谢英娜

补体反应基因-32在结肠癌组织中的表达及临床意义

谢英娜

目的 探讨补体反应基因-32（RGC-32）在结肠癌组织中的表达情况，并分析其临床意义。方法 选取2012年12月至2015年12月沈阳市第九人民医院收治的结肠癌患者80例为研究对象，癌组织标本均采用免疫组化SP法检测RGC-32表达，观察不同肿瘤分化程度、淋巴结转移及不同TNM分期RGC-32的阳性表达情况。结果 高中分化者RGC-32乘积积分及RGC-32阳性率均低于低分化者，差异有统计学意义（P＜0.05）；存在淋巴结转移者RGC-32乘积积分及RGC-32阳性率均低于无淋巴结转移者，差异有统计学意义（P＜0.05）；TNM分期Ⅰ+Ⅱ期者RGC-32乘积积分及RGC-32阳性率低于TNM分期Ⅲ+Ⅳ期者，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 RGC-32可作为结肠癌患者预后的预测指标及靶向治疗新突破。

补体反应基因-32；结肠癌；分化程度；病理检查

【DOI】10.12010/j.issn.1673-5846.2017.01.050

结肠癌是目前临床上最常见的消化道恶性肿瘤之一，本病发病隐匿，临床症状不明显，一旦发病多数处于中晚期，故本病病死率较高，且发病后患者的生命质量相对较差[1]。既往研究证实[2-4]，结肠癌的发病与多种致癌基因存在一定的相关性，其中补体反应基因-32（RGC-32）作为补体激活相关基因，表达于多种实体恶性肿瘤中[5]。在结肠癌发病过程中，RGC-32主要通过促进恶性肿瘤细胞增殖、迁移与血管生成而发病。然而，RGC-32在结肠癌发病中的具体机制目前尚未完全阐明，尤其是其促进恶性肿瘤发展的分子机制有待进一步研究[6]。为更好地阐明RGC-32基因与结肠癌之间的相关性，本研究采用免疫组化检测RGC-32在结肠癌中的表达情况，以分析RGC-32与结肠癌发生及发展的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2012年12月至2015年12月沈阳市第九人民医院收治的结肠癌患者80例为研究对象，均经病理组织活检确诊，且预计生存时间在3个月以上，均接受手术治疗并留取术中标本送病理检查，排除合并全身多处转移、严重心、肺功能障碍、严重肝肾功能障碍、凝血功能障碍、精神疾病者、预计生存时间1个月以内者及拒绝参加本研究者；所有患者均签署了知情同意书，并经医院伦理委员会审核批准。其中男25例，女15例，年龄35～60岁，平均（45.2±2.6）岁；分化程度：高中分化40例，低分化40例；淋巴结转移：存在淋巴结转移40例，无淋巴结转移40例；TNM分期：Ⅰ+Ⅱ期40例，Ⅲ+Ⅳ期40例。

1.2 方法 所有患者标本均采用免疫组化SP法进行检测，且均严格按照说明书进行操作，试剂盒购自北京中杉生物技术公司，其中兔抗人RGC-32多抗（浓度1:100）购自Santa Cruz公司，设立RGC-32强阳性者为阳性对照组，使用PBS缓冲液者为阴性组。通过双盲法进行实验，并选取每张病理切片中的5个高倍视野，由具有5年以上病理诊断经验的病理医师观察。

1.3 判断标准 无染色为0分，浅黄色染色为1分，棕黄色染色为2分，棕褐色染色为3分。如未见细胞质或细胞核中有棕黄色颗粒者为无阳性细胞，标记为0分；细胞质或细胞核中棕黄色颗粒＜10％者标记为1分；细胞质或细胞核中棕黄色颗粒10％～50％者为2分；细胞质或细胞核中棕黄色颗粒＞50％者为3分。以上两者的乘积＞2分则视为RGC-32阳性，否则评定为阴性。

1.4 统计学分析 采用SPSS 17.0统计软件进行数据处理，计量资料以±s表示，组间比较采用t检验，计数资料以百分率表示，组间比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同肿瘤分化程度RGC-32阳性情况比较 高中分化患者RGC-32乘积积分及RGC-32阳性率均低于低分化患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 不同肿瘤分化程度RGC-32阳性情况比较

2.2 是否存在淋巴结转移者RGC-32阳性情况比较 存在淋巴结转移患者RGC-32乘积积分及RGC-32阳性率均低于无淋巴结转移患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 是否存在淋巴结转移者的RGC-32阳性情况比较

2.3 不同TNM分期RGC-32阳性情况比较 TNM分期Ⅰ+Ⅱ期患者RGC-32乘积积分及RGC-32阳性率低于TNM分期Ⅲ+Ⅳ期患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 不同TNM分期RGC-32阳性情况比较

