宋文玲，韩 蓉，张 曼，张 权，姚惟琦,3，武栋成,4

(1.湖北省武汉市黄陂区人民医院暨江汉大学附属第三医院肿瘤三科 430060；2.武汉汉密顿生物科技股份有限公司研发部，武汉 430075；3.武汉大学第一临床学院肿瘤中心，武汉 430060；4.武汉大学基础医学院，武汉 430072)

两种培养基的培养体系对CIK细胞增殖和功能的影响

宋文玲1，韩 蓉1，张 曼1，张 权2，姚惟琦2,3，武栋成2,4

(1.湖北省武汉市黄陂区人民医院暨江汉大学附属第三医院肿瘤三科 430060；2.武汉汉密顿生物科技股份有限公司研发部，武汉 430075；3.武汉大学第一临床学院肿瘤中心，武汉 430060；4.武汉大学基础医学院，武汉 430072)

目的 观察细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)增殖情况，检测CIK细胞的表面分子表型和体外对白血病细胞K562的杀伤作用。方法 通过用H3培养基培养的分别来源于脐带血和患者自体外周血分离的单个核细胞(PBMC)，添加重组人γ干扰素(IFN-γ)与CD3单抗，体外诱导CIK细胞，在培养的第7天分别加入H3培养基和T551培养基继续诱导培养至14 d。计数观察CIK细胞增殖能力，流式检测细胞表面CD3、CD56的表达情况，CCK8法检测两组培养基条件下对白血病细胞K562的杀伤效果。结果 动态计数及表型分析结果表明，H3及H3+T551培养的CIK细胞扩增倍数(包括脐带血CIK总细胞数和自体CIK总细胞数)在第14天均分别达到76.9倍、62.3倍；两种培养条件下脐带血CIK细胞中 CD3+CD56+双阳性细胞含量分别是(16.70±2.72)%和(10.80±2.59)%，自体CIK细胞中 CD3+CD56+双阳性细胞含量分别是(11.23±6.64)%和(10.70±6.42)%；体外杀瘤实验表明，当效靶比为5∶1时，H3培养的脐带血CIK细胞杀伤率达到(33.50±9.99)%，显著高于H3+T551培养脐带血CIK细胞的(20.3±6.76)%，差异有统计学意义(P=0.011),而H3和H3+T551培养的自体CIK细胞杀伤率分别是(59.67±27.59)%和(42.13±19.47)%，差异无统计学意义(P=0.080)。……