李宗升，吴立新，李思萌，彭博文，赵博文

( 大连海洋大学 辽宁省水生生物学重点试验室，辽宁 大连 116023 )

鸡肉粉替代鱼粉对大菱鲆生长和体组成的影响

李宗升，吴立新，李思萌，彭博文，赵博文

( 大连海洋大学 辽宁省水生生物学重点试验室，辽宁 大连 116023 )

以鸡肉粉替代饲料中0%、20%、40%、60%、80%的鱼粉，配制5种等氮等能饲料。选取初始体质量为(22.82±0.08) g的大菱鲆幼鱼180尾，随机分为5组(每组3个重复，每重复12尾)分别投喂一种饲料，试验周期为8周。试验结果表明，鸡肉粉替代鱼粉对大菱鲆幼鱼终末体质量、特定生长率、饲料系数以及质量增加率产生显著影响(P<0.05)。鸡肉粉替代鱼粉对大菱鲆幼鱼鱼体水分、粗蛋白、灰分、能量含量未造成显著影响(P>0.05)，鸡肉粉替代组粗蛋白含量比对照组略微升高，粗脂肪含量比对照组显著降低(P<0.05)，鸡肉粉替代组之间的粗脂肪含量无显著差异(P>0.05)，但有升高的趋势。鸡肉粉替代40%鱼粉时，血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶活力显著高于对照组(P<0.05)。鸡肉粉替代鱼粉对肝脏谷丙转氨酶、谷草转氨酶活力影响显著(P<0.05)。鸡肉粉替代鱼粉对主要营养成分的表观消化率产生显著影响(P<0.05)。本试验结果表明，鸡肉粉替代20%的鱼粉对大菱鲆幼鱼生长最为有利。

大菱鲆幼鱼；鸡肉粉；鱼粉；替代；生长性能

在水产养殖业工厂化和集约化的发展趋势下，以鱼粉为主要蛋白源的肉食性鱼类饲料使用量迅速增长。鱼粉价格高，同时受过度捕捞的影响, 资源量的锐减已严重制约水产养殖业的发展，开发低成本、促生长的饲料对水产养殖业持续发展具有重要意义。鸡肉粉的蛋白质、能量含量高，且蛋白质消化率高[1]，具有产量高、价格低廉等优点，因此鸡肉粉替代鱼粉可有效缓解因鱼粉价格上涨导致的大菱鲆幼鱼饲料成本上涨的问题。鸡肉粉替代饲料鱼粉的可行性已被点带石斑鱼(Epinephelusmalabricus)[2-3]、状黄姑鱼(Nibeamiichthioides)[4-5]、革胡子鲇(Clariasgariepinus)[6]、异育银鲫(Carassiusauratusgibelia)[7]等验证。有研究认为，鸡肉粉可替代黑海菱鲆(Scophthalmusmaeoticus)25%的饲料鱼粉[8-9]，含有鸡肉粉混合动物蛋白源可使大菱鲆(S.maximus)幼鱼饲料鱼粉替代比例提高到35%[10]，鸡肉粉替代80%鱼粉对褐牙鲆(Paralichthysolivaceus)生长未产生影响[11]。

大菱鲆肉质鲜美，在中国北方广泛养殖，是一种重要的商业肉食性鱼类。笔者以鸡肉粉为单一蛋白源替代鱼粉，较为全面地研究了鸡肉粉替代鱼粉对大菱鲆生长性能和体组成的影响，以期为大菱鲆人工配合饲料的开发提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验饲料

以鱼粉、豆粕、面粉、鱼油等为原料，三氧化二铬为外源指示剂配制试验饲料，在基础饲料(全鱼粉组)基础上以鸡肉粉替代20%、40%、60%、80%的鱼粉，分别为鸡肉粉20组、鸡肉粉40组、鸡肉粉60组、鸡肉粉80组，配制以全鱼粉组为对照组的5种等氮(43.52±0.09)%等能(19.52±0.13) MJ/kg饲料(表1)。饲料原料粉碎后过60目网筛，按配比定量后混匀，用制粒机挤压成粒径为2 mm的颗粒饲料，自然风干后置于冰箱-20 ℃保存备用。

