彭治桃,蒋国民,邹 利,李金龙,程小飞,房丽娟,王晓清,刘 丽1,

(1.湖南农业大学 动物科学技术学院，中国 长沙 410128；2.湖南省水产原种场，中国 长沙 410153;3.湖南省水产科学研究所，中国 长沙 410153; 4.中南大学基础医学院，中国 长沙 410012)



锦鲫Clock基因表达量分析中的内参基因稳定性比较

彭治桃1,2,蒋国民3,邹 利3,李金龙3,程小飞3,房丽娟4,王晓清1*,刘 丽1,3*

(1.湖南农业大学 动物科学技术学院，中国 长沙 410128；2.湖南省水产原种场，中国 长沙 410153;3.湖南省水产科学研究所，中国 长沙 410153; 4.中南大学基础医学院，中国 长沙 410012)

为研究锦鲫Clock基因表达量分析中的内参基因稳定性，采用qRT-PCR技术进行实时荧光定量分析，并用Ge Norm 和 Norm Finder软件对5个内参基因(RPL13，GAPDH，18SrRNA，β-actin和RPS29)进行稳定性评估，筛选出不同组织中最适合的内参基因，以准确定量Clock基因的相对表达水平.实验结果表明，5个内参基因中，18SrRNA在锦鲫的肌肉、心脏、肝脏中表达最稳定，β-actin在肠中表达最稳定，RPL13在肾中表达最稳定；根据筛选的内参基因定量Clock基因的相对表达水平发现，Clock基因在锦鲫肌肉中相对表达量最高，其次依次是肝脏、肾、肠，心脏中最低.本研究准确定量Clock基因, 为锦鲫生物钟节律机制的下一步研究奠定了理论基础.

内参基因；qRT-PCR；锦鲫；Ge Norm程序；Norm Finder程序

实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术因具有灵敏度高、重复性好以及定量准确等优点，被广泛用于生物科学的各个研究领域.但这一技术能否准确定量取决于很多因素，如实验材料质量、RNA质量、cDNA第一链合成效率及内参基因的选择[1].其中，选择合适的内参基因对试验数……