刘玎陈劲刘志朱生伟

（1. 湖南农业大学生物科学技术学院，长沙 410128；2. 中国科学院植物研究所植物分子与生理学重点实验室，北京 100093）

掌叶半夏凝集素基因PPA2抗蚜功能分析

刘玎1，2陈劲1，2刘志1朱生伟2

（1. 湖南农业大学生物科学技术学院，长沙 410128；2. 中国科学院植物研究所植物分子与生理学重点实验室，北京 100093）

掌叶半夏凝集素（Pinellia pedatisecta Agglutinin，PPA）基因属于单子叶甘露糖结合凝集素家族，具有抗虫活性。采用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）技术从掌叶半夏幼叶中克隆到1个新的凝集素基因，命名为PPA2，其开放阅读框长408 bp，编码135个氨基酸，有一个甘露糖保守结合域，包含3个甘露糖专一结合位点。分别构建了由35S启动子和韧皮部特异性启动子AtPP2驱动的植物表达载体，农杆菌介导的叶盘法转化烟草后，经鉴定获得了单拷贝插入高表达量的纯合转基因烟草株系。通过Western-blot分析，将获得的转基因纯合株系按蛋白表达水平分成高、中、低3类并进行抗蚜试验，结果表明这些转基因烟草均具有明显抗蚜效果，35S-PPA2转基因植株平均抑蚜率极高，而3种蛋白表达类型的AtPP2-PPA2转基因植株普遍低于35S启动子驱动下的转基因植株。PPA2可以作为高效抗蚜候选基因，具有重要的应用价值。

掌叶半夏凝集素；基因克隆；转基因烟草；抗蚜基因

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.10.022

蚜虫，又称为腻虫或蜜虫等，隶属于半翅目（原为同翅目），是农林业危害最大的害虫之一。蚜虫为刺吸式昆虫，以刺吸式口器从植物茎、叶和幼穗部位吸取汁液，大量吸收植物的营养成分导致植株生长受到抑制［1］；……