倪雪梅，朱巧英，李 宁，成春岚

(四川省妇幼保健院检验科，四川成都 610036)



·论 著·

化学发光法与PCR法联合检测孕妇单纯疱疹病毒感染率分析

倪雪梅，朱巧英，李 宁，成春岚

(四川省妇幼保健院检验科，四川成都 610036)

目的 对化学发光法与聚合酶链反应(PCR)联合检测孕妇单纯疱疹病毒(HSV)的感染率进行分析，为临床诊断提供依据。方法 采集该院孕期常规建卡的孕妇血清，用化学发光法检测血清HSVIgM与IgG抗体水平；对其中任一项结果阳性者取宫颈分泌物进行HSVDNA定性检测。结果HSV1DNA阳性率为0.5%(7/1 422)，HSV2DNA阳性率为1.1%(16/1 422)。HSVIgM和IgG同时阳性者HSV1DNA阳性率为0.4%(4/1 008)，HSV2DNA阳性率为0.6%(6/1 008)；仅HSVIgM阳性者HSV1DNA阳性率为0.8%(1/130)，HSV2DNA阳性率为3.1%(4/130)；仅HSVIgG阳性者HSV1DNA阳性率为0.7%(2/284)，HSV2DNA阳性率为2.1%(6/284)。3种情况HSV抗体阳性者HSV1DNA阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)，而HSV2DNA阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 在孕期对HSV抗体进行常规检查，对抗体阳性者进行DNA检测，能提高诊断准确率。尽量做到早期筛查、早期发现、及早对孕妇进行治疗。

化学发光测定法； 聚合酶链反应； 单纯疱疹病毒属/分离和提纯； 孕妇

单纯疱疹病毒(HSV)属疱疹病毒科，有包膜双链的DNA病毒。HSV有2种血清型，即HSV1和HSV2，其所致感染极为常见，且症状多样。HSV1潜伏于三叉神经节内的神经元细胞中。其原发或激活感染主要为腰以上部位，由口腔、呼吸道传播。而HSV2主要潜伏于脊骶神经节内的神经元细胞内，主要感染生殖器和腰以下部位，传播途径以性传播为主。

HSV的宿主范围较广，几乎可以感染各种胚胎和新生动物来源的上皮细胞和成纤维细胞。HSV感染后常潜伏于神经节中，极易复发和传播，近年来其感染趋势在全球迅速增加。隐性患者及无症状者是该病的主要传染源，及时发现并采取措施是预防该病传播和及时治疗的关键环节。特别是孕妇HSV的早期检测可预防因感染而导致的新生儿死亡或神经系统功能受损[1]。孕期HSV抗体检测很有必要，作者对2014年1～12月于本院产科建卡的孕妇进行HSV抗体检测结果发现，HSV IgM或IgG抗体阳性标本1 422例，取宫颈分泌物进行HSV DNA检测，并进行阳性率分析，旨在了解孕期HSV感染情况并为临床诊断提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 对2014年1～12月于本院产科建卡的孕妇进行HSV抗体检测，将检测结果为HSV IgM或IgG 阳性者1 422例作为研究对象。其中HSV IgM和IgG同时阳性者1 008例，仅HSV IgM阳性者130例，仅HSV IgG阳性者284例。

1.2 方法 采用索林(Dia Sorin)LIAISON 仪器，应用化学发光法检测血清HSV IgM 和IgG 抗体，其中任一项抗体为阳性者取宫颈分泌物采用罗氏 Light Cycler仪器检测 HSV DNA。

1.3 统计学处理 应用SPSS20.0统计软件进行数据分析，计数资料以率或构成比表示，组间比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

HSV1 DNA阳性率为0.5%(7/1 422)，HSV2 DNA阳性率为1.1%(16/1 422)。HSV IgM和IgG同时阳性者HSV1 DNA阳性率为0.4%(4/1 008)，HSV2 DNA阳性率为0.6%(6/1 008)；仅HSV IgG阳性者HSV1 DNA阳性率为0.7%(2/284)，HSV2 DNA阳性率为2.1%(6/284)；仅HSV IgM阳性者HSV1 DNA阳性率为0.8%(1/130)，HSV2 DNA阳性率为3.1%(4/130)。3种情况HSV抗体阳性者HSV1 DNA阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)，而HSV2 DNA阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 HSV抗体阳性与HSV DNA阳性结果比较[n(%)]