1.2 试验鱼与饲养管理

大菱鲆幼鱼取自大连天正实业有限公司，以基础饲料驯养2周。试验开始前，将鱼饥饿24 h，选取体质健康、规格均匀、体质量(22.82±0.08) g的试验鱼180尾，随机分为5组，分别为鸡肉粉20组、鸡肉粉40组、鸡肉粉60组、鸡肉粉80组和全鱼粉组。每组设3个重复，共15个水族箱(60 cm×45 cm×40 cm，实际水量90 L)，每个水族箱放入12尾鱼，养殖周期为8周。

以砂滤海水为水源，日换水1次，换水量为1/3～1/2。水温14.0～19.0 ℃，溶解氧>6.0 mg/L，氨氮<0.1 mg/L，pH 8.0～8.1，光照采用日光灯控制，周期为12 L∶12 D。每日饱食投喂2次(8:30和16:30)，投喂后约30 min收集残饵。每次投饵前用虹吸法收集粪便，以淡水冲洗静置20 min后放入相应自封袋，置于冰箱-20 ℃保存备用。

1.3 样品采集及分析

试验结束时将试验鱼饥饿24 h，将每箱鱼分别称量质量，并随机取3尾装于自封袋，置于-20 ℃冰箱中保存，用于体组成测定。每箱随机另取3尾，活体解剖取出肝脏，肝脏称量质量后装于自封袋中-80 ℃保存，用于谷丙转氨酶和谷草转氨酶的测定。

饲料、鱼体、粪便的常规营养成分测定参照AOAC[12]方法。水分含量通过在105 ℃烘箱烘至质量恒定测定；粗蛋白质含量用凯氏定氮仪(总氮×6.25)测定；粗脂肪含量采用索氏抽提法，以乙醚为抽提液测定；粗灰分含量通过在马福炉中550 ℃灼烧(8 h)测定；总磷含量采用钼黄比色法测定；三氧化二铬含量采用湿式化定量法测定；总能值用华德HDC6000自动量热仪测定。

肝脏中的谷草转氨酶、谷丙转氨酶均采用南京建成生物工程研究所试剂盒测定，组织匀浆液中蛋白质量浓度测定采用考马斯亮蓝染色法，所有测定均在24 h内完成。血清中谷草转氨酶、谷丙转氨酶送至大连体检中心进行测定。

表1 试验饲料配方及营养组成 %

注：复维复矿为每千克饲料提供：VD312.9 mg，核黄素 360.0 mg，视黄醇醋酸酯 32.0 mg，硫胺素 110.0 mg，生育酚 200.0 mg，生物素10.0 mg，泛酸 359.0 mg，烟酸 1026.0 mg，盐酸吡哆醇 86.0 mg，叶酸 20.0 mg，VB121.244 mg，肌醇 4000.0 mg，抗坏血酸 2000.0 mg，氯化胆碱(50%) 10000.0 mg, MgSO4·7H2O 5066.9 mg, KCl 3020.0 mg，CoCl240.0 mg, KAl(SO4)212.7 mg, ZnSO4·7H2O 253.0 mg, CuSO4·5H2O 10.0 mg, KI 8.0 mg, MnSO4·4H2O 73.2 mg, Na2SeO32.5 mg, C6H5O7Fe·5H2O 1632.0 mg, NaCl 100.0 mg, NaF 4.0 mg, Ca(H2PO4)·H2O 13000.0 mg.

