丁 利，代小梅，方振华，汪继超，史海涛

( 1. 海南师范大学 生命科学学院，海南 海口 571158；2. 海南职业技术学院 生物工程学院，海南 海口 570216 )

龟致病性维氏气单胞菌和鲍曼不动杆菌双重PCR检测方法的建立

丁 利1，代小梅1，方振华2，汪继超1，史海涛1

( 1. 海南师范大学 生命科学学院，海南 海口 571158；2. 海南职业技术学院 生物工程学院，海南 海口 570216 )

应用2对特异性引物，通过对反应条件和体系的优化，成功建立了能快速检测维氏气单胞菌和鲍曼不动杆菌两种病原的双重PCR方法。研究结果表明，该方法特异性强，仅对龟鳖维氏气单胞菌和鲍曼不动杆菌有扩增，而对其他龟鳖常见病原无扩增；该方法对维氏气单胞菌最低检测核酸质量浓度为1.75×10-3ng/μL，对鲍曼不动杆菌最低检测核酸质量浓度为3.96×10-3ng/μL，检出率较传统检测方法高。该研究所建立的双重PCR方法灵敏度高、特异性好，可为临床龟鳖维氏气单胞菌和鲍曼不动杆菌感染的诊断和流行病学调查等提供帮助。

维氏气单胞菌；鲍曼不动杆菌；双重PCR

维氏气单胞菌(Aeromonasveronii)属于弧菌科、气单胞菌属中近年来发现的新种，可以引起人的胃肠炎、脑膜炎、腹泻、菌血症等疾病[1-2]。近年来，越来越多的报道表明，其可感染水生动物并引发疾病，国内学者已从框镜鲤(Cyprinuscarpio)、中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)、日本沼虾(Macrobrachiumnipponense)和泥鳅(Misgurnusanguillicaudatus)等水生动物体内分离到具有较强致病性的维氏气单胞菌[3-7]。鲍曼不动杆菌(Acinetobacterbaumannii)是奈瑟氏球菌科、不动杆菌属中的一种革兰阴性球杆菌，该菌能通过多种方式感染人和其他动物[8-9]，目前研究发现，不动杆菌也存在于患病的水生动物体内[10-13]。……