马增晖 （河北省迁安市农业畜牧水产局 064400)

家兔支气管败血波氏杆菌灭活疫苗菌种筛选

马增晖 （河北省迁安市农业畜牧水产局 064400)

兔波氏杆菌病是一种严重危害养兔业的细菌性疾病。兔波氏杆菌病可引起家兔的传染性鼻炎，特别是在规模化养兔场，波氏杆菌与巴氏杆菌、葡萄球菌混合感染相当普遍，已成为兔病防治的一大难题。接种疫苗是目前预防这两种疾病的最有效的措施。本研究从Bb分离株中筛选得到制苗用兔波氏杆菌1株，为研制Bb灭活疫苗打下了坚实的基础。现将菌种的筛选及生物学特性的试验结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验用菌株

Bb分离株6株；沙门氏菌、魏氏梭菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌，均购自中国兽药监察所。

1.1.2 试验动物

16～18g的清洁级小鼠；30日龄左右的健康家兔。

1.1.3 常规培养基

血清血红素平板、TSA平板、胆硫乳 （DHL）平板、麦康凯平板、马丁肉汤等 (按常规方法配制)。

1.1.4 生化培养基及试剂

蛋白胨水、硝酸盐还原培养基、葡萄糖磷酸盐胨水、枸椽酸盐培养基、糖类发酵管、尿素培养基、三糖铁培养基均购自杭州天和微生物试剂有限公司。3%H2O2按照常规方法配制。

1.1.5 血清

Bb标准阳性血清和阴性血清。

1.2 方法

1.2.1 对小鼠的毒力测定

将6株Bb纯培养物接种马丁肉汤，置37℃摇动 （120r/min）培养24h。选择16～18g小鼠分为6组，每组4只。以0.2ml/只腹腔注射，观察3～5d，记录小鼠死亡时间，死亡者剖检，以分离到接种菌为标准。

1.2.2 最小致死剂量 (MLD)的测定

（1）对小鼠最小致死剂量测定。将3株Bb强毒株纯培养物接种马丁肉汤，置37℃摇动 （120r/min）培养24h。……