1.4 计算公式

质量增加率/%= (mt-m0)/m0×100%

特定生长率/%·d-1=(lnmt- lnm0)/t×100%

饲料系数=md/(mt-m0)

蛋白质效率=(mt-m0)/(md×Cp)

饲料干物质表观消化率/%=(1-A/A′) ×100%

营养成分表观消化率/%=(1-B/B′×A/A′)×100%

式中，m0和mt分别为试验开始和结束时大菱鲆幼鱼的平均湿质量(g)，md为每条鱼平均摄入饲料干质量(g)，t为试验天数(d)，Cp为饲料蛋白质含量(%)，A为饲料中三氧化二铬含量(%)，A′为粪便中三氧化二铬含量(%)，B为粪便中营养物质含量(%)，B′饲料中营养物质含量(%)。

1.5 统计分析

试验结果以平均值±标准差表示。采用SPSS 19.0软件对数据进行单因素方差分析，若差异显著，则用Duncan氏法多重比较检验组间差异，显著水平α=0.05。

2 结 果

2.1 鸡肉粉替代鱼粉对大菱鲆幼鱼生长性能的影响

鸡肉粉20组的生长性能指标优于全鱼粉组。全鱼粉组与鸡肉粉20、鸡肉粉40组和鸡肉粉60组的终末体质量、特定生长率无显著差异，鸡肉粉80组终末体质量、特定生长率显著低于全鱼粉组(P<0.05)。全鱼粉组与鸡肉粉20的饲料系数无显著差异，但鸡肉粉20组的饲料系数更低，当鸡肉粉替代水平达到40%后饲料系数显著降低(P<0.05)。鸡肉粉20组的蛋白质效率最高且显著高于全鱼粉组(P<0.05)，鸡肉粉40组的蛋白质效率与全鱼粉组无差异，鸡肉粉60组和鸡肉粉80组的蛋白质效率显著低于全鱼粉组(P<0.05)。鸡肉粉20组的质量增加率显著高于全鱼粉组(P<0.05)，鸡肉粉40组与全鱼粉组的质量增加率无显著差异(P>0.05)，当鸡肉粉替代水平超过60%时质量增加率显著降低(P<0.05)(表2)。

2.2 鸡肉粉替代鱼粉对大菱鲆幼鱼体组成的影响

鸡肉粉替代配合饲料中鱼粉对大菱鲆幼鱼的鱼体水分、粗蛋白、灰分、能量含量未造成显著的影响。鸡肉粉替代后体组成中粗蛋白含量比全鱼粉组略微升高，鸡肉粉替代组内粗蛋白含量有下降趋势。鸡肉粉替代组粗脂肪含量与全鱼粉组相比显著下降(P<0.05)，鸡肉粉替代组之间无显著差异(P>0.05)，但有升高的趋势(表3)。

2.3 鸡肉粉替代鱼粉对大菱鲆幼鱼血清、肝脏谷丙转氨酶及谷草转氨酶活力的影响

鸡肉粉20组的血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶活力与全鱼粉组无差异，鸡肉粉40组的血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶活力显著升高(P<0.05)。鸡肉粉80组血清谷丙转氨酶活力与鸡肉粉60组无显著差异(P>0.05)，但显著高于其他各组(P<0.05)。鸡肉粉替代20%鱼粉后，各组肝脏谷草转氨酶活力均显著高于全鱼粉组(P<0.05)，鸡肉粉替代组内无显著差异(P>0.05)，但有升高趋势。鸡肉粉80组的肝脏谷丙转氨酶活力显著高于全鱼粉组(P<0.05)，鸡肉粉替代组内无显著差异(P>0.05)，鸡肉粉替代鱼粉对大菱鲆幼鱼血清、肝脏谷草转氨酶、谷丙转氨酶活力产生显著影响(P<0.05)(表4)。

2.4 鸡肉粉替代鱼粉对大菱鲆幼鱼营养物质表观消化率的影响

与全鱼粉组相比，鸡肉粉替代鱼粉使各种营养成分表观消化率明显下降。全鱼粉组与鸡肉粉20组粗蛋白表观消化率无差异，其他各组的粗蛋白消化率差异显著(P<0.05)。总磷的消化率显著降低，且各处理组之间均差异显著(P<0.05)。鸡肉粉20组和鸡肉粉40组的干物质、粗脂肪和能量的消化率无显著差异(P>0.05)，鸡肉粉60组和鸡肉粉80组的干物质消化率差异显著(P<0.05)，且显著低于全鱼粉组、鸡肉粉20组和鸡肉粉40组(P<0.05)。鸡肉粉60组和鸡肉粉80组的粗脂肪、能量的消化率无显著差异(P>0.05)(表5)。

