高娃，马银鹏，陈鹤，张先成

（1.黑龙江省科学院微生物研究所，哈尔滨 150010；2.黑龙江省科学院高技术研究院，哈尔滨 150090）

黑木耳基内、外菌丝生长一致性研究

高娃1,2，马银鹏1，陈鹤1，张先成1,2

（1.黑龙江省科学院微生物研究所，哈尔滨 150010；2.黑龙江省科学院高技术研究院，哈尔滨 150090）

本文通过对黑木耳菌丝在cPDA培养基质内、外菌丝生长速度一致性的研究，探索培养基气生菌丝与基内菌丝生长状况，考察其生长的均一性、一致性问题。结果表明，cPDA培养基质中气生菌丝生长速度和基内菌丝生长速度高度一致，不同生长圈气生、基内菌丝生长也高度一致，仅在回接时菌丝萌发和生长速度上存在差异性。

黑木耳；气生菌丝；基内菌丝；生长速度；一致性

黑木耳［Auricularia auricula(L.ex Hook．)Underw］，又称光木耳、细木耳、云耳，是生长在朽木上的一种腐生真菌，由菌丝体和子实体组成［1-3］。黑木耳在我国的自然分布很广，北起黑龙江、吉林，南到海南岛，西自陕西、甘肃，东至福建、台湾，遍及20多个省，但主要产区是湖北、四川、吉林和黑龙江等地［4］。不同地区黑木耳的品质和营养成分略有差异，其中东北黑木耳质量最好［5］。黑木耳菌丝培养和子实体栽培的研究报道很多［6-8］，但对黑木耳基内、气生菌丝生长的一致性，均一性的研究还未见报道。本研究通过对cPDA培养的黑木耳菌丝进行基内、气生菌丝生长状况的检测，观察基内、外菌丝生长速度，了解菌丝基内、外菌丝生长一致性。具体操作及结果如下：

1 材料和方法

1.1 供试菌株

黑29，由微生物研究所菌种保藏中心提供。

1.2 培养基

土豆200g（煮汁1 000 mL），琼脂粉13.0g，葡萄糖20.0g，磷酸二氢钾3.0g，硫酸镁1.5g，蛋白胨0.5g，维生素B110.0mg，pH自然。

1.3 实验方法

1.3.1 菌丝培养

取直径88mm的灭菌平皿，倒入35mLcPDA培养基，铺6mm厚的cPDA培养平皿，接入2×2mm的母种，25℃培养箱中暗培养。

1.3.2 菌丝一致性测定

分别取接种生长4d、8d、14d的cPDA平皿，于培养基的上、中、下3层分别取样，取样点分别位于接种点四周圆逐渐向外菌丝生长圈和外延表面未见气生菌丝圈，具体见图1。取样后转接于cPDA试管（18× 180mm）斜面中，25℃培养箱中培养，观察各取样点菌丝萌发生长状况。

图1 不同培养时间平皿菌丝生长菌圈Fig.1 The plate mycelial growth ring of different incubation time

1.3.3 统计分析

计算菌丝生长速度和进行DPS差异显著性分析。

2 结果

2.1 不同菌丝圈上、中、下培养基回接菌丝生长情况

菌丝培养不同时期生长速率上、中部取样点转接长速差异不大，下部菌丝培养前期（4d、8d）取样点转接长速差异不大，培养后期（14d）差异明显，不同取样圈的菌丝生长速度有较大的差异，尤其是生长初期（4d）的下部菌丝和取样点为生长前端的菌丝，萌发生长速度较慢。

图2 不同培养时间菌丝转接Fig.2 The mycelial through connection results of different incubation time

2.2 不同菌丝生长圈上、中、下培养基取样点菌丝生长速度及差异性

不同生长圈取样点菌丝生长速率和差异性分析表明，1、2、3菌圈取样点菌丝生长速率差异不显著，以为这些菌丝已经萌发生长一定的时间，萌发生长速度较一致。4、5菌圈取样点菌丝生长速率差异较显著，这些菌丝则为刚生长的幼嫩菌丝，因此在转接传代时表现萌发速度慢，菌丝生长速度差异性大。

不同培养时间（4d、8d、14d）、不同部位（上、中、下部）取样点菌丝生长速率和差异比较见表1，不同取样部位菌丝萌发生长上、中部1、2、3菌圈菌丝长速无差异，其他部位存在差异，尤其是取样部位为培养基质的下部时，菌丝萌发速度、生长速度均较慢。不同取样时间对菌丝萌发生长影响不大，相同部位不同培养时间只有下部菌丝萌发速度有小的差异，其他处理无差异性。

3 结论

实验利用88mm平皿，基质培养基厚度为6mm，我们对表层、基质中部和基质下部培养基取样进行了菌丝回接，实验结果显示，虽然菌丝培养时间、取样圈生长点、基质取样部位存在不同，但发现表面气生菌丝与基内菌丝生长速度高度一致。菌丝萌发生长后，不同部位气生、基内菌丝生长存在高度一致性，仅在回接后菌丝萌发和生长速度上存在差异性。

表1 取样点回接菌丝生长速度Tab.1 Sampling point tieback mycelial growth rate

［1］杨新美.食用菌栽培学［M］.北京:中国农业出版社，1995.

［2］于文志.黑龙江省森工企业黑木耳产业发展方向［J］.中国林副特产，2007，91(6):93-95.

［3］李楠，李玉.黑木耳代用料栽培关键技术研究［J］.菌物研究，2008，6(3): 183-186.

［4］张介驰，张丕奇，韩增华，等.黑木耳袋栽技术研究进展［J］.中国食用菌，2010，29(6):3-7.

［5］任立新.伊春市黑木耳产品质量调查研究［J］.现代农业科技，2012，(4): 351,353.

［7］张介驰，韩增华，张丕奇，等.发菌温度对黑木耳菌丝和子实体生长的影响［J］.食用菌学报，2014，21(2):36-40.

［8］孙永琴.黑木耳秋季栽培技术［J］.食用菌，2009，31(6):51-52.

Study on Consistency of Growth Rate of Internal and External Mycelium of Auricularia auricula-judae

GAO Wa1,2，MA Yin-peng1，Chen He1，ZHANG Xian-cheng1,2
(1.Institute of Microbiology,Heilongjiang Academy of Sciences,Harbin 150010;
2.Institute of Advanced Technology,Heilongjiang Academy of Sciences,Harbin 150090,China)

The mycelium growth rate of internal and external of Auricularia auricula-judae was studied to know consistency of aerial and substrate mycelia.The results showed that the mycelium growth rate of internal and external mycelium was highly consistent.What's more,it was also highly consistent at different times.However,there were differences in both mycelium germination and growth speed.

A.auricula-judae;Aerial mycelia;Substrate mycelia;Growth rate;Consistency

S646.6

A

1674-8646（2016）01-0014-02

2015-11-16

现代农业产业技术体系建设专项资金（CARS-24）

高娃（1971-），女，黑龙江哈尔滨人，高级工程师，从事食药用菌菌种分类、鉴定、栽培研究。

张先成（1984-），男，高级工程师，从事食药用菌菌种分离鉴定、栽培生理生化、功效成分提取开发研究。