HPLC法测定万古霉素血药浓度
2016-11-11崔海珍郭义明吉林大学中日联谊医院药学部吉林长春130033
崔海珍,郭义明,于 倩(吉林大学中日联谊医院药学部,吉林 长春 130033)
·实验研究·
HPLC法测定万古霉素血药浓度
崔海珍,郭义明,于倩(吉林大学中日联谊医院药学部,吉林 长春 130033)
目的:建立高效液相色谱法测定人血浆中万古霉素浓度,考察不同沉淀剂对万古霉素提取率的影响。方法:以去甲万古霉素为内标,采用Wondasil®C18-WR色谱柱(4.6 mm × 150 mm,5 μm),流速1.0 mL·min-1,检测波长236 nm。采用甲醇-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.2)与乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.2)为流动相,选择其最佳配比,通过实验优化蛋白沉淀剂的浓度及体积,并考察5种沉淀剂对血浆样品提取率的影响。结果:采用甲醇-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.2)(16 : 84)为流动相,乙腈-6%高氯酸(1 : 6)200 μL为沉淀剂时对血浆中万古霉素提取率最好。结论:本实验优化了万古霉素血药浓度测定方法,该方法提取率高、重现性好、操作简便、灵敏,适用于万古霉素血药浓度测定。
万古霉素;高效液相色谱法;血药浓度;提取率
万古霉素属于糖肽类抗菌药物,主要用于严重革兰阳性菌感染,特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染(MRSA)、表皮葡萄球菌和肠球菌耐药菌引起的重症感染[1]。目前万古霉素血药浓度测定方法有酶放大免疫测定法(EMIT)、荧光偏振免疫分析法(FPIA)、液-质联用法(LC-MS/MS)和高效液相色谱法(HPLC),其中HPLC法以高效、灵敏、费用低廉得到广泛使用。蛋白沉淀剂与流动相条件是影响提取率的重要因素之一,笔者选用HPLC法考察两种因素对万古霉素提取率的影响,并建立万古霉素血药浓度测定方法学,为临床安全、合理使用万古霉素提供理论参考。……