*：P<0.05，与HSV-IgM和IgG同时阳性比较。

3 讨 论

HSV1感染一般发生于眼唇、口腔、脑和腰部以上皮肤，HSV2感染较常见于子宫颈、外生殖器及腰部以下皮肤[2]。孕妇感染HSV可使胎儿产生先天性感染，诱发流产、早产、死胎、畸形等[3-4]。因此，怀孕期间应将HSV作为常规检测项目，对阳性患者早做处理，即产前诊断很有必要。产前诊断是指在出生前对胚胎或胎儿的发育状态、是否患有疾病等进行检测诊断，产前诊断是围生期保健的重要组成部分，是有效提高我国人口素质、减少各种缺陷性疾病发生的重要手段[5]。

HSV主要经产道感染胎儿黏膜进而感染胎儿。胎儿及新生儿感染HSV后预后较差，有研究表明，在原发感染HSV胎儿中40%出现严重围产期死亡，而继发感染病例围生期死亡率显著降低[6]。

孕妇若发生感染大约在4～7 d时能检测出IgM抗体，是早期发生感染的指标；IgG抗体大约在感染15 d后才出现[7-8]。联合IgM和IgG检测有利于帮助孕妇查明是最近感染、再次感染、还是既往感染：(1)IgG(+)、IgM(-)说明是既往发生的感染，孕妇具有一定免疫力；(2)IgG(-)、IgM(+)说明是最近发生的感染；(3)IgG(+)、IgM(+)说明是既往感染或再次感染；(4)IgG(-)、IgM(-)说明无免疫力，能够进行免疫接种。其中(2)项和(3)项均可表明是最近可能发生感染，确认需要做进一步实验[9]。

母体HSV1抗体对胎儿的保护效应显著弱于HSV2抗体的保护，妊娠期间激活的HSV1抗体传播给胎儿的风险显著高于HSV2[10]。由于化学发光法检测的HSV抗体不能区分HSV1还是HSV2，本院采用PCR检测患者宫颈分泌物中HSV DNA，对HSV种类进行鉴别。因采用的标本是宫颈分泌物，可能对HSV1的检测阳性率会偏低一些，但是HSV是作用于神经节，而且主要经产道感染胎儿，所以足以达到检测目的。

综上所述，在临床工作中对HSV应早期筛查、早期发现，及早对孕妇进行治疗很有必要。如孕妇早期或中期检测出HSV DNA阳性时最好立即终止妊娠；而孕妇处于妊娠晚期或不愿终止妊娠时应主动配合检查，同时结合超声波、羊水穿刺等方式进行动态监测，及时采取适当措施。

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The detection of herpes simplex virus infection rate by jointly using chemiluminescence assay and PCR

NiXuemei，ZhuQiaoying，LiNing，ChengChunlan

(DepartmentofClinicalLaboratory，Maternal&ChildHealthHospitalofSichuanProvince，Chengdu，Sichuan610036,China)

Objective Detect the infection rate of herpes simplex virus (HSV) by jointly using chemiluminescence assay and PCR,and provides reference for clinical diagnosis.Methods The serum samples were collected from the pregnant women who had routine examination records in the hospital.Chemiluminescence assay was used to detect HSV IgM and IgG in those samples.Cervical secretions were collected from pregnant women with positive results and qualitatively tested for HSV DNA.Results The positive rate of HSV1 DNA was 0.5%(7/1 422)，the positive rate of HSV2 DNA was 1.1% (16/1 422).For pregnant women whose HSV IgM and IgG were both positive，positive rate of HSV1 DNA was 0.4% (4/1 008) and that of HSV2 DNA was 0.6%(6/1 008);for those who only had HSV IgM positive，the positive rate of HSV1 DNA was 0.8%(1/130)，and that of HSV2 DNA was 3.1% (4/130);for those who only had HSV IgG positive，the positive rate of HSV1 DNA was 0.7%(2/284)，that of HSV2 DNA was 2.1%(6/284).Among those three HSV antibody positive cases,the difference in HSV1 DNA positive rate was not statistically significant(P>0.05)，while the difference in HSV2 DNA positive rate was statistically significant(P<0.05).Conclusion The test of HSV antibodies during pregnancy can be used as a routine test，and HSV DNA test can be used as further test for those with HSV antibody positive，which could improve the accuracy of diagnosis.Early screening，detection，and treatment are important for pregnant women with HSV infection.

chemiluminescent measurements； polymerase chain reaction； simplexvirus/isolation & purification； pregnant women

倪雪梅，女，主管技师，主要从事临床及免疫学检验的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.02.006

A

1673-4130(2016)02-0157-02

2015-08-17)