李春甫，齐 山*，王长宏，王 璞

(1.吉林大学中日联谊医院中医科，长春 130033；2.吉林大学临床医学院2013级，长春 130033)



自拟消癖汤治疗雄性大鼠乳腺增生实验研究

李春甫1，齐 山1*，王长宏1，王 璞2

(1.吉林大学中日联谊医院中医科，长春 130033；2.吉林大学临床医学院2013级，长春 130033)

目的 观察自拟消癖汤对雄性大鼠乳腺增生的治疗效果，以指导男性乳房肥大症的治疗作用研究。方法 腹腔注射给予苯甲酸雌二醇(1.0mg/kg)，1次/d，连续20d，以复制雄性大鼠乳腺增生模型。60只SPF级Wistar雄性大鼠随机均分为正常对照(等溶生理盐水)组、模型(等溶生理盐水)组、三苯氧胺(1.8mg/kg)组、自拟消癖汤低、中、高(2.5、5、7.5mL/kg)剂量组，各组大鼠均于复制模型结束后腹腔注射给药,2次/d，连续30d。采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠血清雌二醇(E2)、睾酮(T)的水平，观察大鼠乳腺组织结构变化，对比评价疗效。结果 与正常对照组比较，模型组乳腺增生明显，血清E2增加,血清T含量减少；差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较，三苯氧胺组与自拟消癖汤低、中、高剂量组大鼠乳腺增生均有不同程度减轻，血清E2水平降低，血清T水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)；与三苯氧胺组比较,自拟消癖汤高剂量组大鼠血清E2水平降低,血清T水平升高,乳腺组织增生程度明显减轻，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 自拟消癖汤对雄性大鼠乳腺增生有明显的抑制作用，疗效显著。

自拟消癖汤；雄性大鼠；乳腺增生

男性乳房肥大症指男性乳腺腺体组织良性增厚、呈妇乳样改变，是最为常见的男性乳腺疾病[1-3]。现代医学对未达到手术指征者多采用抗激素药物治疗，毒副作用较大，停药后复发概率高，对已达手术指征者采取手术[4]治疗，但术后并发症又是困扰患者及医生的一大难题[5]，风险较大。本实验[6]观察自拟消癖汤对雄性大鼠乳腺增生的治疗效果，为男性乳房肥大症的治疗提供实验依据。

1 材料与方法

1．1 材料

1．1．1 动物 SPF级Wistar雄性大鼠48只，体质量240～260 g，2月龄。由吉林大学白求恩医学部动物实验中心提供，编号：SCXK(吉)2011-0016。

1．1．2 药品 苯甲酸雌二醇注射液(杭州动物药品厂，批准文号:兽用字(2011)110302441)，浓度:2 mg/mL。三苯氧胺片(宁波天衡制药有限公司，批号：110621，规格：10 mg/片，60片)。自拟消癖汤(柴胡15 g，枳壳10 g，陈皮15 g，香附10 g，川芎15 g，赤芍15 g，穿山甲7．5 g，荔枝核15 g，王不留行15 g，三棱10 g，莪术10 g，菟丝子15 g，山楂15 g，甘草10 g)，冷水浸泡2 h，常规2煎，2次水煎液混合并滤过，约30 mL。

1．1．3 试剂 雌二醇放免药盒(体外诊断试剂)(天津九鼎医学生物工程有限公司，国药准字S10950184)。睾酮放免药盒(体外诊断试剂)，天津九鼎医学生物工程有限公司，国药准字S10940111。

1．1．4 仪器 高速冷冻离心机(天津久圣永康实验设备有限公司)，生物组织自动包埋机(德国美康公司)，旋转式薄片切片机(德国美康公司)，显微镜(日本奥林巴斯株式会社)。其他：电子秤、帆布手套、橡胶手套、口罩、帽子、镊子、剪刀、刀片、载玻片、盖玻片、注射器、包埋盒、染色剂、操作台、灌胃针等。

1．2 方法

1．2．1 分组及给药 大鼠自由摄食饮水，室温控制在20～25 ℃，相对湿度40%～60%，饲养1周，将大鼠随机分为对照组、模型组、三苯氧胺组和自拟消癖汤低、中、高剂量组，每组10只。腹腔注射给予苯甲酸雌二醇(1．0 mg/kg)，1次/d，连续20 d，以复制雄性大鼠乳腺增生模型[7]。对照组正常饲养,注射等溶生理盐水连续50 d；模型组复制模型后连续注射等溶生理盐水20 d；余各组大鼠均于复制模型结束后腹腔注射给药，2次/d，连续30 d[8]。

1．2．2 检测项目 将6组大鼠分别经1%戊巴比妥钠按40 mg经腹腔注射麻醉后，从心脏中抽取2 mL血液，3 000 r/s离心，取上层血清，应用放免分析法测定血清中雌二醇(E2)、睾酮(T)的含量；再用脱颈椎方法处死所有大鼠，观察腹部皮肤高度，取下腹部皮下与肌肉间组织，用10%福尔马林液固定，石蜡包埋、切片，HE染色，在光镜下观察，做病理分析。参照宋爱莉等[9]乳腺增生病理诊断标准分为4类。无增生：乳腺小叶不增生，腺体数量极少，腺泡不扩张，处于静止期状态。轻度增生:个别腺泡有轻度增生，无扩张，腺泡及导管内有分泌物。中度增生：乳腺小叶大部分增生，少数腺泡有轻度扩张，腺上皮增生层次增多腺泡及导管内有分泌物。重度增生：乳腺小叶大部分增生，多数腺泡有明显扩张，腺上皮增生层次增多，腺泡及导管内有较多分泌物。

