培养细胞体系中槐定碱抗EV71病毒的作用
2017-01-09欧阳刘健魏昌瑛
欧阳刘健,魏昌瑛
(杭州第二中学高三611班(实验班),浙江 杭州 310053)
培养细胞体系中槐定碱抗EV71病毒的作用
欧阳刘健,魏昌瑛△
(杭州第二中学高三611班(实验班),浙江 杭州 310053)
探究槐定碱抗EV71病毒的作用,为防治手足口病提供线索。在体外培养的Vero细胞体系中加入槐定碱,用MTT法检测其细胞毒性;在病毒感染的不同时期用槐定碱处理,用MTT法检测细胞存活率、细胞病变等指标,表征其对EV71病毒吸附、穿入的抑制作用及直接杀灭作用;用RT-PCR法检测其对于病毒RNA复制的抑制作用。(1)槐定碱具有一定细胞毒性,其CC50为1.414mg/mL;(2)能够抑制病毒对Vero细胞的感染,其IC50=0.354mg/ mL;(3)其机制可能是抑制病毒的吸附和RNA复制,但对病毒穿入的抑制作用较弱。槐定碱可抑制病毒吸附和病毒增殖,在病毒感染前后用药效果都较好,且有效浓度远小于其CC50值,作为防治手足口病药物的开发潜力较大。
Vero细胞,槐定碱,抑制,EV71病毒。
1 概述
手足口病 (Hand,foot and mouth disease,HFMD)是一种常见的病毒性传染病,易感人群多为学龄前儿童,尤以3岁以下发病率最高[1]。肠道病毒71型(enterovirus71,EV71)可感染T淋巴细胞、人血管内皮细胞和神经细胞,触发细胞凋亡[2~4],引起持续高热,导致中枢神经系统疾病及并发症[5],致残和死亡率较高[6],是造成HMFD疾病的主要病原体[7]。因此引起全球广泛关注。
EV71是单股正链RNA病毒,属于小RNA病毒科肠道病毒属A组[8]。该病毒侵染细胞时,首先与细胞上的受体(CD55等)结合,吸附在细胞膜上并脱去蛋白质衣壳,其RNA基因组进入细胞,并立即进行蛋白的翻译加工,产生成为新的衣壳蛋白;……
