高 倩，秦小明，钟赛意，陈建平

（广东海洋大学食品科技学院，广东 湛江 524088）

黑曲霉产β-葡萄糖苷酶工艺的神经网络优化

高 倩，秦小明，钟赛意，陈建平

（广东海洋大学食品科技学院，广东 湛江 524088）

在单因素试验研究的基础上，采用Box-Behnken中心组合设计，利用JMP 7.0中的神经网络平台，在接种量、初始pH、发酵时间和装液量等4个方面对黑曲霉CⅠCC 2475发酵产β-葡萄糖苷酶工艺条件进行优化，以期获得高酶活力的β-葡萄糖苷酶。结果表明：接种量约11.0%、初始pH值5.6、发酵时间130 h以及装液量70.0mL条件下，黑曲霉发酵产β-葡萄糖苷酶的酶活力达到最大值118.73 U/mL，与单因素优化前61.01 U/mL相比，酶活力提高了48.61%。

黑曲霉CⅠCC2475；β-葡萄糖苷酶；神经网络

β-葡萄糖苷酶（β-glucosidase，EC 3.2.1.21）广泛存在于各类生物体中，属于纤维素酶类水解酶，作用于纤维寡糖中的 β-1,4糖苷键及糖苷类物质中的羟基或芳香基团与糖基之间的糖苷键，在食品[1]、医药[2]、化工[3]等领域具有重要的作用，在糖苷合成过程中也发挥着重要作用[4]。近年来，国内研究学者不断研究β-葡萄糖苷酶的分离纯化[5-6]，但结果仍不理想，分离纯化出的β-葡萄糖苷酶的酶活性与国外研究相比较低，因此仍需要加大对β-葡萄糖苷酶分离纯化的研究。

研究结果发现，从微生物中提取的β-葡萄糖苷酶活性远高于植物中提取的β-葡萄糖苷酶[7]。黑曲霉生长速度较快，发酵周期较短，其发酵生产的酶制剂安全可靠，不含有毒物质，其所产β-葡萄糖苷酶的安全性是国际公认的[8]。在黑曲霉产β-葡萄糖苷酶的研究中，常用的优化分析方法是响应面分析，但是响应面分析有一定的局限性，仅适用于二次函数模型的模拟[9]。……