246.

Pxa1p为酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae过氧化物酶体上的膜蛋白，与Pxa2p组成二聚体，参与转运长链脂肪酸进入过氧化物酶体过程。热带假丝酵母能够发酵烷烃和脂肪酸生产长链二元酸，而过氧化物酶体中发生的β-氧化会消耗产生的长链二元酸造成产率降低。本研究以热带假丝酵母Candida tropicalis1798为宿主菌，通过基于PCR片段的同源单交换法，快速构建ctpxa1基因敲除菌株C. tropicalis1798-pxa1。利用半定量RT-PCR技术，检测ctpxa1基因在C. tropicalis1798、C. tropicalis1798-pxa1的表达量，灰度值比值为2.03，表明ctpxa1在C. tropicalis1798-pxa1中的表达被弱化。经144 h发酵，C. tropicalis1798-pxa1比C. tropicalis1798的十二碳二元酸产量明显提升，其产出浓度为10.3 g/L，比野生型菌株C. tropicalis1798提高了94.3%。

热带假丝酵母，长链二元酸，ctpxa1p基因，过氧化物酶体

长链二元酸是一类重要的化工原料，可用于合成人工麝香类香料、尼龙、工程塑料、热熔胶、树脂、高级润滑油、耐寒增塑剂及液晶等物质。热带假丝酵母是重要的工业菌种，能够利用烷烃和脂肪酸作为唯一碳源和能源合成长链二元酸[1-3]，当以烷烃或脂肪酸为碳源时，在细胞内可形成大量的过氧化物酶体，同时诱导生成脂肪酸β-氧化酶系[4-5]，二元酸可以进入过氧化物酶体经β-氧化降解为细胞生命活动提供能量，但该过程通常会导致二元酸的过量消耗，因此对于提高烷烃的转化率和二元酸的产量是极为不利的[6-8]。……