王 哲,刘 硕,苗文龙

(河北北方学院附属第一医院泌尿外科,河北 张家口 075000)



P53与Mta-1在膀胱癌中的表达及临床意义

王 哲,刘 硕,苗文龙

(河北北方学院附属第一医院泌尿外科,河北 张家口 075000)

目的 探讨P53及Mta-1在膀胱癌中的表达及临床意义。方法 采用免疫组化法分别对60例膀胱癌和10例癌旁正常膀胱黏膜的石蜡标本行P53与Mta-1蛋白检测。结果 P53和Mta-1在膀胱癌标本中的阳性率分别是63.3%(38/60)和71.6%(43/60)，在正常膀胱黏膜组织中的阳性率均为0%，差异有显著性(P<0.01)。P53和Mta-1阳性表达均与膀胱癌患者的临床分期及病理分级相关(P<0.05)；与患者性别、年龄、肿瘤大小等不相关(P>0.05)。Mta-1与P53在膀胱癌的表达呈正相关(r=0.596，P=0.000)。结论 P53及Mta-1的高表达可作为膀胱癌恶性程度及判断预后的重要指标。

膀胱癌；P53；Mta-1

膀胱癌是泌尿系统常见恶性肿瘤，在我国的发病率和病死率均居泌尿生殖系肿瘤首位，肿瘤的复发和转移是导致膀胱癌患者死亡的主要原因[1]。到目前为止，还没有一种可以用作膀胱癌独立诊断的标记物。本研究回顾性分析了河北北方学院附属第一医院病理科2013-2014年间收集的原发性膀胱癌术后病例资料，采用免疫组织化学技术研究生物标记物P53及Mta-1蛋白在膀胱癌的表达并探讨它们与肿瘤生物学特点及转移的关系，以期为临床提供更多信息，指导治疗，减少复发与转移。

1 材料与方法

1.1 材料

河北北方学院附属第一医院病理科2013-2014年间收集的60例原发性膀胱癌术后病例资料，所有患者术前均未行放疗、化疗、激素治疗或免疫治疗。同时选取10例癌旁正常膀胱黏膜石蜡标本为对照。

1.2 方法

1.2.1 HE染色 切片进行常规HE染色核实病理诊断。

1.2.2 免疫组织化学染色 所选蜡块连续切取4 μm白片各2张以供做免疫组化染色，应用S-P法检测。

1.3 结果判断

判断标准：每张图片随机选择5个高倍镜视野，然后计数阳性细胞百分比的平均数，以出现浅黄色、棕黄色、黄褐色颗粒记为阳性细胞，依阳性细胞占所观察细胞的百分比和着色强度综合计分：无染色记为0分,弱染色(颜色为浅黄色)记为1分，中等染色(颜色为棕黄色)记为2分，强染色(颜色为黄褐色)记为3分；阳性细胞率≤5%记0分，5%～25%记1分，25%～50%记2分，>50%记3分。然后将上述两项积分相加，0分记为阴性(-)，1～2分记为弱阳性(+)，3～4分记为中等阳性(++)，5～6分记为强阳性(+++)。

1.4 统计学方法

采用SPSS 11.5统计学软件处理数据，P<0.05为差异有统计学意义。根据不同的数据类型采用χ2检验(Chi-square test)检验和Spearman等级资料相关分析。

2 结 果

2.1 P53免疫组织化学染色结果

2.1.1 P53在膀胱癌及正常膀胱黏膜中的表达情况 结果表明，膀胱癌组织中P53的阳性表达率为63.3%(38/60)，与正常膀胱黏膜差异有显著性(χ2=13.854,P=0.000)(表1)。

表1 P53蛋白在膀胱癌及正常膀胱黏膜中的表达 (n)

2.1.2 P53表达与临床病理特征的关系 P53阳性表达与患者临床分期及病理分级等相关(P<0.05)。临床分期为浸润型、病理分级高的患者P53表达强，其阳性表达与患者性别、年龄、肿瘤大小等不相关(P>0.05)(表2)。

表2 P53表达与膀胱癌临床病理特征的关系(n)

