李 玉 刘 琦 王敬之 柴龙会 周 旋 肖向红

(东北林业大学，哈尔滨，150040)

东北林蛙重组抗菌肽dybowskin-1ST部分理化特性和生物学活性研究

李 玉 刘 琦 王敬之 柴龙会 周 旋 肖向红*

(东北林业大学，哈尔滨，150040)

东北林蛙；

目的：对具有广谱抑菌活性的东北林蛙(Ranadybowskii)重组抗菌肽dybowskin-1ST进行热稳定性、酸碱稳定性、局部过敏反应(Arthus反应)及溶血活性分析，为进一步摸清重组肽的理化特性及其应用提供科学依据。方法：将重组抗菌肽dybowskin-1ST分别置于不同环境温度(25～100℃)及不同酸碱环境(pH2～pH12)中处理4 h，观察其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)及大肠杆菌(Escherichiacoli)的抑菌环直径，确定其稳定性；用不同浓度梯度的重组dybowskin-1ST进行溶血试验和局部过敏反应(Arthus反应)。结果：1.重组dybowskin-1ST在25～100℃温度及pH2～pH12环境下均有抑菌活性，其中，最适环境温度为25℃；重组dybowskin-1ST在pH3～pH7范围对Staphylococcusaureus抑菌活性较强(抑菌环直径为12.77～13.17 mm)，在pH3～pH8范围对Escherichiacoli抑菌性较强(抑菌环直径为12.63～13.37 mm)。2.溶血试验结果显示，重组dybowskin-1ST对家兔红细胞的溶血率在0.14%～4.4%；小鼠Arthus氏试验观察其腹部皮下重组dybowskin-1ST注射部位红肿不明显，无出血、坏死等炎性反应。结论：实验结果显示重组dybowskin-1ST具有较好稳定性、低溶血性及低致敏性，为其应用提供科学依据。

两栖类动物皮肤腺分泌物中富含功能多样、结构特殊的活性多肽。首先由Zasloff研究组在非洲爪蟾(Xenopuslaevis)的皮肤和胃粘膜上皮细胞发现抗菌肽(Maganins)[1]，随后来自南美蛙的Dermaseptin、来自南亚虎纹蛙的Tigernin-1以及欧洲林蛙的Temporin A等多肽相继被发现。抗菌肽作为两栖类机体防御的主要活性物质，是两栖动物机体固有免疫的重要组成部分之一[2-3]。……