蜂蜜中蛋白质及氨基酸含量的测定
2016-12-27宋凤艳周超君
◎ 宋凤艳,周超君
(韩山师范学院生命科学与食品科技学院,广东 潮州 521041)
蜂蜜中蛋白质及氨基酸含量的测定
◎ 宋凤艳,周超君
(韩山师范学院生命科学与食品科技学院,广东 潮州 521041)
分别采用考马斯亮蓝法和茚三酮显色法测定6个蜂蜜样品中的蛋白质和氨基酸含量。实验结果表明,100 g蜂蜜样品中,蛋白质和氨基酸的含量分别为0.044~0.391 g和0.031~0.055 g,表明不同蜂蜜样品中的蛋白质和氨基酸的含量各不相同。蜂蜜样品中蛋白质和氨基酸测定时的相对标准偏差分别为0.666%~6.447%和0.601%~1.306%,平行样品间的测定误差较小。
蜂蜜;氨基酸;蛋白质;茚三酮;考马斯亮蓝
蜂蜜是蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露,与自身分泌物结合后酿造而成[1]。蜂蜜富含糖类、蛋白质、氨基酸、维生素、有机酸、花粉和微量元素等[2]。本文测定部分蜂蜜样品的蛋白质及氨基酸含量,分析蜂蜜的产品质量。
1 材料与方法
1.1 实验材料
蜂蜜成品:野菊花蜜(样品1,浙江衢州),山野百花蜜(样品2浙江衢州),龙眼蜜(样品3,广东潮州),荔枝蜜(样品4,广东潮州),冬蜜1(样品5,广东潮州),冬蜜2(样品6,广东潮州)。均购自蜂场或店铺。
1.2 主要试剂
牛血清白蛋白(AR),考马斯亮蓝G-250(AR),95%乙醇(AR),磷酸(AR),茚三酮(AR),氯化亚锡(AR),磷酸二氢钾(AR),磷酸氢二钠(AR),谷氨酸(AR)。
1.3 主要仪器
751紫外分光光度计,HH-4数显恒温水浴锅,90-3型双向定时恒温磁力搅拌器。
1.4 实验方法
(1)绘制蛋白质标准曲线。吸取1 mg/mL牛血清白蛋白溶液0、0.02、0.04、0.06、0.08 mL和0.1 mL,分别置于6支试管中,各加水至0.1 mL,再加入5 mL考马斯亮蓝G-250溶液(考马斯亮蓝G-250 100 mg溶于50 mL的95%乙醇,加入85%磷酸100 mL,蒸馏水定容到1 000 mL),室温放置2 min,测定吸光度值(595 nm),绘制标准曲线并求回归方程[3]。……
