Ca(ClO)2消毒剂对高羊茅种子的消毒效果
2016-12-21文昭竹龚梨霞张志飞
尚 丹,文昭竹,龚梨霞,穆 麟,张志飞,2*
(1 湖南农业大学农学院,长沙 410128; 2 湖南农业大学草业科学研究所,长沙 410128)
Ca(ClO)2消毒剂对高羊茅种子的消毒效果
尚 丹1,文昭竹1,龚梨霞1,穆 麟1,张志飞1,2*
(1 湖南农业大学农学院,长沙 410128; 2 湖南农业大学草业科学研究所,长沙 410128)
为研究Ca(ClO)2对高羊茅种子作为外植体诱导培养愈伤组织时的消毒效果,以3种不同的前处理方式配合Ca(ClO)2溶液不同浓度(3%、20%)和不同消毒时间(15、30、45、60 min)进行高羊茅种子消毒处理,以升汞消毒剂处理的高羊茅种子为对照。愈伤组织诱导培养结果表明:仅用Ca(ClO)2搅拌的前处理的感菌率显著高于其余两种前处理;Ca(ClO)2高浓度处理比低浓度处理的出愈率低;Ca(ClO)2处理的出愈率和愈伤总数均优于升汞处理;最佳的消毒组合是无菌环境下用Ca(ClO)2搅拌+3% Ca(ClO)2浸泡60 min,该消毒处理方式可降低种子感菌率、缩短出愈时间、提高出愈系数,为建立高羊茅高效再生体系奠定实验基础。
高羊茅;组织培养;消毒;次氯酸钙
高羊茅(FestucaarundinaceaSchreb)是多年生禾本科羊茅属(Festuca)草本植物,在我国广泛用于低成本的水土保持及草坪绿化[1]。基因工程是高羊茅遗传改良的重要方向,再生体系的建立是基因工程研究的基础。高羊茅茎尖培养[2],愈伤组织[3]、原生质体[4]、胚性悬浮培养细胞获得再生植株[5]和直接用高羊茅花药进行培养获得再生植株的研究已初具成效[6,7]。目前以种子为外植体诱导愈伤组织构建再生体系是高羊茅组织培养的主要方法。愈伤组织培养体系中防止污染是首要克服的问题,在保证熟练操作和提高培养室洁净度的前提下,外植体消毒方法成为影响愈伤组织诱导成功的关键因素[8]。……
