甲状旁腺激素-人血清白蛋白融合蛋白在CHO细胞中的表达
2016-12-02张焕徐栋生蔡燕飞陈蕴金坚
张焕,徐栋生,蔡燕飞,陈蕴,金坚
(江南大学药学院,江苏无锡214122)
甲状旁腺激素-人血清白蛋白融合蛋白在CHO细胞中的表达
张焕,徐栋生,蔡燕飞,陈蕴,金坚
(江南大学药学院,江苏无锡214122)
人甲状旁腺激素是由人甲状腺旁腺主细胞分泌合成的一种单链多肽激素,成熟的甲状旁腺激素含84个氨基酸残基,其活性区域为N-末端1-34氨基酸片段,目前已上市的PTH药物也以34个氨基酸残基的多肽为主,主要用于治疗老年骨质疏松以及绝经后妇女骨质疏松。但是PTH的稳定性较差,导致体内半衰期短,难以形成有治疗作用的稳态血药浓度,从而限制了其临床应用。因此,设计稳定并能保持原有生物活性的PTH药物分子至关重要。构建含有融合蛋白基因PTH-HSA的pM H3质粒,并通过电转染的方法转入中国仓鼠卵巢细胞(Chinese ham ster ovary cell,CHO细胞)中,利用pM H3质粒所携带的N EO基因进行筛选,最终得到能稳定表达目的蛋白的重组细胞,并在5L发酵罐中进行表达,融合蛋白PTH-HSA表达量达到155m g/L。W estern blot检测显示,该融合蛋白同时具有HSA和PTH双重免疫原性。
甲状旁腺激素-人血清白蛋白;融合蛋白;中国仓鼠卵巢细胞
人甲状旁腺激素(Human parathyroid hormone,hPTH)是由人甲状腺旁腺主细胞分泌合成的一种单链多肽激素,成熟的PTH含84个氨基酸残基,其活性区域为N-末端1-34氨基酸片段,目前已上市的PTH药物也以34个氨基酸残基的多肽为主,主要用于治疗老年骨质疏松以及绝经后妇女骨质疏松[1]。但是PTH发挥的稳定性较差,导致体内半衰期短,难以形成有治疗作用的稳态血药浓度,从而限制了其临床应用[2]。……