表2 鸡肉粉替代鱼粉对大菱鲆幼鱼生长性能的影响

注：(1)表中所给的数据为平均数及3个重复数值的标准差.(2)同一列中平均数后不同的上标表示差异显著(P<0.05).其他表同.

表3鸡肉粉替代鱼粉对大菱鲆幼鱼体组成的影响(湿质量)

组别水分/%粗蛋白/%粗脂肪/%灰分/%能量/MJ·kg-1全鱼粉组76.73±0.1913.94±0.154.07±0.12b4.67±0.2118.50±0.36鸡肉粉2076.82±0.1314.34±0.133.64±0.01a4.53±0.0918.28±0.33鸡肉粉4076.30±0.2514.29±0.593.80±0.03a4.77±0.2818.33±0.11鸡肉粉6076.74±0.2014.20±0.093.83±0.01a4.52±0.0918.91±0.91鸡肉粉8076.22±0.1214.19±0.113.84±0.07a4.84±0.0618.86±0.15

表5 试验饲料营养成分的表观消化率 %

3 讨论

3.1 鸡肉粉替代鱼粉对大菱鲆幼鱼生长性能和体组成的影响

鸡肉粉替代鱼粉对鱼类生长性能的影响，不同的试验得到的结果也不同。一些研究表明，鸡肉粉[3,8-9]直接替代20%～50%的鱼粉不会抑制鱼类的生长，另有研究认为，鸡肉粉更高比例替代鱼粉对鱼类生长无显著影响[2,4]，这可能与不同鸡肉粉营养成分存在差异及鱼类对鸡肉粉适应和消化能力不同有关。

本试验与Yigit等[8-9]的研究在蛋白替代源和试验鱼类均具有较高的相关性。生长性能的试验结果显示，鸡肉粉替代20%鱼粉时，大菱鲆幼鱼生长性能指标均优于对照组，这说明鸡肉粉替代20%鱼粉有利于大菱鲆幼鱼的生长，这与Yigit等[8-9]的结论类似。鸡肉粉替代40%的鱼粉时大菱鲆幼鱼大部分生长性能指标与对照组无差异，但饲料系数显著升高，这与Turker等[9]的研究结果类似，而Yigit等[8]的相同试验结果出现在替代水平为75%时。当鸡肉粉替代水平达到60%时，大菱鲆幼鱼质量增加率、蛋白质效率显著降低，饲料系数显著升高。当鸡肉粉替代水平达到80%时，大菱鲆幼鱼终末体质量、特定生长率、蛋白质效率和质量增加率均显著降低，与Yigit等[8]研究结果相同，而Turker等[9]发现鸡肉粉替代50%的鱼粉时出现相同的试验结果。但Zhu等[11]却发现，即使鸡肉粉替代80%鱼粉对同属鲆鲽类的褐牙鲆生长性能指标也不产生影响。替代鱼粉存在的主要问题是限制性氨基酸缺乏、消化率低和适口性较差[2,13]，鸡肉粉相比于鱼粉缺乏必需氨基酸特别是赖氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸等[2,11,14]，而氨基酸不平衡会抑制鱼类的摄食并影响其氨基酸的利用，进而抑制鱼类生长。有研究[13,15]发现，鸡肉粉替代会导致饲料适口性降低，而适口性降低是导致蛋白源替代鱼粉后鱼类生长性能显著降低的主要原因[15]。同时鱼粉含量的降低也削弱了鱼粉中促生长因子、诱食因素对大菱鲆幼鱼摄食和生长的促进作用。综上，试验中出现的生长性能下降的结果很可能是鸡肉粉替代鱼粉导致饲料适口性下降和氨基酸不平衡造成的。

