李博 马俊 贺欢 王丽萍 许鸣

·基础研究论著·

肝星状细胞对肝癌细胞株MHCC-LM3上皮间质转化的影响

李博 马俊 贺欢 王丽萍 许鸣

目的 探讨肝星状细胞LX-2对肝癌细胞株MHCC-LM3上皮间质转化(EMT)的影响。方法 制备肝星状细胞LX-2上清，用LX-2上清和MHCC-LM3共培养(实验组)，以单独培养的MHCC-LM3为对照(对照组)，比较2组的肝癌细胞形态学、侵袭能力、EMT相关的上皮标记物E-钙黏蛋白(E-cadherin)及间质标记物波形蛋白Vimentin蛋白表达的变化。结果 与对照组相比，实验组的肝癌细胞MHCC-LM3形态拉长，细胞间连接变得疏松。Transwell实验显示，实验组在共培养12、24、48 h的侵袭细胞数均比对照组增多(P均<0.01)；随着培养时间的延长，实验组的侵袭细胞也随之增多(P均<0.01)。实验组MHCC-LM3细胞在共培养24、48 h时的E-cadherin蛋白表达水平均低于对照组细胞(P均<0.01)，在共培养12、24、48 h时的Vimentin蛋白表达水平均高于对照组(P均<0.01)。结论 肝星状细胞能够促进肝癌细胞株MHCC-LM3的EMT过程，增强其侵袭能力。

肝癌；肝星状细胞；上皮间质转化

我国肝癌的病死率在所有恶性肿瘤中仅次于胃癌、肺癌，位列第三。肝癌的远期疗效不佳，转移率非常高，因而研究肝癌的发病、转移机制对改善其预后有着重要意义。肝癌的发生和转移不仅与其所在组织的结构、代谢和功能有关，还与肝癌细胞所处的微环境，即癌细胞、细胞因子、多种基质细胞、趋化因子等组成的微环境有关[1]。肝星状细胞是肝癌微环境的重要间质细胞，活化的肝星状细胞能够分泌多种细胞因子影响肝癌细胞微环境，促进肝癌的发生和发展[2]。本研究通过建立体外永生化人肝星状细胞株LX-2上清与人肝癌细胞株MHCC-LM3的共培养模型, 观察共培养后MHCC-LM3细胞的形态转变以及MHCC-LM3侵袭能力及其上皮间质转化(EMT)相关标记物的表达变化，初步探讨肝星状细胞对肝癌细胞株MHCC-LM3 EMT的影响。

材料与方法

一、材 料