王有昆, 刘 萍, 李吉涛, 李 健



脊尾白虾C-型凝集素基因cDNA全长的克隆和表达分析

王有昆1, 3, 刘 萍1, 2, 李吉涛1, 2, 李 健1, 2

(1. 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业可持续发展重点实验室, 山东青岛 266071; 2.青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室, 山东青岛 266071; 3.上海海洋大学水产与生命学院, 上海 201306)

本研究利用本实验室构建的脊尾白虾()血细胞cDNA文库中的C-型凝集素基因EST序列, 采用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA end, RACE)技术克隆获得脊尾白虾C-型凝集素基因cDNA全长, 命名为。该基因全长1285 bp, 包含1041 bp的开放阅读框, 编码346个氨基酸组成的蛋白质, 分子量为38.56 kDa, 为甘露糖型凝集素。同源性分析表明, 脊尾白虾基因氨基酸序列与秀丽白虾()的同源性最高, 达到91％。荧光定量PCR分析结果表明,基因在血细胞、肝胰腺、肌肉等组织中均有表达, 其中在肝胰腺当中的相对表达量最高。感染鳗弧菌()和白斑综合症病毒(white spot syndrome virus, WSSV)后6~12 h, 脊尾白虾血细胞和肝胰腺中的表达量较对照组均显著增加(<0.05), 且具有明显的时间差异性。本研究证明脊尾白虾C-型凝集素在其免疫反应中起到重要作用, 为进一步探索脊尾白虾免疫系统打下基础。

脊尾白虾(); C-型凝集素; 基因克隆; 基因表达

凝集素是具有凝集血细胞作用的一类蛋白。根据其结构特征及特异性结合基序不同, 动物凝集素被分为: L-型凝集素、P-型凝集素、C-型凝集素、I-型凝集素、R-型凝集素、半乳糖结合凝集素(Galectin)和钙连蛋白(Calnexin)。在机体对病害的免疫防御过程中, 凝集素具有识别、黏附, 调理, 促吞噬等生理生化功能[1-3], 在无脊椎动物的免疫系统中更是起到极其重要的作用。C-型凝集素因其钙离子依……