肖兵南，高中文，李剑锋，蒋小文

（1湖南民康生物技术研究所，湖南长沙410022；2.湖南省宁乡县畜产品检测中心，湖南宁乡410600）

两种鼠血清与两种培养基对PK15细胞培养的比较

肖兵南1，高中文1，李剑锋2，蒋小文1

（1湖南民康生物技术研究所，湖南长沙410022；2.湖南省宁乡县畜产品检测中心，湖南宁乡410600）

为比较研究DMEM培养基和RPM I-1640培养基对PK15细胞的培养效果，选择效果好的作为基础培养基，用大鼠血清和小鼠血清分别以不同量添加进行培养，用细胞显微病变（CPE）观察法和四甲基偶氮唑盐(MTT)测定法测定其对细胞生长的影响，为血药试验选择试验动物提供依据。结果表明：DMEM培养基较RPM I-1640培养基对PK15细胞的培养效果好，加5％大鼠血清或2.5％小鼠血清配制DMEM培养基的培养，对PK15细胞的培养生长无副作用，即两种血清的无毒安全浓度分别为5％和2.5％。

鼠血清；培养基；DMEM；RPM I-1640；PK15细胞；培养

用含药血清进行体外试验时,经常会遇到选择何种试验动物的问题，原则上首先要使体外培养细胞在该种动物血清中生长良好、形态正常,对照组血清质量稳定,并且血清添加量能够比较高[1]。猪肾上皮细胞PK15，来源于猪肾，正常的细胞形态为上皮样，贴壁生长。PK15细胞对多种病毒比较敏感，如猪圆环病毒（PCV）、猪细小病毒（PPV）、猪瘟病毒（CSFV）等，可应用于猪圆环病毒疫苗、猪细小病毒疫苗、猪瘟病毒疫苗等的制备，在科研中被广泛使用，其优点是它的遗传稳定，营养要求较低，可使用多种培养基，易培养、易保存[2,3]。为此，本试验选用无血清培养基DMEM和RPMI-1640对PK15细胞作比较培养试验，筛选出效果好的作基础培养基，再添加大鼠和小鼠两种常用试验动物的血清，配制不同浓度的鼠血清培养基对PK15进行培养试验，测定其对PK15细胞生长的影响，为血药试验选择试验动物提供依据。……