王正江, 杨鸿梅

(江苏省盐城市第一人民医院 消化内科, 江苏 盐城, 224001)

结直肠癌中SOX9的表达及临床意义

王正江, 杨鸿梅

(江苏省盐城市第一人民医院 消化内科, 江苏 盐城, 224001)

结直肠癌; SOX9; 病理; 免疫组化

SOX是一类SRY相关基因构成的控制发育的基因家族，编码一系列SOX家族的转录因子，其所有成员的共同特点是含有一个高度保守的HMG-box DNA结合域。相关研究发现SOX9的异常表达与许多肿瘤的发生、发展及预后相关。结直肠癌(CRC)的发病率和病死率在消化系统恶性肿瘤中仅次于胃癌、食管癌和原发性肝癌。本实验采用免疫组织化学方法检测结直肠癌组织中SOX9的表达情况，并分析与患者临床和病理特性的相关性，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 组织标本

收集2013年5月—2013年10月189例盐城市第一人民医院结直肠腺癌术后经HE染色确诊的高、中、低分化标本，其中男109例，女80例，年龄22～89岁，平均63.3±10.42岁。剔除术前曾接受放疗及化疗患者。TNM分期依照UICC/AJCC结直肠癌分期(第7版)。

1.2 免疫组织化学

根据UltraSensitiveTMS-P超敏试剂盒(Maixin-bio)说明书操作。组织标本蜡块行3 μm切片，常规二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水，对组织抗原进行相应的修复。一抗SOX9(1∶1 000，ab185966)。阴性对照以PBS代替。DAB显色，苏木精复染。SOX9定位于细胞核，阳性染色为棕黄色; 根据核染色强度和核阳性细胞百分比进行判断。强度为0(无染色), 1(弱染色), 2(中度染色), 3(强染色); 核阳性细胞百分比为0(无), 1(<10%), 2(10%～50%), 3(51%～80%), 4(>80%)。染色指数从0到12(核染色强度和核阳性细胞百分比相乘), 0～6低表达, 8～12高表达。由2位高年资病理科医师进行独立阅片，以双盲法确定评分。

2 结 果

2.1 结直肠癌组织中SOX9蛋白免疫组化结果

SOX9表达阳性呈棕黄色颗粒，主要位于癌细胞核染色，在癌细胞质无染色。结果显示189例结直肠癌组织标本中, SOX9阳性表达率为37.57%(71/189)，癌旁细胞中偶见阳性细胞，正常组织细胞中未见阳性细胞。

2.2 SOX9表达与临床病理参数相关性

分析189例结直肠癌组织标本中SOX9高表达组和低表达组临床病理变量间关系，结果发现癌组织中SOX9表达与肿瘤大小、浸润深度、TNM分期和淋巴节转移具有显著相关性(P<0.05)。见表1。

3 讨 论

SOX基因家族是在动物中发现的一类新的编码转录因子的基因家族，参与性别决定、骨组织的发育、血细胞生成、神经系统的发育、晶状体的发育等多种早期胚胎发育过程。有相关研究[1]发现, SOX9基因的突变还可引起结直肠癌, SOX17基因的低表达对于结肠癌的生长和扩散具有重要作用[2]。SOX7表达下调可能与结肠直肠癌的发生、发展有一定关系[3]。SOX9是软骨发育和睾丸发育的主要调节者，也在肾、心、脑发育过程中起作用，在肺腺癌组织中mRNA高表达[4], 在胰腺癌组织中表达上调[5]。调控胰腺肿瘤发生的ERBB通路[6], 是胰腺癌发生的关键因素[7], 参与胰腺导管内乳头状黏液性肿瘤恶性进展[8]，可作为胰腺导管腺癌预后标志物[9]，且与乳腺癌预后相关[10], 但其与结直肠癌发生的关系尚不明确。

本实验结果显示, SOX9阳性表达率为37.57%。进一步分析其表达与临床病理特征关系，发现SOX9表达与肿瘤大小、浸润深度、TNM分期和淋巴节转移具有显著相关性(P<0.05), 与目前相关研究[11]相似，提示SOX9可能是结直肠癌发生、发展中的危险因素之一，可作为判断结肠癌恶性程度和评价患者预后或诊断的指标。

目前研究表明SOX家族是通过作为转录因子在信号通路下游发挥作用而影响肿瘤的发生发展，由此可推测它可能并不是一个直接的致癌或抑癌基因。本研究认为SOX9在一定程度上可反映结直肠癌的恶性程度和预后，随着对SOX基因结直肠癌关系研究的不断深入，将有利于寻找更好的预测指标和干预靶点。

表1 SOX9在结直肠癌中的表达与临床病理参数的关系

[1] Blache P, van de Wetering M, Duluc I, et al. SOX9 is an intestine crypt transcription factor, is regulated by the Wnt pathway, and represses the CDX2 and MUC2 genes[J]. J Cell Biol, 2004, 166(1): 37-47.

[2] Sinner D, Kordich J J, Spence J R, et al. Sox17 and Sox4 differentially regulate β-catenin/T-cell factor activity and proliferation of colon carcinoma cell[J]. Mol Cell Biol, 2007, 27 (22): 7802-15.

[3] Takash W, Caizares J, Bonneaud N, et al. SOX7 transcrition factor: sequence, chromosomal localissation, expression, transactivation and interence with Wnt signaling[J]. Nucleic Acids Res, 2001, 29(21): 4274-83.

[4] Capaccione K M, Hong X, Morgan K M, et al. Sox9 mediates Notch1-induced mesenchymal features in lung adenocarcinoma[J]. Oncotarget, 2014, 5(11): 3636-50.

[5] Camaj P, Jckel C, Krebs S, et al. Hypoxia-independent gene expression mediated by SOX9 promotes aggressive pancreatic tumor biology[J]. Mol Cancer Res, 2014, 12(3): 421-32.

[6] Grimont A, Pinho A V, Cowley M J, et al. SOX9 regulates ERBB signalling in pancreatic cancer development[J]. Gut, 2015, 64(11): 1790-9.

[7] Seymour P A. Sox9: a master regulator of the pancreatic program[J]. Rev Diabet Stud, 2014, 11(1): 51-83.

[8] Camaj P, Jackel C, Krebs S, et al. Hypoxia-independent gene expression mediated by SOX9 promotes aggressive pancreatic tumor biology[J]. Mol Cancer Res, 2014, 12(3): 421-32.

[9] Xia S, Feng Z, Qi X, et al. Clinical implication of Sox9 and activated Akt expression in pancreatic ductal adenocarcinoma[J]. Med Oncol, 2015, 32(1): 358-363.

[10] Riemenschnitter C, Teleki I, Tischler V, et al. Stability and prognostic value of Slug, Sox9 and Sox10 expression in breast cancers treated with neoadjuvant chemotherapy[J]. Springer plus, 2013, 2: 695-699.

[11] Bruun J, Kolberg M, Nesland J M, et al. Prognostic Significance of β-Catenin, E-Cadherin, and SOX9 in Colorectal Cancer: Results from a Large Population-Representative Series[J]. Front Oncol, 2014, 4: 118.

2015-12-20

R 735.3

A

1672-2353(2017)01-198-02

10.7619/jcmp.201701075