本试验鱼体组成分析结果显示，鸡肉粉替代鱼粉对大菱鲆幼鱼体组成的水分、灰分无显著影响，但Yigit等[8-9]发现，鸡肉粉替代75%的鱼粉时黑海菱鲆水分和灰分显著升高；本试验还发现，鸡肉粉替代鱼粉显著降低大菱鲆幼鱼粗脂肪含量，这与Yigit等[8-9]粗脂肪含量的研究结果相同，而大菱鲆幼鱼粗蛋白含量不受鸡肉粉替代的影响，这与Turker等[9]研究结果相同，但Yigit等[8]发现黑海菱鲆粗蛋白含量在鸡肉粉替代75%鱼粉后显著降低，这些结果差异很可能与试验对象和试验条件的不同有关。鸡肉粉替代鱼粉对鱼类体组成的影响，不同的试验得到的结果亦不同。董纯等[10]发现以含有鸡肉粉的混合蛋白源替代鱼粉对大菱鲆幼鱼体组成未产生影响。同样，对点带石斑鱼[2-3]、状黄姑鱼[4-5]的研究也发现，鸡肉粉作为蛋白源替代鱼粉对体组成不产生影响。鱼体蛋白质和灰分含量大部分与鱼类的生长阶段有关[16]，这可能是大菱鲆幼鱼粗蛋白和灰分含量与对照组相比没有差异的原因，而鱼体脂肪含量主要依靠外源因子[16]，这使得大菱鲆幼鱼粗脂肪含量受鱼粉替代的影响显著。

3.2 鸡肉粉替代鱼粉对大菱鲆幼鱼蛋白质代谢的影响

谷丙转氨酶与谷草转氨酶是动物体内氨基酸代谢的重要酶类，在正常情况下血清中的转氨酶活性较低，当动物体受到各种营养不良或者胁迫作用，尤其是肝脏受损时，往往导致血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶含量升高[16]，血清谷草转氨酶和谷丙转氨酶活力可以作为肝脏损伤的指示物[17]，本试验研究发现鸡肉粉替代20%鱼粉时，血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力与对照组无差异，说明大菱鲆幼鱼健康状况良好。Robaina等[18]发现当肉骨粉含量超过20%时，肝细胞出现坏死，当鸡肉粉替代超过40%鱼粉时，血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力显著升高，表明大菱鲆幼鱼肝脏组织有受损的可能。转氨酶在肝脏内的主要作用是将特定氨基酸的氨基转移到另一个氨基酸上[16]，进行氨基酸代谢。本试验结果显示鸡肉粉替代超过20%的鱼粉时，肝脏谷草转氨酶活力显著升高，当鸡肉粉替代超过80%的鱼粉时肝脏谷丙转氨酶活力显著升高，总体上肝脏转氨酶活力随鸡肉粉替代比例升高而上升，说明肝脏蛋白质代谢活动加强，促进机体适应更高鸡肉粉含量的饲料。邓明均等[19]认为，饲料氨基酸平衡模式对蛋白质周转也会产生显著影响，鸡肉粉相比于鱼粉缺乏赖氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸等必需氨基酸，因此，以鸡肉粉为蛋白原替代鱼粉还应考虑氨基酸平衡问题。