2.2 Mta-1免疫组织化学染色结果

2.2.1 Mta-1蛋白在膀胱癌及正常膀胱黏膜中的表达情况 膀胱癌组织中Mta-1阳性表达率为71.6%(43/60)，与正常膀胱黏膜差异有显著性(χ2=18.580,P=0.000)(表3)。

表3 Mta-1在膀胱癌及正常膀胱黏膜中的表达 (n)

2.2.2 Mta-1表达与临床病理特征的关系 Mta-1阳性表达与患者临床分期、病理分级等相关(P<0.05)。临床分期为浸润型、病理分级高的患者Mta-1表达强。其阳性表达与患者性别、年龄、肿瘤大小等均不相关(P>0.05)(表4)。

表4 P53表达与膀胱癌临床病理特征的关系 (n)

2.3 P53与Mta-1在膀胱癌表达中的关系

Mta-1与P53在膀胱癌的表达呈正相关(r=0.596)。P53在Mta-1阳性组中的表达(阳性率81.4%)明显高于在Mta-1阴性组中的表达(阳性率17.6%)，差异有显著性(P=0.000)。

3 讨 论

近年来，膀胱癌的发病率有所增长，在我国，膀胱癌的发病率和死亡率均在泌尿外科肿瘤中占首位，且膀胱癌的组织学类型以膀胱尿路上皮癌最为常见，占膀胱癌的90%以上。其中约20%～40%的患者为肌层浸润性膀胱癌或高危非肌层浸润性膀胱癌[2]，术后复发或转移仍是导致患者不良预后的常见原因。目前虽然有影像学、尿脱落细胞学检查等多种诊断膀胱癌的方法，但确诊仍依赖于膀胱镜检查及病理活检，到目前为止，还没有一种可以用作膀胱癌独立诊断的标记物。因此，寻找特异性及敏感性均较高的生物学标记物对指导膀胱癌的临床诊断、治疗和预后观察极为重要。

P53基因是与人类肿瘤相关性较高的抑癌基因，也是研究较为广泛的基因之一[3]，研究表明，突变型p53基因对细胞凋亡有抑制作用[4]。人体癌组织中过量表达的P53蛋白通常是由p53基因突变引起的[5]。突变型p53基因目前已证实与乳腺癌、结肠癌、头颈部肿瘤、白血病等恶性肿瘤的不良预后密切相关[6]。本研究采用免疫组化方法检测P53蛋白在膀胱癌及正常膀胱黏膜组织中的表达情况，结果显示，P53高表达且与膀胱癌患者临床分期、病理分级等密切相关，与孙玉朝等[7]的研究结果一致，其表达的变化可能对膀胱癌的演化和进展起重要作用，可作为潜在预测膀胱癌浸润转移的敏感指标。

Mta-1是一种肿瘤转移相关基因，该基因全长2.2 kb，其cDNA全长为2756 bp，编码一个含有703个氨基酸残基的蛋白质Mta-1蛋白，该蛋白主要存在于细胞核内，分子量为79 400。Mta-1基因在大多数正常组织和器官如肝、脑、心、肺、肾、肠道、甲状腺、肌肉组织、睾丸中均有不同程度的表达，在睾丸中表达最高，在骨骼肌表达水平最低，说明Mta-1基因可能在细胞生理与病理状态下均发挥作用[8]。本实验研究结果显示，膀胱癌组织中Mta-1的阳性表达率为71.6%，与正常膀胱黏膜表达差异有显著性(P=0.000)，提示Mta-1与膀胱癌的发生有关。本研究结果表明，Mta-1阳性表达与患者临床分期、病理分级等相关，临床分期为浸润型、病理分级高的患者Mta-1表达强，而其阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小等均不相关，与既往报道结果相一致[9]。

综上，P53及Mta-1的高表达均与膀胱癌患者临床分期、病理分级等有相关性。二者在膀胱癌的表达存在明显正相关，提示二者可能通过某种途径促进膀胱癌细胞的增殖、浸润和转移。

[1]吕磊,袁敬东,吴维，等.长链非编码RNA尿路上皮癌相关1基因与miR-34 b在膀胱癌中的表达及临床相关性研究[J].中华泌尿外科杂志,2016,37(7):538-543.

