赵明礼等

同期排卵
——定时输精对产后难配泌乳奶牛繁殖效率的影响

赵明礼等

奶牛理想的泌乳周期为一年，即产犊间隔365d。然而在实际生产中，奶牛场母牛的产犊间隔往往达不到理想水平。正常情况下，奶牛在产后30～70 d内卵巢和生殖道恢复正常，表现出正常规律性的发情周期和明显的发情症状，但是产后繁殖障碍疾病如产后不发情和久配不孕等使得产后泌乳母牛繁殖效率降低，从而延长了产犊间隔。

本试验选用前列腺素F2α（PGF2α）、黄体酮（P4）和促性腺激素释放激素（GnRH）3种外源生殖激素，按照一定程序处理产后难配（产后不发情或久配不孕）奶牛，研究同期排卵-定时输精技术对产后难配奶牛繁殖效率的影响，以期为解决奶牛繁殖障碍提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验动物

试验奶牛为奶牛产业技术体系大同综合试验站（大同市四方高科农牧有限公司）饲养的荷斯坦泌乳奶牛。选择88头健康、膘情适中（体况评分在2.5～4.25）、久配不孕（人工授精3次以上未妊娠母牛，占试验牛45.5%）或产后不发情（产后110 d内未观察到发情症状的泌乳母牛，占试验牛54.5%）的空怀荷斯坦泌乳奶牛（本试验统称为难配泌乳奶牛），随机分为3组，试验牛基本情况见表1。经直肠检查，试验牛生殖道正常，卵巢除部分静止以外无其他明显异常。

表1 试验牛基本情况表

试验期间，TMR全混合日粮，3次/d（早、中、晚各1次），自由饮水。

1.2 试验方法

试验分组及处理

试验牛随机分为3组，分别记为试验1、2、3组。

试验1组，Ovsynch法：所有试验牛于发情周期任意一天（记为第0天）15：00—16：00第一次肌肉注射GnRH 100 μg，第7天15：00—16：00肌肉注射PGF2α 0.4 mg，第9天15：00—16：00第二次肌肉注射GnRH 100 μg，第10天07：00—08：00定时人工授精。

试验2组，CIDR+Ovsynch法：所有试验牛于发情周期任意一天（记为第0天）15：00—16：00阴道埋植CIDR且第一次肌肉注射GnRH 100 μg，第7天15：00—16：00撤出CIDR且肌肉注射PGF2α 0.4 mg，第9天15：00 —16：00第二次肌肉注射GnRH 100 μg，第10天07：00—8：00定时人工授精。

试验3组，CIDR+PG+GnRH法：所有试验牛于发情周期任意一天（记为第0天）15：00—16：00阴道埋植CIDR，第7天15：00—16：00撤出CIDR且肌肉注射PGF2α 0.4 mg，第9天15：00— 16：00肌肉注射GnRH 100 μg，第10天07：00—08：00定时人工授精。

各试验组操作流程见图1。

图1 试验分组及处理流程示意图

发情鉴定

采用人工观察法、尾根涂抹蜡笔法和计步器活动量监控相结合的方法监测母牛发情。

人工授精

选择1头进口荷斯坦种公牛的常规冷冻精液（公牛号为25HO00989），2名输精人员按照同期排卵-定时输精程序的固定时间点随机给处理母牛人工授精。每头母牛使用一支冷冻精液，且解冻后15 min内直肠把握将精液输送到子宫体前端。

妊娠诊断

母牛输精后40～45 d利用B超诊断仪进行妊娠诊断。

2 结果与分析

2.1 同期排卵——定时输精程序对产后难配泌乳奶牛人工授精的影响

表2结果表明，3种同期排卵-定时输精程序处理产后难配奶牛后都获得了较好的配种妊娠率，虽然试验1组和试验2组的不返情率略高于试验3组（P=0.06，P=0.09），试验2组的情期受胎率略高于试验1组和试验3组（P=0.08，P=0.06），但是3种程序处理难配奶牛人工授精后的不返情率和情期受胎率之间无显著差异（P＞0.05）。