3.3 鸡肉粉替代鱼粉对大菱鲆幼鱼营养物质表观消化率的影响

消化试验率结果表明，鸡肉粉替代20%的鱼粉后，大菱鲆幼鱼粗蛋白消化率与对照组无差异，其他营养物质消化率显著下降。鸡肉粉替代鱼粉显著降低了大菱鲆幼鱼对干物质、粗蛋白等营养物质的表观消化率，这与董纯等[10]研究结果类似，Yang等[7]也发现鸡肉粉替代鱼粉后异育银鲫对干物质、粗蛋白和粗脂肪的消化率均低于对照组。而纪文秀等[20]研究发现花鲈(Lateolabraxjaponicus)对鸡肉粉营养物质的消化率均较高，这说明花鲈对鸡肉粉有较高的消化能力，与Zhu等[11]发现的褐牙鲆消化率不受鸡肉粉替代鱼粉影响的结果类似。造成这些试验结果差异的原因包括不同的幼鱼和指示剂种类等[20]。肝脏是氨基酸代谢的主要场所，Robaina等[18]发现，当肉骨粉含量超过20%时，肝细胞出现坏死，同时鸡肉粉替代鱼粉使饲料必需氨基酸缺乏导致氨基酸不平衡影响氨基酸的利用，两者共同作用导致鸡肉粉替代比例越高蛋白质消化率越低。鱼类对脂肪的消化性能与脂肪源的脂肪酸组成有关，动物性脂肪源的饱和脂肪酸含量高，难以被鱼体消化[21]，鸡肉粉替代鱼粉后饲料中饱和脂肪酸的含量增加[22]，而饲料中饱和脂肪酸含量高会降低鱼体对饲料脂肪和干物质的消化率[23]。王文娟等[24]发现，鱼类对骨磷形式存在的磷的表观消化率较低，随鸡肉粉替代比例的提高饲料中骨磷含量相应升高，因此出现总磷的消化率下降的结果。

4 结 论

鸡肉粉替代20%的鱼粉时，大菱鲆幼鱼特定生长率、蛋白质效率和质量增加率均优于对照组，饲料系数比对照组也略有下降，鸡肉粉替代鱼粉未对大菱鲆体组成造成影响。综合考虑，鸡肉粉替代大菱鲆饲料中鱼粉的比例以20%为宜。

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EffectsofReplacingFishMealwithPoultryBy-productMealonGrowthPerformanceandBodyCompositionofJuvenileTurbotScophthalmusmaximus

LI Zongsheng, WU Lixin, LI Simeng, PENG Bowen, ZHAO Bowen

( Key Laboratory of Hydrobiology in Liaoning Province′s Universities, Dalian Ocean University, Dalian 116023, China )

A study was conducted to evaluate the effects of poultry by-product meal (PBM) as the replacement of fish meal in the diets on the growth performance, body composition of juvenile turbotScophthalmusmaximus. One hundred and eighty juvenile turbot with initial body weight of (22.82±0.08) g were randomly divided into five groups with three replicates in each group and twelve fish per replicate. During the feeding trial, fish in five groups were fed one of five experimental diets, randomly. The results showed that (1) there were significant differences in growth performance among all treatments fed the experimental diets (P<0.05). (2) There were no significant differences (P>0.05) in whole-body proximate composition among the treatments fed PBM replacement of fish meal except crude fat which significantly decreased (P<0.05) compare with the control group. (3) There were significant differences in liver alanine aminotransferase (ALT) when 80% of fish meal was replaced comparing with control group (P<0.05), while the liver glutamic-oxalacetic tranferase (AST) was significantly affected when fish meal was replaced by 20% of PBM. The serum AST and ALT were significantly affected when fish meal was replaced by 40% of PBM．A significant reduction in apparent digestibility coefficients was observed when PBM was used as partial substitute of fish meal protein (P<0.05). The findings indicate that 20% of fish meal can be replaced by PBM without reduction in growth performance.

juvenile turbot(Scophthalmusmaximus); poultry by-product meal; fish meal; replacement; growth performance

10.16378/j.cnki.1003-1111.2016.05.005

S965.399

A

1003-1111(2016)05-0486-06

2015-12-24；

2016-03-16.

国家海洋局公益性行业科研专项(201205025, 201405003).

李宗升(1989-), 男, 硕士研究生; 研究方向：水产动物营养学. E-mail: 601844091@qq.com. 通讯作者：吴立新(1966-), 男, 教授; 研究方向：水产动物生理生态学和营养学. E-mail: wulixin@dlou.edu.cn.