朱慧果，严 利，王 佳

(湖南省人民医院湖南省老年医学研究所，中国 长沙 410016)



NMDA干预下Rab30在PC12细胞中的表达及凋亡通路

朱慧果，严 利，王 佳*

(湖南省人民医院湖南省老年医学研究所，中国 长沙 410016)

探讨兴奋毒性氨基酸(NMDA)损伤干预下Rab30在PC12细胞中的表达及其凋亡通路，发现NMDA干预可能通过下调Rab30和GM130的表达，使高尔基体结构破裂成片，并可能通过上调GAAP和Caspase-3的表达，诱导PC12细胞的凋亡和死亡.

PC12细胞；Rab30；神经退行性疾病；兴奋毒性氨基酸；凋亡

高尔基体(Golgi apparatus，GA)在神经退行性疾病病理条件下和各种损伤机制(兴奋毒性氨基酸、钙超载、炎症因子、氧自由基等)下会出现应激反应，其结构发生变化，甚至发生碎裂[1-3].Rab30作为一种重要的调节型的运输蛋白，参与维持非神经细胞高尔基体结构完整[4]，可能参与损伤机制下神经细胞高尔基体碎裂的调控，从而导致神经元丧失.本研究对PC12细胞进行兴奋氨基酸毒性(NMDA)损伤干预，并借助细胞培养技术、MTT法检测PC12细胞存活率、Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡、Western-blot法检测目的蛋白表达情况等实验技术，从细胞及分子水平研究NMDA干预下Rab30在PC12细胞中的表达并探讨其凋亡通路.本研究希望为神经退行性疾病的病因及病理机制提供理论和实践依据，进而为神经退行性疾病药物治疗提供新的靶点.

1 实验材料与试剂

PC12细胞株(购自中国科学院上海细胞生物研究所)；1640培养基(Hyclone)，胎牛血清和胰酶消化液(Gibco)，青-链霉素溶液(碧云天)，NMDA 和MTT(Sigma)，Rab30(ORIGENE)，GAAP和GM130(Proteintech)，Caspase-3(CST)，Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡(长沙维尔生物有限公司)，BCA蛋白定量试剂……