[2]Pharmacogenomics,杨宏，刘志敏，雷永虹等.膀胱癌根治性膀胱切除加肠道原位新膀胱术患者围手术期致命性并发症分析[J].中华肿瘤杂志,2016,38(3):236-239.

[3]You J,Yang H,Lai Y,et a1.ARID2,P110α,P53 and β-catenin protein expression in hepatocellular carcinoma and elinieopathologie implications[J].Hum Pathol,2015,46(7)：1068-1077.

[4]任鹏,傅亚军,谢珊艳.C-erbB-2、P53及增殖细胞核抗原在卵巢上皮癌中的表达及临床意义[J].浙江实用医学,2016,21(1):12-14.

[5]佐晶，宋艳，李卓，等.P53蛋白表达与晚期卵巢浆液性腺癌预后的相关性[J].中国医学科学院学报,2016,38(2):169-174.

[6]Petitjean A,Achatz M I,Borresen-Dale A L,，et a1.P53 mutations in human cancers：functional selection and impact on cancer prognosis and outcome[J].Oncogene，2007,26(15)：2157-2165.

[7]孙玉朝.膀胱癌组织中P53、血管内皮生长因子、环氧化酶-2和表皮生长因子受体的表达中国老年学杂志[J].2014,34(17):4732-4734.

[8]Nawa A，Nishimori K，Lin P，et al.Tumor metastasis-associated human Mta-1 gene:its deduced protein sequence，localization，and associated with breast cancer cell proliferation using antisense phosphorothioate oligonueleotides[J].Cell Bioehem,2000,79(2):202-212.

[9]李春生.Mta-1与Ezrin在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其相关性[J].中国现代医生,2010,46(28):4-5.

[责任编辑：李蓟龙 英文编辑：刘彦哲]

Expressions of P53 and Mta-1 in Bladder Cancer and Their Clinical Significance

WANG Zhe,LIU Shuo,MIAO Wen-long

(Urology Department,First Affiliated Hospital of Hebei North University,Zhangjiakou,Hebei 075000,China)

Objective To investigate the expression of P53 and Mta-1 in bladder cancer tissue and their clinical significance.Methods The samples comprised of formalin-fixed paraffin-embedded tissue blocks of 60 cases of primary bladder cancer and 10 cases of normal bladder mucosa.The expressions of P53 and Mta-1 in the samples were immunohistochemically determined and their correlation with clinicopathological parameters was statistically analyzed.Results The rates of positive expression of P53 and Mta-1 in bladder cancer tissue were 63.3%(38/60)and 71.6%(43/60),respectively,and in normal bladder mucosa 0%.There was significant difference between the two groups(P<0.01).Furthermore,high expressions of P53 and Mta-1 in bladder cancer were closely related with the clinical stage and pathological grade(P<0.05),but there was no obvious relationship with patient’s sex,age and tumor size(P>0.05).Also,it was found that the expression of P53 was positively correlated with Mta-1 expression in bladder cancer(r=0.596,P=0.000).Conclusion Expressions of P53 and Mta-1 in bladder cancer tissue could serve as significant biomarkers to predict the aggressiveness and prognostic outcome.

bladder cancer;P53;Mta-1

王哲(1978-)，男，河北张家口人，硕士，主治医师，主要研究方向：泌尿系统肿瘤基础和临床研究。

R 737.14

A

10.3969/j.issn.1673-1492.2016.10.002

来稿日期：2016-08-12