表2 不同同期排卵——定时输精程序对难配奶牛不返情率和情期受胎率的影响

2.2 同期排卵——定时输精程序对产后难配奶牛血清中P4和E2含量的影响

由图2可知，配种妊娠母牛与未妊娠母牛血清中P4含量的变化趋势一致，即在CIDR埋植期，母牛血清中的P4含量逐渐增加，在撤栓时达到高峰（0.234±0.055）、（0.256±0.045）ng/mL，撤栓后迅速降低，输精时降到最低（0.129±0.009）、（0.134±0.026）ng/mL，其中妊娠母牛血清P4的最低值低于未妊娠母牛，但差异不显著（P＞0.05）；配种妊娠母牛与未妊娠母牛血清中E2含量变化趋势差异较大，妊娠母牛血清中E2含量整体呈增加趋势，定时输精时达到最高7.402（±0.663）pg/mL，而配种未妊娠母牛血清中E2含量变化幅度较大，高峰值出现在定时输精之前（第二次注射GnRH时），定时输精时血清中E2含量降到较低水平（5.448±1.252）pg/mL，且极显著低于配种妊娠母牛（P＜0.01）。

图2 CIDR+Ovsynch程序处理母牛血清P4（A）和E2（B）含量变化趋势

由图3可知，CIDR+PG+GnRH程序处理过程中母牛血清中P4含量变化趋势与CIDR+Ovsynch程序相似，即在CIDR埋植期，母牛血清中的P4含量逐渐增加，在撤栓时达到高峰（0.265±0.090）ng/mL、（0.247±0.032）ng/mL，撤栓后迅速降低，定时输精时达到最低点（0.064±0.018）ng/mL、（0.117±0.024）ng/mL，且妊娠母牛血清P4的最低值显著低于未妊娠母牛（P＜0.05）；CIDR+PG+GnRH程序处理过程中母牛血清中E2含量变化趋势与CIDR+Ovsynch程序略有不同，配种妊娠母牛血清中E2含量从撤栓后才开始呈逐渐增加趋势，定时输精时达到最高值（8.226±5.253）pg/mL，配种未妊娠母牛血清E2含量的高峰值同样出现在定时输精之前（撤栓时），定时输精时血清E2含量降到较低水平（5.103±0.966）pg/mL，且极显著低于配种妊娠母牛（P＜0.01）。

图3 CIDR+PG+GnRH程序处理母牛血清P4（A）和E2（B）含量变化趋势

3 讨论

泌乳母牛产后不发情和久配不孕是影响奶牛场繁殖效率的重要因素。奶牛繁殖受下丘脑-垂体-卵巢生殖轴的反馈调节，因此体内生殖激素的规律性变化和调控是母牛具有正常发情周期和繁殖性能的基础。正常情况下，卵泡期卵泡生长发育并分泌E2，低浓度E2正反馈调节下丘脑GnRH的合成与分泌，GnRH作用于垂体，促进FSH和LH的释放，促进优势卵泡形成、排卵和黄体形成；黄体期黄体分泌P4，高浓度P4负反馈调控GnRH和FSH的分泌，抑制卵巢上卵泡发育，若母牛发情未配种或者配种未妊娠，则子宫内膜细胞合成PGF2α溶解黄体，从而解除了P4对生殖轴的抑制作用，母牛开始新一轮的发情周期。因此，生殖激素紊乱是导致奶牛产后不发情、久配不孕的主要原因。

同期排卵-定时输精技术不仅能够提高发情周期正常奶牛的发情率和参配率，而且通过GnRH+PG或者孕激素+GnRH+PG联合处理可诱导生殖激素紊乱的奶牛恢复正常繁殖性能和发情周期，从而使难配奶牛如卵泡发育不良或产后不发情奶牛参加配种并妊娠。本试验中，3种同期排卵-定时输精程序处理的难配母牛都获得了较好的情期受胎率，表明应用外源生殖激素处理难配母牛可以提高奶牛场难配母牛的配种妊娠率。

血液中性腺类固醇激素（如雌激素和黄体酮）在奶牛发情周期中规律性分泌对下丘脑-垂体-卵巢生殖轴具有重要的反馈调节作用。血液中雌激素含量高低主要取决于奶牛卵巢上卵泡的数量和质量，而黄体酮高低主要反映卵巢上黄体的质量。

摘自“中国畜牧杂志”微信公众号