泥鳅和大鳞副泥鳅细胞色素P450c17-Ⅰ(CYP17-Ⅰ)基因的克隆及组织表达分析
2016-12-08刘士力张爱菊练青平吴卫君贾永义蒋文枰
刘士力,张爱菊,练青平,吴卫君,贾永义,蒋文枰,李 飞
(1.浙江省淡水水产研究所 农业部淡水渔业健康养殖重点实验室/浙江省淡水水产遗传育种重点实验室,浙江 湖州313001; 2.上海海洋大学 水产与生命学院,上海201306; 3.庆元县水利局 水产技术推广站,浙江 庆元323800; 4.庆元县水电学会 水产分会,浙江 庆元323800)
泥鳅和大鳞副泥鳅细胞色素P450c17-Ⅰ(CYP17-Ⅰ)基因的克隆及组织表达分析
刘士力1,2,张爱菊1,练青平1,吴卫君3,4,*,贾永义1,蒋文枰1,李 飞1
(1.浙江省淡水水产研究所 农业部淡水渔业健康养殖重点实验室/浙江省淡水水产遗传育种重点实验室,浙江 湖州313001; 2.上海海洋大学 水产与生命学院,上海201306; 3.庆元县水利局 水产技术推广站,浙江 庆元323800; 4.庆元县水电学会 水产分会,浙江 庆元323800)
采用3′-和5′-RACE法克隆了泥鳅和大鳞副泥鳅CYP17-Ⅰ基因的cDNA全长序列,通过实时荧光定量PCR技术分析其表达情况。结果表明,泥鳅CYP17-Ⅰ基因cDNA全长1706bp,开放阅读框(open reading frame,ORF) 1563bp,编码520个氨基酸;大鳞副泥鳅CYP17-Ⅰ基因cDNA全长1763bp,ORF长1545bp,编码514个氨基酸。2种鳅CYP17-Ⅰ氨基酸序列都有1个信号肽、1个跨膜区、1个保守的蛋白结构域和3个功能保守区。相似度分析显示,2种鳅之间CYP17-Ⅰ相似度为99%,与其他鱼类的相似度也超过70%。系统进化分析显示,2种鳅之间关系最为接近,其系统发育关系基本符合传统的分类地位。qRT-PCR结果显示,CYP17-Ⅰ在2种鳅的肠、肌肉、心脏、胃、肝脏、精巢、卵巢、脾脏等8个组织均有表达,在精巢和卵巢中表达量相对较高。
细胞色素;泥鳅;大鳞副泥鳅;CYP17-Ⅰ
细胞色素P450c17(cytochrome P450c17,CYP17)是一种单一微粒体酶,属于CYP450家族,在类固醇激素(甾体激素)合成中起关键作用,具有17α-羟化酶、17,20-裂解酶等酶活性[1-3]。……
