余喜然，卓德祥，汤俊峰，郑水娥

(福建医科大学附属三明第一医院检验科，福建三明 365000)



·论 著·

联合检验对珠蛋白生成障碍性贫血与缺铁性贫血的诊断价值评价

余喜然，卓德祥，汤俊峰，郑水娥

(福建医科大学附属三明第一医院检验科，福建三明 365000)

目的 研究联合检验对珠蛋白生成障碍性贫血(以下简称地贫)与缺铁性贫血(IDA)的诊断价值。方法 选择2013年8月至2015年2月该院收治的地贫患者36例、IDA患者34例及健康体检者30例作为研究对象。对各组入选样本进行联合检验，检测内容包括平均红细胞比容(MCV)、红细胞体积分布宽度(RDW)、血红蛋白(Hb)电泳及红细胞(RBC)渗透脆性试验(以下简称RBC脆性)等血液学指标。结果IDA组和地贫组患者MCV、RBC脆性均下降，IDA组患者RDW上升，地贫组患者HbA2上升，与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。RDW对IDA的灵敏度为70.6%，低于地贫(77.8%)，但差异无统计学意义(P>0.05)。MCV、Hb电泳、RBC脆性对地贫的灵敏度分别为97.2%、88.9%、77.8%，特异性分别为80.0%、90.0%、83.3%。MCV联合Hb电泳、Hb电泳联合RBC脆性、MCV联合Hb电泳联合RBC脆性并联试验对地贫的灵敏度分别为100.0%、97.2%、100.0%，明显高于单项检验的灵敏度；而MCV联合Hb电泳、Hb电泳联合RBC脆性、MCV联合Hb电泳联合RBC脆性串联试验对地贫的特异性分别为96.7%、100.0%、100.0%，明显高于单项检验特异性，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 应用血液学指标、Hb电泳及RBC脆性联合检验地贫与IDA能显著提高诊断准确性，值得推广应用。

实验室技术和方法； 地中海贫血/诊断； 贫血,缺铁性/诊断

珠蛋白生成障碍性贫血(以下简称地贫)是一种遗传性溶血性疾病，是由珠蛋白肽链合成速率不平衡，引起血红蛋白合成障碍所致[1]。地贫除伴轻微贫血或精神不佳外通常无明显临床特征，但当配偶均为地贫杂合子携带者时则易发生基因缺失或突变，导致新生儿死亡或妊娠晚期胎死腹中。随着循证检验医学的兴起，发现过多的检查会干扰诊断结果和治疗预后。鉴于此，本研究从循证观念着手，对平均红细胞比容(MCV)、红细胞体积分布宽度(RDW)、血红蛋白(Hb)电泳及红细胞(RBC)渗透脆性试验(以下简称RBC脆性)等指标检测及其联合检测进行系统分析，旨在筛查出地贫杂合子携带者，改善围生儿不良结局，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2013年8月至2015年2月本院收治的地贫患者36例(地贫组)，其中男21例，女15例；年龄7～42岁，平均(24.9±3.3)岁。缺铁性贫血(IDA)患者34例(IDA组)，其中男12例，女22例；年龄10～54岁，平均(31.4±4.1)岁。地贫组和IDA组患者均经《血液病诊断及疗效标准》分型确诊[2]。另选择同期健康体检者30例为对照组，其中男14例，女16例；年龄19～51岁，平均(33.6±3.4)岁。

1.2 标本采集及检验 采集入选者早晨空腹肘静脉血1～2 mL置于含乙二胺四乙酸二钾的冷试管中混合10～20 min，保存于温室中，每日质控。

1.2.1 MCV、RDW检验 采用日本K-4500型全自动红细胞计数仪严格按操作流程进行测定。正常范围：MCV 82～94 fL，RDW 11.6%～14.6%。

1.2.2 Hb电泳检验 采用美国spife3000型全自动电泳分析仪进行Hb电泳检验。参考标准：(1)伴快速区带初步诊断为α-地贫；(2)HbA2 3.5%～6.0%诊断为轻型β-地贫；(3)HbF>40.0%，仅少量或无HbA确诊为重型β-地贫。