2 结果

2．1 各组生化指标变化比较 见表1。

表1 各组大鼠性激素变化比较

注:与对照组比较，#P<0．05；与模型组比较，△P<0．05；与中药高剂量组比较，▲P<0．05

2．2 各组病理变化比较 与对照组比较，模型组大鼠乳腺标本都有腺泡数量明显增加，上皮增生呈假复层现象，严重者甚至堵塞导管，导管扩张，内含大量分泌物，周围反应性间质明显减少，染色变深，胶原增生，失去疏松状态；中药低、中剂量组与三苯氧胺组腺泡较模型组相比虽均有不同程度的减轻，但仍有半数以上乳腺标本腺泡数量明显增加，导管扩张明显，内含较多分泌物，周围结缔组织较正常乳腺组织减少。与中药低、中剂量及三苯氧胺组相比，中药高剂量组大鼠小叶数、平均腺泡数、腺泡直径明显减小，腺腔内分泌物明显减少。增生程度见表2。

表2 各组大鼠乳腺组织增生程度结果(n=10)

注:与三苯氧胺组及中药低、中剂量组比较，#P<0．05

3 讨论

男性乳房肥大症[10-12]，中医病名为“乳癖”“乳疠”。陈实功在《外科正宗·乳痛第二十六论》中总结：“男子乳疾与妇人微异，女损肝胃，男损肝肾，盖怒火房欲过度，以致肝虚血燥，肾虚精亏，血脉不得上行，肝经无以荣养，遂结肿痛”，中医学在治疗乳腺增生根据辨证论治,但对乳腺增生的分型尚未统一,治疗方法也不尽相同[13-14]。男子乳疾与女子乳疾病因与病机存在差异，男性乳疾与肝、肾有密切关系。故肾虚肝郁为发病之本，气滞、痰凝、血瘀为发病之标。而男性乳房肥大症又为男性乳腺疾病中最常见的，故男性乳房肥大症的发病与肝、肾的关系密切，所以治疗指向也离不开肝、肾两脏，治本当疏肝、补肾，治标当行气导滞、活血化瘀、祛痰散结。自拟消癖汤为主，在治疗上以疏肝理气，补益肝肾为本病治则，兼见化瘀、散结、祛痰之功效，本方应用柴胡、陈皮、香附、枳壳疏肝解郁，理气行滞；川芎乃“血中之气药”，行活血行滞之功；三棱长于破血中之气，以破血通经，莪术善破气中之血，以破气消积，二药伍用，气血双施，活血化瘀、行气止痛、化积消块力彰；穿山甲活血散结、消痈溃坚，有“走窜十二经”之功；王不留行奏活血、通经、消肿之效；赤芍清热凉血、散瘀止痛；荔枝核行气散结；菟丝子补肾益精；佐山楂行气散瘀，数药配伍共奏疏肝散结、导滞化癖之功，疗效颇佳。

本实验由于条件限制，未深入研究药代动力学、毒理学等研究，将在今后的实验研究中进一步完善。

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Self designed Xiaopi decoction on treating hyperplasia of mammary gland in male rat

LI Chunfu1,QI Shan1*,WANG Changhong1,WANG Pu2

(1.Department of Traditional Chinese Medicine,Sino-Japanese Union Hospital of Jilin University,Changchun 130033,China;2.Clinical Medical College,Jilin University,Changchun 130033,China)

Objective To observe the therapeutic efficacy of self designed Xiaopi decoction on hyperplasia of mammary gland in the male rats,to guide the therapeutic study on treatment of male breast hypertrophy.Methods The formation of mammary gland hyperplasia by ip estradiol benzoate(1.0mg/kg),twice a day for 20 d.Sixty SPF Wister male rats were divided into normal control group(isovolumic normal saline),model group(isovolumic normal saline),tamoxifen group(1.8 mg/kg),and self designed xiaopi decoction low,medium and high dose groups (2.5，5，7.5 mL/kg).The groups were given ig administration,once a day for 30 d.The concentrations of rats serum estradiol(E2)and testosterone(T)were detected by ELISA.Observe the changes of mammary gland organization structure and compare the curative effects.Results Compared with the normal control group,model group,the concentrations of serum E2was increased and T was reduced.The differences were statistically significant(P<0.05).Compared with the model group,the degree of mammary gland hyperplasia in rats have reduced which in tamoxifen group and self designed Xiaopi decoction low,medium and high dose groups to some extent,the concentrations of serum E2was decreased and Serum T was increased,there was statistical significant difference(P<0.05).Compared with the tamoxifen group,the concentrations of serum E2was decreased and Serum T was increased in self designed Xiaopi decoction high dose groups,the degree of mammary gland hyperplasia in rats have reduced obviously,there was statistical significant difference(P<0.05).Conclusion The self designed Xiaopi decoction has significant curative effect on hyperplasia of mammary gland in the male rats.

self designed Xiaopi decoction;male rats;hyperplasia of mammary gland

10.13463/j.cnki.cczyy.2016.06.009

吉林大学科技立项项目“自拟消癖汤对乳腺增生的治疗作用研究”(3R211A683430)。

李春甫(1990-)，女，硕士研究生，主要从事中西医结合治疗月经不调。

R

A

2095-6258(2016)06-1126-03

2015-11-26)

*通信作者：齐 山,副教授,副主任医师,硕士研究生导师,电话-13514465973,电子信箱-qishan1968@163.com