3 讨论

城市男性结肠癌的发病率更高，在全球范围内每年约新增100万结肠癌患者，其中约50％的患者死亡。目前，结肠癌的基本病因尚未阐明[7]。流行病学研究发现，结肠癌发病可能与摄入高脂肪、高热量食物有关[8]。早期结肠癌主要以手术治疗为主，晚期结肠癌多以化疗、放疗、生物疗法等综合保守治疗为主。导致结肠癌患者死亡的最关键原因是肿瘤转移，故如何做到早诊断、早治疗是提高其临床疗效的关键[9]。近年，关于RGC-32与恶性肿瘤的相关性逐渐成为肿瘤研究的重点及热点，越来越多的基础研究提示，RGC-32是一种多肿瘤相关性原癌基因，其体内表达与多种实体肿瘤发病存在相关性[10]。RGC-32阳性对肿瘤细胞的生长繁殖起到双重效应，其在正常表达时具有一定抑制肿瘤细胞生长的作用，一旦发生异常表达则会显著促进肿瘤细胞的增殖与生长，进而激活肿瘤细胞无序增殖与分化，其在恶性肿瘤的发生繁殖中具有十分重要的作用[11]。

既往研究证实，RGC-32在结肠、前列腺、膀胱及乳腺的恶性肿瘤中均存在显著阳性表达[12]。Guo等[13]采用RNA逆转录技术于体外行肺癌细胞培养发现，RGC-32阳性肺癌细胞的分化及增殖速度显著加快，侵袭性增强，同时发现此类肿瘤细胞的细胞周期分化停滞，细胞凋亡显著增加，故证实RGC-32可参与肺癌的发生及发展，进而为肺癌的临床治疗提供新的思路。RGC-32在乳头状瘤及导管上皮不典型增生等乳腺癌的癌前病变组织中呈明显阳性表达，且在乳腺乳头状瘤及导管上皮不典型增生患者中表达水平显著高于正常乳腺组织，尤其在晚期乳腺癌恶性肿瘤细胞中，RGC-32的表达水平显著高于癌前病变组织及早期乳腺癌恶性肿瘤细胞，故认为RGC-32与乳腺癌的发病存在相关性。尽管RGC-32在多种恶性肿瘤细胞中呈阳性表达，且在肿瘤的发生及发展中发挥极其重要的作用，但目前对于结肠癌与RGC-32之间的相关性研究较少。

本研究发现，高中分化者RGC-32乘积积分及RGC-32阳性率均低于低分化者，差异有统计学意义；存在淋巴结转移者RGC-32乘积积分及RGC-32阳性率均低于无淋巴结转移者，差异有统计学意义；TNM分期Ⅰ+Ⅱ期患者RGC-32乘积积分及RGC-32阳性率低于TNM分期Ⅲ+Ⅳ期患者，差异有统计学意义。上述结果均提示RGC-32在结肠癌中的表达水平是影响肿瘤分化程度、TNM分期及是否存在淋巴结转移的重要影响因素，RGC-32表达阳性者，其肿瘤分化程度相对较低、容易出现淋巴结转移且肿瘤分期一般较晚，与Guo等[13]的研究结果相似。因此，RGC-32可以作为结肠癌患者预后的预测指标及靶向治疗新突破。

[1] 夏祥伟,茅国新.RGC-32和ZEB1在胃癌组织中的表达[J].肿瘤基础与临床,2015,28(3):193-197.

[2] 汪再炎,丁百静.RGC-32在结肠癌组织中的表达及临床意义[J].临床与病理杂志,2015,35(11):1958-1961.

[3] 黎思毅,彭红娟.RGC-32在大鼠主动脉损伤后的表达[J].吉林医学,2016,37(1):5-8.

[4] 尚超,张佳星,陈秀秀,等.RGC C基因在胃癌组织中的表达及其意义[J].山东医药,2016,56(16):77-79.

[5] 宁昌,陈文伟,黎燕,等.补体系统与肿瘤的关系研究进展[J].国际药学研究杂志,2014,41(5):516-521.

[6] Cui XB,Luan JN,Chen SY.RGC-32 deficiency protects againsthepatic steatosis by reducing lipogenesis[J].J Biol Chem,2015,290(33): 20387-20395.

[7] 徐然,赵俊刚,石文君.RGC32与转化生长因子β1在肺腺癌细胞增殖过程中调控关系的研究[J].现代肿瘤医学,2014,22(5):1009-1011.

[8] 张琪琪,张志强,温浩,等.利用基因芯片技术筛选食管癌细胞侵袭转移的相关分子靶标[J].中国老年学杂志,2015,35(4):2148-2152.

[9] 许琮,夏超,张淑娟,等.盐霉素对胰腺癌细胞体外增殖及迁移能力的影响[J].世界华人消化杂志,2015,23(24):3831-3837.

[10] 朱亮,赵秋,李德民,等.过表达RGC-32对胰腺癌Bx PC-3细胞增殖、凋亡的影响[J].胃肠病学和肝病学杂志,2014,23(11):1347-1350.

[11] 陆丽峰,苏波,姜浩,等.二烯丙基二硫对人胃癌MGC803细胞G2/M期检查点Chkl与Chk2的影响[J].中国药理学通报,2013, 29(1):79-84.

[12] Kruszewski AM,Rao G,Tatomir A,et al.RGC-32 as a potential biomarker of relapse and response to treatment with glatiramer acetate in multiple sclerosis[J].Exp Mol Pathol.2015,99(3):498-505.

[13] Guo S,Philbrick MJ,An X,et al.Response gene to complement 32 (RGC-32) in endothelial cells is induced by glucose and helpful to maintain glucose homeostasis[J].Int J Clin Exp Med,2014,7(9): 2541-2549.

辽宁省沈阳市第九人民医院病理室，辽宁沈阳 110024