1.2.3 RBC脆性检验 采用简易红细胞脆性一管法，正常参考值为溶血百分率大于60%。

1.2.4 地贫基因诊断 α-珠蛋白基因检验应用双重PCR扩增技术，β-珠蛋白基因采用反向杂交技术。

1.3 诊断评价 参考全国临床血液学指标检验标准[3]：MCV阳性数和敏感数均为小于82 fL，阴性数和不敏感数均为大于82 fL；RDW阳性数和敏感数均为大于14.6%，阴性数和不敏感数均为11.6%～14.6%；Hb电泳阳性数和敏感数均为小于2.5%或大于3.5%，阴性数和不敏感数均为2.5%～3.5%；RBC脆性阳性数和敏感数均为小于60%，阴性数和不敏感数均为大于60%。并联试验：检验中存在阳性结果即为阳性数；串联试验：所有检验均为阳性结果即为阳性数。

2 结 果

2.1 各组血液学指标比较IDA组患者MCV下降，RDW上升，RBC脆性下降；地贫组患者MCV下降，HbA2上升，RBC脆性下降。与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 各组血液学指标比较

*：P<0.05，与对照组比较。

2.2RDW检验IDA与地贫的结果 34例IDA组患者中RDW阳性14例，阴性10例，RDW对IDA的灵敏度为70.6%；36例地贫组患者中RDW阳性8例，阴性28例，RDW对IDA的灵敏度为77.8%。RDW对IDA的灵敏度低于地贫，但差异无统计学意义(P>0.05)。

2.3 单项检验对地贫的诊断评价 36例地贫组患者中MCV阳性35例，阴性1例；Hb电泳阳性32例，阴性4例；RBC脆性阳性28例，阴性8例。30例对照组健康者中MCV阳性5例，阴性24例；Hb电泳阳性3例，阴性27例；RBC脆性阳性5例，阴性25例。MCV对地贫的灵敏度为97.2%，特异性为80.0%；Hb电泳对地贫的灵敏度为88.9%，特异性为90.0%；RBC脆性对地贫的灵敏度为77.8%，特异性为83.3%。

2.4 联合检验对地贫的诊断评价MCV联合Hb电泳、Hb电泳联合RBC脆性、MCV联合Hb电泳联合RBC脆性并联试验对地贫的灵敏度分别为100.0%、97.2%、100.0%；MCV联合Hb电泳、Hb电泳联合RBC脆性、MCV联合Hb电泳联合RBC脆性串联试验对地贫的特异性分别为96.7%、100.0%、100.0%。见表2。

表2 联合检验对地贫的诊断评价(n)

3 讨 论

IDA是由体内铁供应量难以满足正常红细胞生长的需求量而引起Hb合成障碍的一种常见贫血[4]。而地贫是一组染色体不完全显性遗传性溶血性贫血，地贫患者可以通过配偶双方遗传给下代。因此，婚龄夫妇在婚前、孕前进行地贫检查对改善围生儿不良结局至关重要。据国内外文献报道，聚合酶链反应(PCR)技术结合其他分子生物学检验是地贫检测最有效的诊断方法，但价格昂贵、操作复杂，不利于临床普检[5-6]。IDA和地贫均为小细胞低色素贫血[7]，且MCV、RDW、Hb电泳及RBC脆性血液学指标均是小细胞低色素贫血的常用分类指标。因此，本研究将该类血液学指标应用于产前对地贫杂合子携带者的筛查，且与分子学检验结果进行比较，以评价上述检验方式在筛查地贫中的应用价值，进而获得一种最为合适的检验方式。

本研究结果显示，与对照组比较IDA组患者RDW上升，而地贫组患者RDW无明显变化，且RDW对IDA的灵敏度为70.6%。提示RDW能区分IDA与地贫，且可以作为筛查IDA的初步诊断指标，与Singer等[8]和张莉等[9]研究结果相似，依据MCV、RDW参数分类法，IDA属小细胞不均一性贫血，表现为MCV下降，RDW上升；而地贫属小细胞均一性贫血，表现为MCV下降，RDW正常。同时还发现，地贫组患者MCV、HbA2、RBC脆性与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)，表明MCV、HbA2、RBC脆性联合检验可降低漏检率。另外在单项检验中发现，MCV对地贫的灵敏度优于Hb电泳、RBC脆性，提示MCV下降是地贫的一种普遍特性。这可能与以下因素有关：(1)在行电泳区带的洗脱及检验时易出现洗脱不彻底或比色卡误差，进而造成对轻型β-地贫的漏诊；(2)重症地贫会发生溶血反应，使网织红细胞或红细胞碎片增加或采集血液不新鲜都易产生假阴性[10]，影响RBC脆性结果，使地贫携带者未能被检查出来。然而从本研究结果可知，IDA也常伴MCV下降，因而单纯MCV诊断仍有漏诊的可能。为进一步提高对地贫的检验结果，本研究遵循循证检验医学原理将已有的检验相结合，即联合检验。结果表明，MCV联合Hb电泳、MCV联合Hb电泳联合RBC脆性并联试验对地贫的灵敏度均达100.0%，且Hb电泳联合RBC脆性、MCV联合Hb电泳联合RBC脆性串联试验对地贫的特异性也均达100.0%，与李萍[11]和Khalil等[12]研究结果相符，说明并联试验有利于提高地贫的灵敏度，而串联试验则提高了地贫的特异性。提示实施MCV联合Hb电泳联合RBC脆性并联试验对诊断地贫的应用价值较高。

综上所述，应用血液学指标、Hb电泳、RBC脆性联合检验能有效提高对地贫与IDA的诊断准确性，且时效性强，操作简单，值得临床广泛应用。

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The value of the combined test for the diagnosis of thalassemia and iron deficiency anemia

YuXiran，ZhuoDexiang，TangJunfeng，ZhengShui′e

(DeparmentofClinicalLaboratory,theFirstHospitalofSanmingCityAffiliatedtoFujianMedicalUniversity,Sanming,Fujian365000,China)

Objective To investigate the value of the combined test in the diagnosis of thalassemia and iron deficiency anemia(IDA).Methods From August 2013 to February 2015,36 patients with thalassemia,34 patients with IDA,and 30 healthy people who had undergone physical examination were enrolled in the study.The blood samples of those people were tested,and items of the combined test included content of red blood cell volume(MCA),red blood cell volume distribution width(RDW),hemoglobin(Hb) electrophoresis and red blood cell(RBC).Results The patients with IDA or thalassemia had reduced MCA and RBC fragile,patients with IDA had increased RDW,and patients with thalassemia had increased HbA2,compared with the control group the differences were all statistically significant(P<0.05).The sensitivity of RDW to IDA was 70.6%,and to thalassemia was 77.8%,the difference was not statistically significant (P>0.05).The sensitivities of MCV,Hb electrophoresis,RBC fragility to thalassemia were 97.2%,88.9%,77.8% respectively,and the specificity were 80.0%,90.0%,83.3% respectively.The sensitivities of MCA test combined with Hb electrophoresis,hemoglobin electrophoresis combined with RBC brittleness test and parallel combined test of MCA，Hb electrophoresis and RBC brittleness to thalassemia were 100.0%,97.2%,100.0% respectively,which were significantly higher than those of single tests;the specificities were 96.7%,100.0% and 100.0% respectively,which were significantly higher than those of single tests;the differences were statistically significant(P<0.05).Conclusion The application of hematological parameters,Hb and RBC in the diagnosis of anemia and IDA could significantly improve the diagnostic accuracy,and it is worthy of popularization and application.

laboratory techniques and procedures； thalassemia/diagnosis； anemia,iron-deficiency/diagnosis

余喜然，男，副主任技师，主要从事临床血液学检验的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.02.011

A

1673-4130(2016)02-0169-03

2015-07-10)